DB21-T 3169-2019柞蚕蛹虫草生产技术规程

ICS65.020.20

B05

备案号：63301-2019DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3169—2019

柞蚕蛹虫草生产技术规程

TechnicalspecificationforproductionofcordycepsMilitarisinTussahsilkworm

DB21/T3169—2019

柞蚕蛹虫草生产技术规程

1范围

本标准规定了柞蚕蛹虫草生产的术语和定义，产地环境，生产设施，技术要求，采收，包装及储存。

本标准适用于柞蚕蛹虫草生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T23509食品包装容器及材料分类

GB/T33320食品包装材料和容器用胶粘剂

GB/T8321农药合理使用准则

GB/T12728食用菌术语

NY/T391绿色食品产地环境技术条件

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1742食用菌菌种通用技术要求

NY/T1846食用菌菌种检验规程

NY/T5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求

3术语和定义

GB/T12728界定的及下列术语和定义适用于本文件。

3.1柞蚕蛹ChineseOakSilkwormPupae

柞蚕幼虫吐丝结茧后形成的与成虫之间的过渡形态，初化的蛹表皮柔软、体色也浅，之后表皮逐渐

硬化体色也变得越来越深，最终成为黄褐色或黑褐色。

3.2僵蛹Muscardinepupa

蛹虫草菌（Cordycepsmilitaris）感染活体柞蚕蛹后硬化的蚕蛹。

3.3出草germination

子实体从柞蚕蛹体内长出来的过程。

3.4柞蚕蛹虫草Cordycepsmilitaris

由僵蛹体内长出金黄色或橘红色的棒状子实体与僵蛹形成的复合体。

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4产地环境

应选择生态条件良好，远离污染源的生产区域，符合NY/T391的要求。

5生产设施

5.1生产车间

应设原料准备室、洗刷室、灭菌室、菌种制备室、接种室、发菌室、培养室、烘干室、包装室、储

存室。培养室有专用的通风口，通风口处需安装过滤风装置，四周及过道安装40W的日光灯。

5.2生产设备

天平、高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、恒温振荡器及培养箱、显微镜、空调等。

5.3培养架

层架要求金属结构,架子高矮、大小、长宽根据生产场地条件决定,通常一个架子设六层,层距

0.4m，每层摆放4个塑料盘子,货架间距人行道0.8m～1.0m。

5.4培养盘

应符合GB/T23509和GB/T33320的要求，通常采用耐高温硬质塑料盘，规格为（30cm～60cm）

×（30cm～35cm）×（6cm～10cm）。

6技术要求

6.1菌种的选择

应符合NY/T1742的要求，引进有菌种生产资质的单位的母种或自行分离获得的母种，经培育繁殖

和提纯复壮获得优良菌株用于生产。

6.2柞蚕蛹的选择

秋季柞蚕蛹作为培养基应符合NY/T5099的规定。柞蚕茧健蛹率>90％，将柞蚕茧环割，选择无破

损、健康的柞蚕蛹备用。

6.3水

生产用水应符合GB5749生活饮用水卫生标准。

6.4生产菌种的制备

6.4.1培养基推荐配方

1马铃薯200.0g，蔗糖20.0g，磷酸二氢钾3.0g，硫酸镁1.5g，维生素B10.02g，水1000ml，

pH值6.0～7.0。

2葡萄糖25.0g，蛋白胨10.0g，酵母膏1.0g，磷酸二氢钾3.0g，硫酸镁1.5g，维生素B10.02g，

水1000ml，pH值6.0～7.0。

6.4.2培养基配制

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配方1土豆去皮200g，切成1cm3小块，放入锅中加水文火煮沸30min后4层纱布过滤。在滤

液中加入蔗糖20g，磷酸二氢钾3.0g，硫酸镁1.5g，VB10.02g加水至1000mL，pH值6.0～7.0，用

三角瓶分装(固体培养基加琼脂18g)，在121℃下灭菌40min，备用。配方2称取各组成成分依次溶

于1000mL水中，按配方1方法分装灭菌。

6.4.3菌种的制备

母种在10℃～15℃、相对湿度60%的环境下可存放一个月，4℃条件下可保存一年左右。用接

种铲从母种斜面中切取1cm²菌面(可稍带培养基)放入液体菌种培养瓶中，迅速用聚丙烯塑料薄膜和乳

胶圈封扎瓶口，接种后在18℃～22℃温度条件下，培养5d～7d，培养4d取样对菌种进行分析检测,

按照NY/T1846进行，均符合要求的为合格菌种。将液体菌种用无菌水按1:5比例稀释成接种用菌液。

6.5接种

6.5.1接种前准备

接种室、培养室和相关容器必须提前彻底消毒，使用药剂符合GB/T8321要求，选用高效、低毒、

低残留药剂，严格按照说明使用，也可以使用紫外灯、臭氧进行室内消毒。将柞蚕蛹用清水冲洗干净，

再经70％浓度的酒精浸泡2min进行消毒，置于无菌托盘中淋干后立即接种。

6.5.2接种方法

用微量注射器每个柞蚕蛹接种200μL～400μL菌液，在蚕蛹翅下或腹部节间膜处，与蛹体平行进

针(向头部方向)，均匀放入培养盘中。

6.6菌丝培养管理

接种后的柞蚕蛹送入培养室黑暗培养，温度控制在17℃～20℃，室内湿度60%～65%，通风换

气保持空气新鲜，5d后每天2次观察清理病坏的柞蚕蛹，7d后相对湿度调整到65%～70%，随机检

查蛹体，确认菌丝布满整个蛹体，12d～15d后全部硬化成僵蛹。

6.7出草管理

6.7.1保湿

用无菌水冲洗僵蛹数遍，放置在备好的无菌培养盘中，用聚乙烯薄膜将培养盘封口，薄膜留有透气

孔。每天在培养架通道内用加湿器喷雾1次，培养室相对湿度控制在70%。

6.7.2子实体原基培养

接种20d左右当蛹体表面长出白色菌丝，进行见光培养，白天以自然散射光为主，傍晚用日光灯

补助照明3h～4h，白天温度控制在18℃～22℃，夜间降到15℃～17℃，相对湿度保持在75％，每天

上午通风1次，时间为30min，再经过3d～5d的培养，长出黄色的小突起即形成了子实体原基。

6.8子实体培养管理

25d后进入子实体培养阶段，温度应为16℃～20℃，湿度75%～80%，打开光照设备，光照强度

在500lx～800lx,光照时间每天14h～18h，逐渐加大室内空气的流通和交换，每天通风换气2次，每

次30min。

7采收

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7.1采收标准

当子实体长到5cm～8cm时，子实体头部膨大饱满，及时采收。

7.2采收与干燥方法

采收时用镊子连蛹带草一起从盘中提出,经过整理,放入不锈钢盘中,采取50℃～60℃烘干或冷冻

干燥等方法处理。

8包装与储存

8.1包装

将干燥后的柞蚕蛹虫草摆放在塑料盒中为宜，以免挤压，用薄膜袋密封后，称重包好。

8.2储存

包装好的柞蚕蛹虫草应置于冷柜或冷库低温储存，温度适于0℃～4℃。

9生产记录

应对每批生产建立独立、完整的生产记录档案，保留生产过程中各个环节的有效记录，以证实所有

的农事操作遵循本指导性技术文件规定。记录应当保留两年以上。具体参见附录A。

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附录A

(资料性附录)

生产记录表格

表A生产情况记录表

单位名称：负责人：电话：

菌种来源：种植区域地点：种植规模（盘）：

接种时间：出草时间：采收时间：

采收标准：产量（kg/m2）：

具体农事操作记录

日期生产活动内容投入品内容使用量使用设备操作人技术负责人

负责人：制表人：制表日期：

_____________

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009标准化工作导则起草。

本标准由辽宁省农业农村厅提出并归口。

本标准起草单位：辽宁省海洋水产科学研究院。

本标准主要起草人：李亚洁，孟楠，温