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实验七、酵母菌的形态观察

及死活细胞的鉴定实验的目的要求观察酵母菌的形态及出芽生殖方式;学习区分酵母菌死活细胞的实验方法;掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。酵母菌的形态、大小、结构酵母菌是单细胞真菌,并非系统演化分类的单元。酵母菌细胞的形态通常为圆形、卵圆形或椭圆形。也有特殊形态,如柠檬形、三角形、藕节状、腊肠形,假菌丝等。比细菌的单细胞个体要大得多,一般为1-5微米×5-20微米。酵母菌无鞭毛,不能游动。酵母菌具有典型的真核细胞结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等,有的还具有微体。死活细胞鉴别原理美蓝(氧化型)蓝色美蓝(还原型)无色酵母活细胞新陈代谢还原能力美蓝对细胞是无毒的。酵母菌的繁殖方式无性繁殖有性繁殖无性孢子(节孢子、掷孢子、厚垣孢子、芽生孢子)芽殖子囊孢子裂殖酵母菌的繁殖方式有人把只进行无性繁殖的酵母菌称作"假酵母",而把具有有性繁殖的酵母菌称作"真酵母"。

酵母菌的图片母细胞芽细胞芽痕实验材料菌种:酿酒酵母试剂:0.05%和0.2%的吕氏碱性美蓝染色液革兰氏染色用碘液。仪器和用具:载玻片盖玻片滤纸显微镜镜头纸方法美蓝浸片的观察水-碘液浸片的观察(细胞内的贮藏物质肝糖颗粒被染成深红色

)注意:细胞个体大,涂片的方法有可能损伤细胞。美蓝浸片的观察在载玻片中央加一滴吕氏碱性美蓝染色液,用接种环挑取少量酵母菌苔,混合均匀;用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上;将制片放置约3分钟,先低倍镜后高倍镜观察酵母形态和出芽情况,并根据颜色区别死活细胞。染色30分钟后再次观察,注意死活细胞数量的变化;用其它浓度的吕氏碱性美蓝染色液重复上述操作。染液过多会溢出,过少产生大量气泡盖玻片不宜平着放下在一个视野里计数死细胞和活细胞共计数5~6个视野酵母菌死亡率一般用百分数来表示:死亡率=死细胞总数÷死活细胞总数×100%水-碘液浸片的观察在载玻片中央滴一滴革兰氏染色用碘液,在其上加3滴水,用接种环挑取少量酵母菌苔,混合均匀;用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻

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