土壤微量元素的测定作业指导书

土壤微量元素的测定作业指导书科学研究和生产实践证明微量元素为有机体正常生命活动所必需，在有机体的生活中起着重要作用。土壤和植物中的微量元素都很低，并且这些微量元素在植物体中的缺乏量、适量及致毒量范围很窄，因此微量元素的分析测定工作较常量元素要求更加严格。土壤有效硼的测定（姜黄素比色法）方法原理土样经沸水浸提5分钟，浸出液中的硼用姜黄素比色法测定。姜黄素是由姜中提取的黄色色素，以酮型和稀醇型存在，姜黄素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色，在酸性介质中与B结合成玫瑰红色的络合物，即玫瑰花青昔。它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成，检出B的灵敏度是所有比色测定硼的试剂中最高的摩尔吸收系数&550=1.80x105）最大吸收峰在550nm处。在比色测定B时应严格控制显色条件，以保证玫瑰花青苷的形成。玫瑰花青苷溶液在0.14—0・06mg/LB的浓度范围内符合Beer定律。溶于酒精后，在室温下1—2小时内稳定。主要仪器石英或其他无硼玻璃）；三角瓶（250或3ml）和容量瓶（1ml,10ml）回流装置；离心机；瓷蒸发皿（①7.5cm）;恒温水浴；分光光度计；电子天平（1/1）试剂（1）95%酒精（二级）；（2）无水酒精（二级）；（3）姜黄素一草酸溶液：称取0.04g姜黄素和5g草酸，溶于无水酒精（二级）中，加入4.2ml6mol/LHCl,移入1ml石英容量瓶中，用酒精定容。贮存在阴凉的地方。姜黄素容易分解，最好当天配制。如放在冰箱中，有效期可延长至3—4天。（4）B标准系列溶液：称取0・5716gH3BO3（一级）溶于水，在石英容量瓶中定容成1升。此为1mg/LB标准溶液，再稀释10倍成为10mg/LB标准贮备溶液。吸取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5用水定容至50ml,成为0.20.4,0.60.81.0mg/LB的标准系列溶液，贮存在塑料试剂瓶中。（5）1mol/LCaC2溶液：称取7.4gCaCl2-2H2O（二级）溶于1ml水中。操作步骤1待测液制备：称取风干土壤（通过1mm尼龙筛）10.g于250ml或3ml的石英三角瓶或塑料瓶）中，加20.0ml无硼水。连接回流冷凝器后煮沸5分钟整，立即停火，但继续使冷却水流动。稍冷后取下石英三角瓶。放置片刻使之冷却。倒入离心管中，加2滴1mol/LCaCl2溶液以加速澄清但不要多加），离心分离出清液或过滤到塑料杯中）。2测定：吸取1.ml清液，放入瓷蒸发皿中，加入4ml姜黄素溶液。在55±3°C的水浴上蒸发至干，并且继续在水浴上烘干15分钟除去残存的水分。在蒸发与烘干过程中显出红色，加20.0ml95%酒精溶解，用干滤纸过滤到1cm光径比色槽中，在550nm波长处比色，用酒精调节比色计的零点。假若吸收值过大，说明B浓度过高，应加95%酒精稀释或改用580或6nm的波长比色。3工作曲线的绘制：分别吸取0.2,0.4,0.6,0.8,1.Omg/LB标准系列溶液各血1放入瓷蒸发皿中，加4ml姜黄素溶液，按上述步骤显色和比色。以B标准系列的浓度mg/L对应吸收值绘制工作曲线。结果计算：有效B,mg/L=Cx液土比式中C一由工作曲线查得B的mg/L数；液土比一浸提时，浸提剂毫升数/土壤克数。i壤有效钥的测定(KCNS比色法)方法原理在酸性溶液中，硫氮酸钾(KCNS)与五价钥在有还原剂存在的条件下形成橙红色络合物M0(CNS)5或[M0O(CNS)5]2-,用有机溶剂(异戌醇等)萃取后比色测定。此络合物最大吸收峰在波长470nm处，摩尔吸收系数s470=1.95x104。由于反应条件不同，可能形成颜色较深的其它组成的络合物，因此，对显色的条件必须严格遵守。溶液的酸度和KCNS的浓度都影响颜色强度和稳定性。HCl浓度应小于4mol/L,KCNS浓度应保持至小0.6%。主要仪器往复振荡机；高温电炉；125ml分液漏斗；振荡机；分光光度计；石英或硬质玻璃器皿。试剂：（1）草酸一草酸铵浸提剂：24.9克草酸＜（NH4）2C2O42。，—级）与12.6克草^^（H?C2。422。，—二＜级）^^于水J定容成1升。酸度应为PH3.3,必要时在定容前用pH计校准。所用草酸铵及草酸不应含钥。（2）6.5mmol/L盐酸：用重蒸馏过的盐酸配制。（3）异戊醇一CCl4混合液：异戊醇［（CH＞CH•CH9•CH9•OH,二级］,加等量体积计）CC1（二许KCNS和SnCl2溶液（4柠檬酸二级）⑸20%KCNS溶液:20克KCNS（二级）溶于水，稀释至有）作为增重剂，使比重大于1。为了保证测定结果的准确性，应先将异戊醇加以处理：将异戊醇盛在大分液漏斗中，加少许KCNS和SnCl2溶液（4柠檬酸二级）⑸20%KCNS溶液:20克KCNS（二级）溶于水，稀释至1ml。溶液：10克未变质的SnCl2•2H2O中。加水稀释至1ml,由于SnCl2（6）10%SnCl2溶液：10克未变质的SnCl2•2H2O中。加水稀释至1ml,由于SnCl2也可以用金属锡配制：将5.3克薄锡片溶于20ml浓HCl中，加热至完全溶解不要使溶液蒸发）迅速用无离子水稀释至1ml。也可在前一天晚上溶解锡，不必加热，但要使小块的锡留在管底，不要用水稀释；放置过夜，使锡片缓缓溶解，翌日早稀释至所需浓度。0.05%FeC"6H20.05%FeC"6H2O溶液:

于1升6.5mol/LHCl中。0.5克FeCl3-6H2O(二级)溶（8）1mg/LMO标准液：0.2522克钥酸钠（Na2MoO4-2H2O;二级）溶于水。加入1ml浓HCl（一级），用水稀释成1升，成为1mg/LMo的贮备标准液。吸取5ml贮备标准液准确稀释至5ml,即为1mg/LMo的标准溶液。操作步骤1待测液制备：称取风干土壤通过1mm尼龙网筛）25・g盛于5ml三角瓶中加250ml草酸一草酸铵浸提剂。加瓶塞后在往复振荡机上振荡8小时或过夜。过滤，滤纸事先用6mol/LHCl洗净。过滤时弃去最初的10—15ml滤液。2测定：取2ml滤液含钥量不超过6ug）在烧杯中。继续蒸发至干。加强热破坏部分草酸盐后，放于高温电炉中450°C灼烧，破坏草酸盐和有机物。冷却后加10ml6.5mol/LHCl溶解残渣。放于125ml分液漏斗中。加水至体积约为45ml。加1克柠蒙酸和2—3ml异戊醇一CCl4混合溶液，摇2分钟，静置分层后弃去异戊醇…CCl4层，加入3mlKCNS溶液,混合均匀，这时红色逐渐消失，准确地加入10・0ml异戊醇混合液，摇动2—3分钟。静置分层后，用干滤纸将异戊醇层过滤到比色杯中，在波长470nm处比色测定。3工作曲线的绘制：吸取1mg/LMo标准溶液0，0.10.30.51.02.04.06.0ml分别放入125ml分液漏斗中，各加10ml0.05%FeCl3溶液。按上述步骤萃取和比色系列比色液的浓度为0—0・6mg/LMo），绘制工作曲线。计算结果有效钥，mg/kg=Cx显色液体积x分取倍数/W式中C一由工作曲线查得比色液Mo的mg/L数；显色液体积10ml;分取倍数一浸提时所用浸提剂体积/测定时吸取浸出液体积=250/2；W—土壤样品重量=25g土壤中铜、锌、锰、铁的测定采用原子吸收分光光度法测定土壤中Cu、Zn、Mn、Fe,方法迅速、准确，并且可以采用一次处理样品，使用统一工作曲线，测定Cu、Zn、Mn、Fe四个元素。方法原理原子吸收分光光度法测定Cu、Zn、Mn、Fe的灵敏度很高，使用乙焕一空气火焰时，在每种元素的共振线测定，无干扰现象。浸出液或消化液可直接上机测定。主要仪器恒温振荡机；高温电炉；原子吸收分光光度计。试剂硝酸、盐酸、氢氟酸优级纯试剂。高氯酸、优级纯试剂稀释为60%。(3)DTPA浸提剂1.967gDTPA溶于14.92g三乙醇胺和少量水中；再将1・47gCaCl2・2H2O溶于水后，一并转入1升容量瓶中，加水至约950ml,用6mol/LHCl调pH至7.30最后加水至刻度。铜标准贮备液(1mg/L)：称取0.10g纯金属铜溶解于20ml1:1HNO3；移入1升容量瓶中，加水定容至刻度。锌标准贮备液(5mg/L)：称取0・50g纯金属锌，用20ml1:1HCl溶解，移入1L容量瓶中，加水定容至刻度。锰标准贮备液(10mg/L)：称取1.0g纯金属锰，用20ml1:1HNO3溶解，移入1L容量瓶中，加水定容至刻度。铁标准贮备液(10mg/L)：称取1.0g纯金属铁，溶解于20ml1:1HCl中，加热助溶，移入1L容量瓶中加水定容至刻度。操作步骤(1)土壤全量Cu、Zn、Mn、Fe的测定：称取通过0.25mm筛孔的土样1.xxxg,放入铂坩蜗，加浓HNO317ml,60%HClO45ml,在电炉上小火加热，至溶液约剩5ml后取下冷却。加HF5ml,继续消煮，蒸发至干，再加HF3ml消煮至冒微量白烟为止。若消化不完全，可再加HF消煮。用1：2HC1溶解，然后用热水洗入1ml容量瓶中，定容后过滤；用原子吸收分光光度计分别测定Cu、Zn、Mn、Fe,记录测定数据