粮油检验 大米直链淀粉含量的测定 编制说明

1《粮油检验大米直链淀粉含量的测定》编制说明根据国家标准化管理委员会下达的项目（编号为20153546-T-449）对现行《大米直链淀粉含量的测定》国家标准进行修订，由湖北省粮油食品质量2015年立项拟修订的GB/T15683-2008《大米直链淀粉含量的测先后出版了2017版、2019版（征求意见）和2020版。为了标准的稳定性，特米直链淀粉含量的测定》，因标准修订期间，ISO6647-1/2:2017和ISO6647-1/2:2019（征求意见稿）版本反复修改，ISO6647-1/2:2020版正式发布实施，针对以上的变化，标准修订工作在2020年后又再次22015年立项修订GB/T15683-2008《大米直链淀粉含量的测定》2023年6月—至今，最终确定了标准的主要内容，编写标准文本和编制说表1标准主要起草人及其所做的工作参与人员承担工作熊宁全面负责标准的修订工作，制订标准修订工作方案，提出实验的方向和内容等刘坚、孙婷琳、刘利负责文本、编制说明的编写、修改完善，3征求意见的收集整理等刘坚、刘利、孙婷琳实验方案的制定、检测试验刘利、吴莉莉、孙婷琳、刘坚、许诗尧、秦时聪负责查阅文献、收集样品、检测试验、数据汇总分析等国家粮食和物资储备局标准质量中心徐广超和张艳、南京财经大学袁建对现行国际标准、实验方案等进行技术指导河南工业大学周显青对ISO标准进了了翻译指导其他单位和参与人员参与标准的实验验证、方案优化、文本及编制说明的修改按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则—2008相比，除结构调整和编辑性改动外，另外新增了第二法，第一法主要技检测波长的选择会导致检测结果的差异，实验表明，样品在检测波长720nm、4当前，国际和国内的相关标准情况比较如下。一是现行的国家标准。GB/T15683-2008《大米直链淀粉含量的测定》是等同采用了ISO6647-1:2007，将二是现行的国际标准。国际标准分别在2007、2015、2017、2020年进行修订。农业部2014年发布NY/T2639-2014《稻米直链淀粉的测定分光光度法》，参5表1样品未脱脂与甲醇抽提回流脱脂的比对试验样品编号样品未脱脂，%样品回流抽提脱脂，%121.825.2227.830.4331.633.6422.326.5523.525.7678越南大米13.42糯米2.102.3020.923.1大米20#表2不同脱脂处理方式大米样品直链淀粉含量检测结果样品对照组（85%甲醇）100%甲醇超声1225.224.3330.430.2433.632.2526.526.7625.725.3782.303.00注：1-8为8个不同直链淀粉含量的大米样品表3不同脱脂方式测得直链淀粉含量的配对t检验结果6实验条件均值标准差均值的标准误差分的95%置信区间上限下限上限侧)甲醇回流-甲醇超声0.2500.7540.266-0.3800.8800.93870.3800.3800.05说明甲醇超声法与甲醇回流法间无显著差异，可以作为直链表4不同脱脂样品量的直链淀粉检测结果分析样品编号不同脱脂样品量直链淀粉含量相对相差δ重复性限值r0.5(g)1.0(g)超声脱脂923.324.02.870.692.7021.221.30.472.14923.824.20.512.7121.521.30.892.13注：9、10、11为三份直链淀粉含量不同的大米样品7样品10(籼米)1(越南大米)2(糯米)3(高粱米)4(薏仁米)5(青稞)综上所述，确定大米样品的脱脂条件为：脱脂样品量0.5g,超声温度50℃,超声时间50分钟。3.1.3分散方式的选择选取14份样品，样品中直链淀粉含量在1.5%-26.8%(720nm测定值)。选取煮沸法、浸泡过夜法和磁力搅拌法三种不同的方法进行分散淀粉，在720nm波长下测定样品值，结果如下图1和表6,对表6中的检测结果，运用SPSS软件按照配对t检验进行分析，设临界水平a=0.05,数据分析结果见表7。8表6不同样品溶液制备方式的直链淀粉含量检测结果样品编号直链淀粉含量/（%）煮沸法浸泡过夜法磁力搅拌法625.925.124.2782.302.6024.626.125.56.607.707.109.9026.826.225.123.824.325.524.025.625.1平α=0.05，数据分析结果见表7。煮沸法、浸泡过夜法、磁力搅拌法三组直链淀粉检测结果之间，两两为一组的配对t检验，显著性P值均大于0.05，说明表7不同样品溶液制备方式测得直链淀粉含量的配对t检验结果实验条件均值标准差均值的标准差差分的95%置信区间t下限上限煮沸法-过夜法-0.4421.0320.275-1.0380.153-1.600.132煮沸法-磁力搅拌法-0.6141.2430.332-1.330.103-1.840.087过夜法-磁力搅拌法-0.171.9100.243-.6970.354-0.7040.494取14份大米样品，标准物质和样品在同一波长进行检测，现选取720nm、表8不同分光光度计使用波长的直链淀粉检测结果样品编号直链淀粉含量/（%）720nm680nm620nm625.924.525.6625.924.59782.3024.66.609.9026.823.824.03.0024.97.4026.624.424.53.8027.32.309.8027.727.027.1对上表中的检测结果，运用SPSS软件按照配对t检验进行分析，设临界于0.05，表明三种不同检测波长间两两存在显著差异。考虑在后续的研究中，表9不同分光光度计使用波长测得直链淀粉含量的配对t检验结果实验条件均值标准差均值准差差分的95%置信区间t下限上限720nm-680nm-0.4140.4160.111-0.654-0.1737-3.720.003620nm-680nm1.7500.2981.1042.3955.850.000720nm-620nm-2.1640.387-3.002-1.326-5.580.00030min的烘箱平衡方式可快速实现样品中水分平衡，与ISO6647-1方法中的静表10样品平衡水分试验样品编号水分含量，%样品编号水分含量，%样品编号水分含量，%12121212121212121212121212121212平均值平均值平均值原始水分原始水分原始水分表11直链淀粉检测方法一验证试验技术路线技术路线脱脂方式水分平衡方式分散方式检测波长测试样品备注1甲醇回流热分散720nm粉末现行国标方法2甲醇回流磁力搅拌冷分散720nm粉末分散方式改进3甲醇回流烘箱平衡热分散720nm粉末水分平衡方式改进4甲醇回流烘箱平衡磁力搅拌冷分散720nm粉末法改进5超声脱脂热分散720nm粉末脱脂方式改进6超声脱脂磁力搅拌冷分散720nm粉末进7超声脱脂烘箱平衡热分散720nm粉末式改进8超声脱脂烘箱平衡磁力搅拌冷分散720nm粉末脱脂、水分平衡、分散方法改进条技术路线用自制马铃薯直链淀粉与Sigma试剂制作标准曲线，其他步骤按照ISO6647-1：2020方法进行直链淀粉检测，每条技术路线每个样品平行测试6表12检测结果样品编号标准品路线1路线2路线3路线4路线5路线6路线7路线8平均相对标准偏差（%）23001sigma0.60.723002sigma21.422.924.522.121.822.721.823.323.222.422.722.520.421.523003sigma24.025.728.025.025.023.227.527.525.725.525.125.625.723.024.325.824.725.023005sigma22.425.626.525.824.223.427.226.925.324.425.924.326.522.324.624.424.224.623009sigma0.923022sigma25.325.828.926.325.722.825.727.826.027.525.725.527.023.623.925.724.925.523028sigma20.020.221.420.00.723036sigma21.221.220.120.02.023037sigma20.123.724.224.321.620.821.722.022.321.923.922.124.420.221.922.222.0先用格拉布斯（Grubbs）法判断表12数=2.032。根据上述方法计算|vi|的表13实验测定结果的Grubbs计算结果表样品编号标准品λ23001sigma0.30.90.20.50.50.10.10.70.70.70.20.80.00.40.42300223003230052300923022230282303623037sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制sigma自制0.40.52.90.20.00.72.00.62.20.10.00.10.30.10.70.20.20.70.22.42.70.92.30.60.30.22.90.00.80.42.00.10.30.70.70.50.60.30.80.12.02.42.03.30.72.02.30.10.30.02.70.72.92.02.50.70.02.03.22.10.70.42.30.10.00.80.20.10.30.30.22.20.32.50.60.20.90.30.40.30.60.80.72.50.32.33.73.93.72.03.52.42.23.72.82.83.94.13.23.3性。因此自制标准品与sigma试剂分别配制的标量之间不存在显著性差异，其差异幅度Cohen'sd值均小于编号平均值±标准差tPCohen'sd11.250±0.67411.638±0.555-0.99970.3510.35321.525±1.90821.763±1.771-0.22870.8260.08124.963±0.95025.738±1.768-0.9470.3790.33224.575±1.24925.250±1.739-0.99470.3530.35114.988±1.07615.038±0.938-0.26770.7970.09525.475±1.35526.038±1.8000.57370.5850.20318.663±0.69119.163±1.4491.11470.3020.39417.688±2.00018.663±1.9321.17970.2770.4172303722.3±1.58622.038±1.602-0.49370.6370.174进行正态性检验。配对差值正态性检验见表15中S-W、偏度、峰度结果。由表15呈现显著性，因此数据满足正态分布。序号9、17、18、20、28五组配对差值的绝对值小于3。结合正态分布直方图，正态图基本上呈现出钟形（中间高，两端），说明每组配对样本之间不存在显著性差异。如果配对样本T检验呈现显著性，可借助效应量化Cohen'sd值对差异性进行量化分析。Cohen'sd值＜0.2表示差异幅度非常小；0.2≤Cohen'sd值＜0.5表示差异幅度较小；0.5≤Cohen'sd值<表15配对差值正态性检验结果及配对T检验结果S-W偏度峰度PCohen'sd1技术1配对技术20.3-0.592-10.0590.7962技术1配对技术30.61-0.386-0.8740.2750.2833技术1配对技术40.0550.0590.5114技术1配对技术50.9090.024-0.6220.041**0.5575技术1配对技术60.812-0.324-0.6680.028**0.6066技术1配对技术70.081-0.734-0.610.280.287技术1配对技术80.614-0.4-0.7080.340.2468技术2配对技术30.529-0.810.5110.7410.0849技术2配对技术40.002***0.7140.093技术2配对技术50.7980.218-0.5270.007***0.774技术2配对技术60.620.425-0.2270.000***1.114技术2配对技术70.4550.6790.6750.107技术2配对技术80.8630.311-0.410.6290.123技术3配对技术40.8920.311-0.5370.8810.038技术3配对技术50.7570.3890.1630.000***1.279技术3配对技术60.829-0.5340.3980.021**0.645技术3配对技术70.006***-0.833.2870.9490.016技术3配对技术80.000***3.4670.9310.022技术4配对技术50.821-0.016-0.1110.001***1.099技术4配对技术60.026**0.001***0.995技术4配对技术70.135-0.9240.20.8490.048技术4配对技术80.18-0.8350.5560.8510.048技术5配对技术7技术5配对技术8技术6配对技术7技术6配对技术8技术7配对技术8注：***、**、*分别代表1%、5%、性P值为0.041**,水平上呈现显著性，因此技性差异。其差异幅度Cohen'sd值为：0.557,差异幅度中等。基于技术路线1与术路线6之间存在显著性差异。其差异幅度Cohen'sd值为：0.608,差异幅度中同时，技术路线1、2、3、4、7、8与技术路线5,6两两之间，配对t检验结果显著性P值均小于0.05,且Cohen'sd值均大于0.5,表明技术路线5、6的样品4、7、8测得的样品直链淀粉含量平均值与技术路线5、6的路线5,6的检测结果较平均值普遍偏低。分析原因为超声波的空化和乳化效应，使超声处理后的样品中形成微小的“乳滴”,脂质与常温条件下彻底分离，导致检测结果偏低。此外廖雪勤等发现，超声处理会理时，常添加表面活性剂以降低乳化效应，本研究中烘箱平衡水分的步骤也起到了该功能。因此技术路线5、6相对其他组别检测结果偏低。图2平均值与技术路线5、6检测结果比对3.2标准文本第二法新增的理由第二法中采用样品和参考物质不脱脂、不平衡、不同分散方式对直链淀粉含量的测定，设计如下实验，见表16。表16直链淀粉检测方法二验证试验技术路线路线检测测试样品备注9不脱脂不平衡热分散不脱脂不平衡新增第二法是修改采用ISO6647-2:2020,将此法作为标准文本的第二法，由于检测波长的选择会导致检测结果的差异，实验表明，样品在检测波长720nm、其余步骤和实验条件均与ISO6647-2:2020保持一致。第一法中技术路线1和第二法中技术路线9、10结果对比如下表17,通过数据看出，除了样品23003的结果差异大外，其他样品结果差异不大。编号平均值技术路线1-9技术路线1-10技术路线1技术路线9技术路线10绝对偏差绝对偏差表18标准方法验证单位序号验证单位名称1湖北省粮油食品质量监督检测中心2南京财经大学3吉林省产品质量监督检验院4国家粮食和物资储备局科学研究院5深圳市计量质量检测研究院表19技术路线1的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量55555555接受的结果数量27232529平均值m/m，%11.0319.9925.6425.5714.9125.6118.9318.50重复性标准偏差（Sr）0.400.340.770.550.180.350.550.30重复性变异系数（CV）,%3.603.002.152.89重复性限值（r）0.962.150.490.990.85再现性标准偏差（SR）0.892.032.250.440.76再现性变异系数（CV）,%8.0510.165.908.812.972.986.819.20再现性限值（R）2.495.694.236.312.133.614.77表20技术路线2的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量44444345接受的结果数量23242424242227平均值m/m，%12.5021.6126.5026.5615.5026.8420.3721.25重复性标准偏差（Sr）0.170.600.640.640.420.670.210.53重复性变异系数（CV）,%2.792.402.422.682.512.49重复性限值（r）0.470.58再现性标准偏差（SR）0.642.50再现性变异系数（CV）,%5.114.944.795.167.614.066.1511.75再现性限值（R）2.993.563.843.303.053.516.99表21技术路线3的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量54555555接受的结果数量292426292827平均值m/m，%11.9721.1627.6526.9515.9126.9320.2019.23重复性标准偏差（Sr）0.250.350.200.370.470.260.280.30重复性变异系数（CV）,%2.050.712.920.95重复性限值（r）0.690.970.550.710.790.83再现性标准偏差（SR）0.400.750.960.772.11再现性变异系数（CV）,%8.482.725.326.054.693.8010.95再现性限值（R）2.842.104.012.703.542.155.90表22技术路线4的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量43354454接受的结果数量2428242223平均值m/m，%12.2421.6226.1125.4215.0825.7719.1816.90重复性标准偏差（Sr）0.430.230.290.430.540.280.290.42重复性变异系数（CV）,%3.473.572.48重复性限值（r）0.630.820.780.81再现性标准偏差（SR）0.512.370.840.40再现性变异系数（CV）,%12.342.375.969.347.853.286.602.36再现性限值（R）4.234.366.653.312.373.55表23技术路线7的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量55555555接受的结果数量272928平均值m/m，%11.3620.4726.0125.7214.3824.9418.9918.54重复性标准偏差（Sr）0.400.500.600.160.240.310.410.48重复性变异系数（CV）,%3.552.422.290.612.172.59重复性限值（r）0.440.670.88再现性标准偏差（SR）0.79再现性变异系数（CV）,%9.945.194.904.785.477.587.529.74再现性限值（R）3.162.973.573.452.205.294.005.05表24技术路线8的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量34555555接受的结果数量21272927平均值m/m，%11.8122.9026.1426.1314.1723.6318.9519.13重复性标准偏差（Sr）0.340.180.540.560.330.300.570.47重复性变异系数（CV）,%2.870.802.052.132.343.022.44重复性限值（r）0.950.520.930.84再现性标准偏差（SR）2.290.92再现性变异系数（CV）,%9.2010.015.195.4610.353.887.328.30再现性限值（R）3.046.423.803.994.112.563.894.44表25技术路线9的验证结果项目样品2300123002230032300523009230222302823036参加实验室数量55555555结果数量2227232728接受的实验室数量34344444接受的结果数量21212121平