12 经典血清学试验

朽木易折，金石可镂。千里之行，始于足下。第页/共页十二章经典血清学实验一、名词解释凝结性实验：按照是否产生凝结现象，用已知抗体或抗本来判定相应（未知）抗原或抗体的免疫反应。凝集反应：细菌，红细胞等颗粒性抗原，或吸附在颗粒性载体表面的可溶性抗原，与相应抗体发生特异性反应，在适当电解质存在下，经过一段时光形成肉眼可见的凝集现象。反应中的抗原称为凝集原，反应中的抗体称为凝集素。直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体直接发生特异性结合并浮上肉眼可见的凝集现象称为直接凝集反应。间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）吸附在一种与免疫无关的惰性载体颗粒表面，使其成为致敏载体，然后与相应抗体（或抗原）结合，在电解质存在的条件下发生凝集的现象。葡萄球菌A蛋白（SPA）：是金黄色葡萄球菌的特异性表面抗原，能与IgG分子的Fc片段结合，当SPA-Ab与相应抗原结合时，就可产生协同凝集反应。HA：有些病毒具有能凝集某种哺乳动物和禽类红细胞的特性，依此特性建立的检测主意称为病毒血凝实验。HI：按照病毒的特异性抗体可以抑制血凝现象建立的检测主意称为血凝抑制实验。沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在的条件下，形成肉眼可见的白色沉淀。参加沉淀反应的可溶性抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。琼脂免疫蔓延：抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。反应的沉淀物因颗粒较大，故在凝胶中不再蔓延，而形成沉淀带。电泳：带电质点在电场中向着带异向电荷的电场移动。免疫电泳：由琼脂双蔓延与琼脂电泳技术结合的实验。凝集价/滴度/抗体效价：浮上50%以上凝集的血清最大稀释度为该血清的凝集价。沉淀价：环状沉淀实验时，以浮上白色沉淀环的最高抗原稀释倍数作为沉淀素的效价，即沉淀价。中和指数：在尽头法中和实验中，使病毒感染力减少至50%的血清中和效价称为中和指数。中和效价：中和实验中，被检血清中抗体中和病毒的能力。病毒的毒价：引起半数感染动物死亡的病毒最小量。二、简答题1.凝集反应和沉淀反应的基本类型有哪些？有何用途？2.凝集反应和沉淀反应的区别？（凝集反应和沉淀反应各有什么特点？）沉淀反应凝集反应抗原可溶性抗原颗粒性或可溶性抗原反应时光数小时至数天几分钟至十几分钟反应产物沉淀物凝集块用途定性，定量定性，半定量优点操作容易，基层适用操作容易，基层适用3.琼脂凝胶免疫蔓延实验有哪些不同的主意？举例说明它们的用途？抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。反应的沉淀物因颗粒较大，故在凝胶中不再蔓延，而形成沉淀带。（1）类型：单向单蔓延，单向双蔓延，双向单蔓延，双向双蔓延（2）用途：抗原或抗体的定性、复合抗原成分的区别、抗原定量如：双向单用于传染病的诊断，如马立克病的诊断4.免疫电泳技术的种类有哪些？试述其原理，主意和用途？原理：免疫电泳技术是将凝胶蔓延与电泳技术结合的迅速、灵巧的免疫技术。抗原抗体在凝胶中自由蔓延的同时，参加电场力的作用，使它们的移动加快，并限制蔓延方向，从而缩短了反应时光提高了敏感性。分为：（1）免疫电泳：是将琼脂双蔓延与琼脂电泳技术结合的技术。用途：可用来研究抗原和抗体的对应性、测定样品的成分以及各自的的电泳迁移率、鉴定抗原或抗体的纯度等。（2）对流免疫电泳：是在琼脂蔓延基础上结合电泳技术建立的一种简便而迅速的主意。敏感性高，用于疾病的迅速诊断。（3）火箭免疫电泳：是单向辐射免疫蔓延和电泳相结合的检测技术。用于抗原的定量检测。5.影响免疫电泳的因素有哪些？（1）带电质点的性质：颗粒所带净电荷量、颗粒大小、形状等（2）电场强度（3）溶液中的pH值（4）溶液的离子强度：溶液离子强度越高，颗粒移动速度越慢（5）电渗作用（6）吸附作用：介质对样品的滞留作用（7）电泳时光：与迁移率成正比6.补体参加的检测技术的原理及种类？（1）基本原理：通过补体是否激活来证实抗原与抗体是否相对应，进而对抗体或抗原做出检测①抗体分子的Fc片段存在补体受体②惟独当抗体与相应抗原特异性结合后才干裸露出补体受体③补体结合抗原抗体复合物后各种成分相继活化，继而浮上一系列免疫学反应（2）常用的补体参加的检测技术：①溶血实验原理：将抗红细胞的抗体与相应的红细胞混合，当补体存在时，红细胞即被溶解特点：此种溶血现象肉眼可见应用：广泛用于血清补体活性检测、也在补体结合实验中做为指标系统②补体结合实验（CFT）（试述补体结合实验的原理与用途？）原理：补体能与任何一种抗原抗体复合物结合，但倘若抗原抗体不匹配，补体则不被结合而游离存在。但当参加绵羊红细胞和溶血素后，即可与游离的补体结合而浮上溶血现象，因此绵羊红细胞和溶血素是CFT的指示系统。按照溶血现象是否发生，可得知检测系统中有无相应的抗原或抗体存在。（理解记忆）特点：具有高度的特异性和一定的敏感性应用：传染病的诊断、病毒亚型的鉴定等③免疫黏附实验④溶血空斑实验或空斑形成实验7.什么是中和实验？有哪些常用主意？按照抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学实验称为中和实验。分为尽头法中和实验和空斑减数实验。（1）原理：病毒可刺激机体产生中和抗体，该抗体与病毒结合后使病毒失去感染能力。这种中和作用不仅有郑重的种、型特异性，而且还表现在量的方面，即一定量的病毒必须有相应数量的中和抗体才干