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ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB44内蒙古自治区地方标准DB15/T3363—2024绵羊瘤胃微生物储备糖原的测定方法Thedeterminationofsheeprumenmicrobialreserveglycogen2024-02-232024-02-232024-03-23内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。IIDB15/T3363—2024DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4890mg(Na2HPO4.2H20)，溶于90ml双蒸水中，用盐酸调节pH至6.80，定容至100mL。细菌裂解液：TiangenRK160-02细菌裂解液，主要组成为：50mMTris-HCl、1mMPMSF、0.1%TritonX-100、10mg/mL溶菌酶。2mol/LNaOH220g200mLCO2108mL1000mL6仪器和设备绵羊瘤胃微生物储备糖原的测定方法范围本文件适用于绵羊瘤胃微生物储备糖原的测定。（GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。微生物储备糖原microbialreservecarbohydrate4测定原理标准葡萄糖溶液比色定量。5试剂及配制蒸馏水，符合GB/T66822g1000mL80C2HCl3O2。乙醚，C4HO。1mg/mL100mg80℃烘至恒重）100mL10.0001g。100mL1000mL250mL0℃～50185nm～900nm。20℃～420℃～40200rpm～15000rpm。0.57分析步骤瘤胃微生物样品的制备200mL39℃预热的暖水CO2100mLPBS1:139℃培养，45min20410000rpm10PBSrpm离心10min-20贮存糖原提取1mL15min，10000rpm10min，500uL45minuL10000rpm10min2mol/LNaOH200ul1mL2.2mL4℃的60%v/v15000rpm离心15min60v/v1mL糖原含量测定1ml0.5mL1mg/mL1.5mL2mL10mL215620nm8测定结果的计算糖原含量以W表示，数值以mg/mL计，按公式（1）进行计算：式中：DUDS

WDS

0.512

0.9……………（1）0.5——表示0.5mL葡萄糖标准液中葡萄糖含量；2——表示比色液中标准管稀释倍数为样品管的2倍；1/10——表示由10mL瘤胃

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