H7N9亚型禽流感病毒抗体血凝抑制试验检测方法_第1页
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文档简介

1GB/T6682分析实验室用水规标准通过HA-HI试验,用已知的H7N9亚型禽流感病毒来检查被检血清中的相应的H7N9亚型禽流感病毒抗2d)冰箱(2℃~8℃,-20℃,-80℃);5.2.1试剂级别5.2.3其它试剂凝集。具体方法为:向0.5mL血清中加入25μL鸡红细胞泥(配制方法附录A),轻轻震荡混匀,室温(20℃~25℃)静置30min,1000g离心5min,吸取上清用于检测或保存。8微量血凝(HA)试验测定抗原效价和回测3123456789123456789室温(20℃~25℃),反应40mine)置室温(20℃~25℃)反应40min后观察结果。每孔补加25μLPBS,再加1%鸡红细胞悬液,25μL/孔,室温(20℃~25℃)反应40min;c)判定血凝结果与预期结果是否相符合。2HAU、1HAU孔红细胞应出现完全凝集,0.5HAU孔4123456789室温(20℃~25℃)反应30min室温(20℃~25℃)反应40min);e)置室温(20℃~25℃)反应30min;g)室温(20℃~25℃)反应40min。a)将V型反应板置于45°倾斜的白色判读板上,30s后开始判读,b)检查各个对照。抗原对照孔出现红细胞完全凝集,且阴性血清HI效价不大于22,阳性血清HI效c)以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI效价。HI效价大于或等于25为阳性,HI5A.10.01mol/LPBS(pH7.2~7.4)经121℃,15min高压灭菌,保存于室温或4℃冰箱中备用。去离子水定容至1000mL。用孔径为0.22μm的滤膜进

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