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自来水中细菌总数的测定系别:专业:班级:姓名学号:指导老师:自来水中细菌总数的测定(生物系学号:指导老师:)摘要水中细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。水中细菌总数可作为判定被检水样被有机物污染程度的标志,细菌数量越多,则水中有机质含量越大。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。以1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃培养24h后所生长的细菌菌落的总数,作为水体受细菌污染程度的标志,我国规定1ml自来水中细菌总数不得超过100个。关键词水中细菌总数牛肉膏蛋白胨琼脂培养基引言水是生命之源,人的生存离不开水环境。水源日渐被生活污水和工业废水所污染。水质的好坏对人们的生活起着至关重要的作用,直接影响人们的身体健康。水是微生物广泛分布的天然环境。各种天然水中常含有一定数量的微生物。水中细菌总数越多则水被污染越重。因此测定细菌在水中的数目就尤为重要。1.材料与方法1.1实验材料牛肉膏天平电磁炉培养箱烧杯玻璃棒灭菌三角瓶灭菌培养皿灭菌吸管温度计高压蒸汽灭菌锅1.2实验方法1.2.1称取牛肉膏蛋白胨粉4.8g于烧杯中,倒入100ml水在微波炉上加热,加热煮沸至少持续5min。冷却至45—50℃倾注平板。1.2.2自来水:先将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌,再开放水龙头使水流5min,以灭菌三角瓶接取水样以备分析1.2.3实验组:用灭菌吸管吸取水样1ml,注入灭菌培养皿中。共做2个平皿。分别倾注冷却至45℃左右的培养基于培养皿中约1/3-2/3高度,在平整的桌面上作平面旋转摇动,使样与培养基充分混匀。空白组:不加水样,倾注培养基于培养皿中约1/3-2/3高度1.2.4待培养基凝固后,倒置于37℃培养箱中培养24h,进行菌落计数。1.2.5两个实验组的菌落数减去空白组的菌落数的和除以2得到两个平板的平均菌落数,即为1ml水样的细菌总数。2结果及分析2.1实验结果表1实验结果平板菌落数1ml自来水中细菌总数空白组3148实验组172实验组2862.2数据分析由表可知,实验室中1ml自来水的菌落总数在我国自来水卫生指标的范围内,故自来水合格。一般情况下,实验结果在60到100个属正常,而本实验结果低于60个每毫升,细菌数过少。造成这种结果可能是培养基温度过高就倒平板导致细菌被烫伤或烫死影响其生长和平板上细菌分布情况(如菌苔等)导致计数时的主观误差。3讨论实验结果表明,我校自来水符合我国自来水标准。实验结果受三方面影响,一是自来水本身水质影响,二是实验误差的影响。水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下,使水中细菌均能生长繁殖,因此计算出来的水中细菌总数仅是近似值。本实验除采用菌落计数测定细菌总数外,现在已有许多快捷迅速简便的微生物检测仪等也用来测定细菌总数。在实验中需注意:倒掉灭菌培养皿中的冷凝水,在此过程中尽量少在空气中暴露。水样即取即用。倒平板时要用温度计测定培养基温度,防止温度过高,烫伤或烫死细菌,又有防止温度过低培养基凝固,不易倒平板。倒平板时平面旋转不要过快,倒平板时间不要过长,倒完一个立刻用另一个灭菌培养皿盖住。确保培养基完全凝固后将其倒置放入培养箱中。计数时。到达规定培养时间,应立即计数。计数时难免存在误差,必要时用放大镜检查以防遗漏。平板出现的效果:细菌菌落过少、细菌菌落分散均匀易于计数、细菌菌落聚集成片状,培养基被霉菌污染。菌落过少,可能是培养基温度过高导致,烫伤或烫死细菌。菌落聚集成片状是倒平板时水样没有与培养基充分混匀所致。细菌太多铺满整个培养基可能是水样取太早,倒平板不熟练等使其暴露空气中时间过长,空气中细菌落入。4结论水孕育了生命,使地球上的一切都生机勃勃。而随着人类发展的需要,

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