免疫发光技术课件

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全自动化学发光免疫分析仪CL-2000i

免疫知识免疫学检验方法34免疫的概念

免疫：是机体识别和排除异物的功能，识别自我和非我，自我防护的功能（人体对外的部队和对内的警察）但在某些条件下可对机体有害

组成：免疫器官（胸腺、淋巴结）、免疫细胞（淋巴细胞)、免疫分子（抗体）凡自己的耐受；凡非己的排斥。。。。5什么是抗原？抗原（Ag）：是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答并能与相应免疫应答产物在体内外发生特异性结合的物质。分类：异种抗原、同种异型抗原、自身抗原、异嗜性抗原一种抗原可刺激机体产生抗不同部位的多种抗体抗体相对于不同个体也是抗原免疫的要素6抗原（Ag）7病毒异物性和复杂结构细菌 药物微生物及其成分、蛋白质、多肽、多糖。。。免疫的要素抗体（Ab）：是B淋巴细胞产生的能与抗原分子上相应表位发生特异性结合的、具有免疫功能的球蛋白• 抗原刺激机体产生的蛋白质• 能和相应刺激物(抗原)结合• 结合产生一定效果抗体是相对的8抗体（Ab）

特异性：相对的一一对应，一种抗原可以有多种抗体与之结合可逆性：非共价结合阶段性：反应阶段和结果阶段9免疫学检验方法10免疫分析技术：利用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法——上帝的馈赠。Ag+Ab

Ag

Ab©无锡市第八人民医院检验科11免疫分析和生化分析特点生 化免疫分析基本原理朗伯比尔定律免疫测试基于抗原抗体的非特异性结合；测试模式简单流程复杂，所需试剂种类多，孵育时间更长；分离方式不需要非均相测试，需要磁分离；均相测试，不需要分离。信号检测方式不同比色法，朗伯-比尔定律，需要光源；化学反应发光，光子计数法真正的化学发光不需要光源测试项目微量，超微量，激素，微生物等12免疫标记检测实现方式

第一种，双抗体夹心法：多用来检测抗原。Eg:乙肝表面抗原©无锡市第八人民医院检验科13免疫标记检测实现方式

第二种，竞争法：抗原、抗体的检测均有利用，eg:乙肝e抗体©无锡市第八人民医院检验科14免疫标记检测实现方式

第三种，间接法：多用于检测抗体，例如：乙肝表面抗体的检测©无锡市第八人民医院检验科15化学发光免疫分析技术发光原理:是指分子或原子中的电子吸收能量后，由基态（较低能级）跃迁到激发态（较高能级），然后再返回到基态，并释放光子的过程。根据形成激发态分子的能量来源不同可分为:光照发光、生物发光、化学发光等。16化学发光免疫分析技术常用发光剂（底物or标记物）

异鲁米诺

（Diasorin、新产业）

碱性环境中，闪光型（3s）；吖啶脂 （BAYER、ABBOTT

I系列)

吖啶脂标记，碱性环境中直接发闪光（10s）；

鲁米诺+HRP（强生OCD）

HRP标记，鲁米诺在增强剂作用下发光，辉光型（2h）；AMPPD+ALP

（BECKMAN、DPC、OLYMPUS）

ALP标记，AMPPD做底物，辉光型（N小时）；三联吡啶钌+TPA（ROCHE）

三联吡啶钌标记，电化学发光，应用于Roche仪器©无锡市第八人民医院检验科17间接化学发光（酶促发光、辉光）-

迈瑞、贝克曼、西门子DPC碱性磷酸酶(ALP)：ALP标记抗体(或抗原)，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，这时加入AMPPD(螺旋金刚烷)发光剂，ALP使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。18检测流程辉光发光时间长（