微流控环隙流双水相蛋白质分离和酶促反应研究的中期报告_第1页
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微流控环隙流双水相蛋白质分离和酶促反应研究的中期报告摘要本研究利用微流控技术，以环隙流双水相体系为基础，研究了蛋白质分离和酶促反应。中期实验得出了以下结论：（1）通过调节两相流速比例和pH值可以实现稳定形态的环隙流；（2）通过调节两相流速比例和对接触角影响较大的表面活性剂类型和浓度可以实现有效的蛋白质分离；（3）将反应底物在水相中进行预混合后，再注入油相中，可以实现有效的酶促反应。关键词：微流控；环隙流；双水相；蛋白质分离；酶促反应Introduction微流控技术是一种将微观物理特性与流体力学相结合的技术，可以将流体准确控制在微米尺度的通道中，从而实现样品的分离、检测和反应。双水相液体系统是一种利用不同的极性和表面张力的液体混合而成的体系，具有与溶液和凝胶相似的性质，可以用于分离、培养和反应。环隙流则是微流控技术中的一种形式，它是将两种不相溶的液体通过微细通道输送，并利用油相包围水相形成的微滴达到分离和检测的目的。本研究旨在利用微流控技术，以双水相液体系统为基础，研究蛋白质分离和酶促反应。Materialsandmethods1.实验原料BovineSerumAlbumin(BSA)、酪蛋白（casein）、酪氨酸酶（trypsin）和对乙酰氨基酚（acetaminophen）。2.实验仪器微流控芯片、显微镜、高速相机、压电泵、制备水相和油相的工作平台。3.实验方法（1）环隙流的形成将不同摩尔质量的Dextran注入水相和油相中并搅拌均匀，注入微流控芯片，通过调节两相流速比例和pH值，形成稳定的环隙流。（2）蛋白质分离在水相中加入含有不同浓度的表面活性剂Tween20或TritonX-100，调节两相流速比例和表面活性剂浓度，实现不同大小蛋白质的分离。（3）酶促反应将反应底物在水相中进行预混合，将预混合液注入油相中，注入酶后即可实现酶促反应。通过调节两相流速比例和酶底物比例，达到最佳反应条件。Resultsanddiscussion（1）环隙流的形成本研究成功实现了稳定的环隙流，调节了两相流速比例和pH值实现了不同形态的环隙流（如图1）。（2）蛋白质分离通过调节两相流速比例和表面活性剂的类型和浓度，分离出了不同大小的蛋白质。如图2所示，使用Tween20分离出了BSA，使用TritonX-100分离出了casein。（3）酶促反应在预混合液中，acetaminophen与酶trypsin反应，产生的反应产物可以在油相中被检测到。通过调节两相流速比例和酶底物比例，找到了最佳的反应条件。Conclusion本研究通过微流控技术，成功实现了环隙流形成、蛋白质分离和酶促反应。通过调节两相流速比例和各种参数，实现了不同形态的环隙流、有效的蛋白质分离和高效的酶促

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