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文档简介
血小板计数
(bloodplateletcount,BPC)
血小板来自骨髓内巨核细胞
血小板的寿命为7-14天全身约1/3的血小板贮存在脾脏血小板生理血小板的大小约为红细胞的1/3-1/5,直径2μm-5μm,容积为6fl-8fl。在不染色标本中血小板在高倍镜下观察为:圆形、椭圆形或呈杆状,胞浆带有淡绿色的折光。血小板形态血小板计数(bloodplateletcount,BPC或PLT)测定单位体积血液中血小板的数量
测定方法及评价血小板计数方法主要为两大类血细胞分析仪法目视显微镜法直接法间接法血小板分析原理-分析仪法血小板与红细胞在一个系统进行检测,根据所产生的脉冲信号不同阈值分别进行计数(细胞体积3-30fl输入血小板通道)。血小板计数储存于64个通道。显微镜计数法:①破坏红细胞的溶血法草酸铵稀释液法复方尿素稀释法②不破坏红细胞方法复方碘稀释液法方法学评价血细胞分析仪法优点:参数多、速度快、适于临床应用缺点:不能完全将血小板和其他类似大小物质区别,计数误差大;EDTA可致血小板聚集,假性血小板减少,应用显微镜计数法校准。1.生理性变化:正常人血小板计数一天内可有6-10%变化2.病理性(1)血小板减少(血小板数小于100×109/L)①血小板生成障碍:急性白血病、再生障碍性贫血②血小板破坏过多:如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮③血小板消耗增多:如DIC、血栓性血小板减少紫癜临床意义(2)血小板增多(血小板数大于400×109/L)①骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症②原发性血小板增多症③急性大出血,急性化脓性感染④脾切除手术后血小板相关参数血小板平均体积血小板比容血小板体积分布宽度血小板平均浓度
瑞氏染色光学显微镜下观察为:血小板易聚集多呈三、五成群。可分透明区和颗粒区。血小板形态检查标本:
EDTA盐抗凝血指血观察要点:血小板大小血小板形态(胞质受色、颗粒大小、形态等)血小板分布异常血小板形态大小异常:血小板直径>7.5um称巨大型血小板。形态异常:幼稚型血小板、病理型血小板(蓝色血小板)、衰老型血小板分布异常:血小板无力症分散分布慢粒、原发性血小板增多症聚集过度。
思考题
若同时进行红细胞计数、白细胞计数、血小板计数,如何安排采血顺序,为什么?血细胞体积直方图的应用概念
血细胞分析仪根据细胞体积大小,出现相对频率,以坐标式曲线表示出来,从而形成血细胞直方图。1、白细胞直方图
2、红细胞直方图fl100200
3、血小板直方图
患者,女,岁68岁,有6个月贫血史
【实验室检查】Hb75g/L,RBC3.1*1012/L,血涂片红细胞大小不均,中央苍白区扩大红细胞直方图
4.病例100200fl血细胞分析仪的类型血样
稀释1:25000
稀释1:250通过RBC/PLT小孔RBC破坏释放Hb产生脉冲小大3-30fl被输入血小板通道>30fl被输入RBC通道RBC脉冲大小RDWMCVHCTMCHHbMCHCPLT值脉冲大小PDWMPVPCTHb测定WBC通过小孔管WBC计数根据脉冲大小35-90fl90-160fl160-300fl淋巴细胞(小细胞)中间细胞幼稚细胞单核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞(大细胞)血细胞分析仪的工作流程
1、按自动化程度分型
半自动血细胞分析仪:血液经稀释液预稀释后再上机。全自动血细胞分析仪:血液在仪器内部自动稀释。
2、按白细胞分类功能分型:
分为二分类、三分类、五分类图1.半自动分析仪
这是一个容易操作的系统。接通电源后,仪器处于正常的操作待机状态时,只要把20μl血液样品在机外稀释,混匀后放在样品架上,按下计数键它就可以对15种血液指标和3个细胞直方图进行一次分析。测定完成后结果会立即在LCD上显示并将结果打印出来。
这是一台用于临床实验室体外诊断的全自动血液分析仪,能为血液异常病人提供准确的筛选结果,并提示其需作进一步检查。能每小时分析80份样品,打印出18份参数和3种细胞分布曲线图。操作简便,快速。图2.全自动分析仪图3.CD-3500血球计数分析仪
30个参数,10项白细胞分类,7个分布图,7个散射表示图
可以做网织红细胞分析,以及动物血液测试高达60个品种采用最先进的激光技术和电阻法技术图4.HS血液常规检查流水线HST-330SE-9000/R-3000/SP-100
从血球计数、白血球分类到网织红细胞测定以及标本的推片、染色,全面实现了自动化。实现了高效率的检测。血细胞分析仪质量控制1.人员培训
1)仪器原理、操作规程、注意事项、异常报警的含义。
2)运用质控图的变化进行仪器的调试。2.仪器的鉴定
包括总变异、携带污染率、线性范围、可比性和准确性。3.仪器的校正:
随机的标准品、或者严格的手工法。4.标本的采集和运送
1)要求用抗凝的静脉血
2)抗凝血在室温下,WBC、RBC、PLT可以稳定24h,血小板不适合在低温下保存。5.注意分析中的几个问题
1)最适宜温度为18~22℃2)溶血剂用量及溶血时间
3)仪器的半堵孔现象6.分析后的注意事项WBC、NE(中性粒细胞百分率)NE#(中性粒细胞绝对值)、LY、LY#、MO、MO#、EO、EO#、BA、BA#PLT、MPV(血小板平均体积)PDW(血小板分布宽度)PCT(血小板比容)PLCR(大血小板比率)白细胞计数定义:测定单位体积外周血中各种白细胞的总数。血细胞分析仪法显微镜计数法原理用白细胞稀释液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,滴入计数池中,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。
器材1、显微镜2、微量吸管3、计数板4、盖玻片
质量控制一、误差技术误差:由于操作不正规或器材不精确造成的误差。这种误差通过主观努力可以避免或显著减小。器材不符合要求采血部位不当稀释倍数不准充液不当血液发生凝固包括计数域误差、吸管误差和计数室误差。在计数室内计数的面积越大,计数的细胞越多,计数室和吸管使用的次数越多,误差越小。若细胞数太低(<3×109/L),可数8个大方格,或降低稀释倍数;若细胞数太高(>15×109/L),可适当增加稀释倍数。固有误差:二、有核红细胞的影响校正公式:校正后的血细胞数/L=X×100/(100+Y)
X:校正前的白细胞数
Y:白细胞分类计数时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞。例:某病人白细胞计数结果为5×109/L,白细胞分类计数时,计数100个白细胞的同时发现20个有核红细胞,请问该病人真正的白细胞计数结果为多少?
WBC=
5×109×100/(100+20)
/L=
4×109/L
三.常规考核标准(RCS)RCS(routinecheckingstandard)RCS=(四大格的所见白细胞最大值-最小值)/四大格所见白细胞平均值*100%白细胞≤4×109/L者,RCS<30%白细胞(4.1-14.9)
×109/L者,RCS<20%白细胞≥15×109/L者,RCS<15%
方法学评价血细胞分析仪法:操作简单、效率高、重复性好适合于大批量的标本集中监测缺点:仪器昂贵,准确性取决于仪器的性能及工作状态,使用前需进行仪器的校准,坚持日常质控显微镜计数法:操作简单、费用低廉,试用于基层医疗单位及分散就诊缺点:费时,重复性差,结果的准确性取决于操作者的技术水平,作为仪器检验的校准白细胞分类计数
DifferentialCount(DC)一.外周血五种白细胞中性粒细胞:中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞单核细胞淋巴细胞二.中性粒细胞形态细胞呈圆形,直径10-15um细胞质丰富,呈粉红色,含较多细小、均匀、密集的针尖样的染淡粉红色的中性颗粒细胞核为深紫红色,染色质致密成块状,粗糙核最窄处>1/3最宽处中性杆状核粒细胞核最窄处<1/3最宽处中性分叶核粒细胞嗜酸性粒细胞细胞呈圆形,直径13-15um;胞核多为两叶,呈眼镜状,也可偶见分叶的,染色质粗糙染紫红色胞浆内充满粗大、整齐、均匀、排列紧密的橘红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性粒细胞细胞呈圆形,直径10-12um;细胞核常被颗粒遮盖,核着色较淡,模糊不清。胞质量较少,呈淡红色,含少量粗大但大小不均、排列不规则,分布不均匀的紫黑色嗜碱性颗粒。单核细胞细胞呈圆形或不规则型,直径15-25um。核大,呈不规则圆形、肾形、马蹄形或不规则分叶,染色质细致疏松如网状,染色质和副染色质对比明显,染紫红色。胞浆丰富,染淡蓝或灰兰色,呈毛玻璃样半透明,含大量细小、灰尘样的紫红色嗜天青颗粒。小淋巴细胞细胞呈圆形,直径6-10um。核呈圆形,偶见凹陷,染色质粗糙致密成块,染色质和副染色质界线不清。胞质量少,仅在核的一侧出现一线天蓝或深蓝色胞浆,甚至完全不见。
大淋巴细胞细胞呈圆形,直径10-15um。核呈圆形或椭圆形,常偏于一侧,染色质致密呈块状,但要比小淋巴细胞略为疏松,紫红色。胞质丰富,呈透明天蓝色,常有少量大而稀疏的紫红色嗜天青颗粒。
三.白细胞分类计数原理(一).电阻抗法通过微孔的血细胞所产生的脉冲信号幅度与血细胞体积成正比。白细胞脉冲信号的大小由被计数细胞在溶血液中的大小决定。
小细胞中间细胞大细胞flRELNOR1R2R3R4WBC白细胞体积分布直方图(二).容量、电导、光散射(VCS)白细胞分类法
根据流体力学原理使用鞘流技术,使溶血后液体内剩余白细胞逐个通过检测器接受VCS三种技术的同时检测。CoulterMaxm血细胞分析仪
体积(volumeV):
细胞体积的大小
电导性(conductivityC):细胞核与细胞质的比例、颗粒的大小和密度
光散射(scatterS):检查细胞膜表面特征和内部结构。光散射对细胞颗粒的结构和密度的区分能力强,粗颗粒产生的光散射比细颗粒强。淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统采用电阻抗法(测量细胞体积)和射频(检测细胞核和颗粒密度)的联合检测。细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,白细胞形态改变不大。当这些细胞通过检测系统时,同时进行直流和射频两种电流的检测。以DC(细胞大小)信号为横坐标;以RF(核及颗粒的密度)为纵坐标结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。
射频检测原理
电阻法检测原理手工分类计数方法1、制作血片并染色,干燥后待用2、低倍镜观察白细胞的数量、分布和染色情况3、选择血涂片体尾交界处染色良好的部位,用油镜分类100-200个细胞4、记录五种白细胞的细胞数四.镜检部位
一般体积小的细胞分布在头部和体部比较多;而尾部和两侧以中性粒细胞和单核细胞较多,异常大的细胞在片尾末端出现,所以在体尾交界处观察细胞。白细胞总数<3×109/L,分类50-100个细胞白细胞总数>15×109/L,分类200个细胞其间的白细胞数,分类100个细胞五.记录方法手工完全记录法:将所见的白细胞按其分类用“正”或“++++”的方法记录至所需总数手工半记录法:用上法记录除中性粒细胞以外的各种白细胞,同时默记总数至所需细胞数分类记数器法六.白细胞计数及分类计数的临床意义
分裂池:原、早、中成熟池:晚、杆储备池:杆、分循环池:血液循环边缘池:附着骨髓外周血(一)、生理变化
1.年龄
2.日间变化:
3.运动、疼痛、和情绪的影响
4.妊娠和分娩
结论:白细胞计数波动在30%以下,在临床诊断上无意义,只有通过定时和反复观察才有意义。(二).病理变化
1.中性粒细胞增多急性感染、严重组织损伤、急性中毒、急性大出血白血病或恶性肿瘤。2.中性粒细胞减少某些感染、某些血液病、慢性粒化损伤、自身免疫性疾病、脾功能亢进。(二).病理变化
淋巴细胞增多某些病毒、细菌感染、某些慢性感染、淋巴细胞白血病淋巴细胞减少接触放射线及应用肾上腺皮质激七.嗜酸性粒细胞直接计数原理:用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏红细胞和大部分其它白细胞,并将嗜酸性粒细胞着色,然后滴入细胞计数池中,计数一定范围内嗜酸性粒细胞数,即可求得每升血液中嗜酸性粒细胞数。
临床意义:1.生理变化:兴奋刺激(交感兴奋)↓下丘脑↓释放ACTH肾上腺皮质单核—巨噬(产生肾上腺皮质激素)吞噬分解E↓
骨髓产生和释放E受抑制用显微镜对尿沉淀物进行检查,识别尿液中细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成分;辅助对泌尿系统疾病作出诊断、定位、鉴别诊断及预后判断的重要常规试验项目。概念二检测原理及方法学评价
直接镜检法:混匀一滴尿法自然沉降镜检法:离心镜检法:染色镜检法:可提高管型检出传统显微镜检查法:特殊显微镜检查法:相差显微镜:干涉显微镜:偏振光显微镜:透射电镜:仪器检查法:干化学法尿沉渣分析仪法三质量控制
宜用新鲜(2h内完成检查),随机中段尿液。使用标准器材,如尿液沉渣定量分析板。采用可靠的尿沉渣质控物。尿沉渣检查标准化。应用各种细胞化学,免疫化学染色新技术。
加强与临床的联系。
尿液细胞检查一红细胞(RBC)
红细胞形态:正常红细胞:淡黄色,双凹圆盘状,直径大约8um。异形红细胞:大红细胞、、小红细胞、棘形红细胞、环形红细胞、新月形红细胞、皱缩红细胞及影红细胞。图1红细胞血尿镜下血尿:>3个RBC/HPF,而尿液外观变化不明显。肉眼血尿:>1ml血/1L尿,尿液外观呈淡红色。离心镜检法:0~3/HPF直接镜检法:0~偶见/HPF参考值临床意义:引起血尿的疾病很多,可以归纳为三类原因:全身其它系统的疾病泌尿系统自身疾病泌尿系统附近器官的疾病完整白细胞闪光细胞脓细胞白细胞形态图2白细胞参考值直接镜检法:0~3/HPF镜下脓尿:尿液白细胞>5/HPF离心镜检法:0~5/HPF临床意义
肾盂肾炎膀胱炎女性阴道炎宫颈炎和附件炎肾移植后排异反应其他三上皮细胞(epithelium)
来自肾小管立方上皮见图3在正常人尿中极为少见一旦增多,即提示肾小管病变,在急来源形态参考值临床意义肾小管上皮细胞(renaltubularepithelium)性肾小管肾炎时可见到;急性肾小管坏死的多尿期可大量出现图3肾小管上皮细胞无染色图3肾小管上皮细胞
移行上皮细胞(transitionalepithelium)来源形态参考值临床意义由肾盂、输尿管、膀胱和尿道近膀胱段等处的移行上皮组织脱落而来有多种形态,见图4无或偶见在肾盂、输尿管或膀胱颈部炎症时可成片脱落,但其形态随脱落部位而稍有区别图4大圆上皮细胞图4小圆上皮细胞图4尾型上皮细胞扁平鳞状上皮细胞(pavementepithelium)
来自输尿管下部、膀胱、尿道和阴道的表层来源见图5形态正常尿中可见少量扁平上皮细胞参考值大量出现,或伴白细胞、脓细胞,多见于尿道炎临床意义图5鳞状上皮细胞(扁平上皮细胞)四吞噬细胞(phagocyte)临床意义:尿中出现提示泌尿道急性炎症五其他细胞
尿液管型检查概念:尿液管型,是一些有机物或无机物,如蛋白、细胞或结晶等成分,在肾小管和集合管内凝固聚合而形成的圆柱状结构物。尿液中出现管型往往提示有肾实质性损害一管型形成机制和条件尿液蛋白质和T-H蛋白浓度增高尿液浓缩和肾小管内环境酸化有可提供交替使用的肾单位二管型的形成与分类
蛋白质(白蛋白+T-H蛋白)浓缩、酸化、盐析、凝胶化
透明管型红细胞白细胞上皮细胞白蛋白+T-H蛋白白细胞管型粗颗粒管型细颗粒管型
蜡样管型红细胞管型血红蛋白管型上皮细胞管型脂肪性变的上皮细胞+蛋白质上皮细胞脂肪管型脂肪管型三管型种类、形状和临床意义透明管型形态临床意义见图6偶见于成人浓缩尿、激烈运动后等。病理情况可见于发热、麻醉、心力衰竭、肾受刺激后。如大量持续出现透明管型,表示肾脏病变严重图6透明管型图7红细胞管型临床意义:多见于急性肾小球肾炎图8白细胞管型临床意义:提示肾实质有感染性病变,多见于急性肾盂肾炎。图9上皮细胞管型临床意义:常见于肾小管病变。图10颗粒管型临床意义:提示肾脏有实质性病变。尤其多见于急性或慢性肾小球肾炎。图11蜡样管型临床意义:提示肾小管有严重病变,预后差。可见于慢性肾小球肾炎晚期,肾功能不全。图12脂肪管型临床意义:多见于肾病综和征。宽大管型细菌管型和真菌管型结晶管型混合管型其他管型和类管型相似物Q:尿液中出现何种管型,多提示存在早期肾小球病变?A:红细胞管型。Q:尿液中出现何种管型,多提示存在慢性肾炎或急性肾小球肾炎后期?A:细颗粒管型。简述镜检出现管型的临床意义?①透明管型:见于剧烈运动、发热、麻醉、心功能不全。②红细胞管型:提示肾单位内有出血。③白细胞管型:提示肾实质有细菌感染性病变。④肾小管上皮细胞管型:常见于肾小管病变。⑤颗粒管型:见于肾实质性病变。⑥肾功能不全管型:见于慢性肾小球肾炎晚期尿毒症时,常表示预后不良。⑦脂肪管型:见于慢性肾小球肾炎,尤多见于肾病综合症。⑧蜡样管型:提示肾小管有严重病变,预后差。可见于慢性肾小球肾炎晚期、肾功能不全及肾淀粉样变性时。尿管型基质中含有的主要成分是:T-H糖蛋白尿管型形成的三个必要条件是:尿中存在蛋白质、肾小管有使尿液酸化的能力、有可供交替使用的肾单位尿沉渣可见的细胞有:红细胞、白细胞、、吞噬细胞、上皮细胞关于尿颗粒管型,下列错误的是E粗颗粒管型可见于慢性肾小球肾炎A来自变性的细胞分解B来自血浆蛋白,聚集于基质管型C粗颗粒管型可变为细颗粒管型D细颗粒管型主要见于急性肾小球肾炎早期D
尿液结晶检查DescriptionofthecontentsDescriptionofthecontents一
尿液结晶形成和检查方法二生理性结晶:图13草酸钙结晶图14尿酸结晶图15三联磷酸盐结晶图16非晶形尿酸盐三病理性结晶胆红素结晶:见于各种黄疸患者胱氨酸结晶:大量出现多为肾或膀胱结石的征兆(图17)图17胱氨酸结晶亮氨酸与酪氨酸结晶:可见于有大量组织坏死的疾病,如急性肝坏死、急性磷中毒患者尿中;在糖尿病性昏迷、白血病或伤寒等患者尿液中也可能出现(图18~图19)。胆固醇结晶:可出现于乳糜尿和脓尿。图18酪氨酸结晶
图19亮氨酸结晶尿沉渣的检查内容包括:细胞管型结晶红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞、异形细胞等透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型等磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶等细菌、寄生虫(或卵)、真菌、精子、粘液
尿液沉渣定量检查尿沉渣检验的操作步骤:取混匀10ml尿液置于刻度离心管中
用量筒准确量取全部尿液,并作记录收集全部尿液离心后吸取上清液10ml倾去充池1500r/min,离心10min充分混匀剩余1ml尿沉淀液记数10个大方格中的红细胞白细胞和管型数1小时尿有形成分计数法:定义参考值白细胞临床意义准确留取3h全部尿液,将沉渣中红细胞、白细胞及管型分别记数,再换算成1h的排出数。红细胞:男<30000/h,女<40000/h;男<70000/h,女<140000/h;管型:儿童可偶见透明管型。尿沉渣定量分析板法组成:特制的尿沉渣离心管和定量分析板(图16)参考值:红细胞:0~12/μl白;细胞:0~12/μl;管型:0~1/μl定义:取一定量尿液离心后,将沉淀物滴入记数板,计算1μl容积中的红细胞、白细胞及管型的数量优点:符合尿液检验标准化要求图16尿沉渣定量分析板12小时尿沉渣计数(艾迪氏计数):
定义:留取12h尿液进行沉渣记数红细胞、白细胞及管型的方法。参考值:红细胞:<50万/12h;白细胞:<100万/12h;管型:无。临床意义图17尿沉渣系统工作站肾脏形成尿液输尿管输送尿液膀胱暂时贮存尿液尿道排出尿液血管球肾小囊肾小管(二)尿液的生成
1、肾小球滤过
肾小球滤过膜面积肾小球滤过膜的通透性有效滤过压有关
2、肾小管的重吸收3、肾小管和集合管的排泌
二、尿液分析的目的①泌尿系统疾病的诊断与疗效观察②其它系统疾病的诊断③安全用药的监护④职业病的辅助诊断:如铅、镉、铋、汞等均可引起肾损害⑤对人体健康状态的评估尿液标本的收集、保存与处理尿液标本采集尿液标本种类与采集病人准备标本容器准备尿液标本采集与质量管理1234病人准备收集容器要求尿标本种类尿液标本采集的质量管理文件化管理纠正失控检验的申请紧急报告病人准备填写热敏打印结果标本采集质控评佑接收标本参加室间质评检验报告尿标本保存一、粪便的组成经消化食物吸收一部分营养物质排出食物残渣粪便的组成4未消化的食物残渣1235消化道的分泌物(胆色素、粘液)分解产物(粪臭素、靛基质)肠壁脱落的上皮细胞肠道细菌:主要为大肠杆菌、厌氧菌、肠球菌二、粪便检验的意义意义了解消化系统有无炎症、出血、寄生虫感染、恶性肿瘤等情况判断胃肠胰腺、肝胆系统功能状态。检查粪便中有无致病菌,以防治肠道传染病
一般性状检验
显微镜学检验粪便常规检验三、粪便检验的标本收集和要求1、一般检验应留取约5g左右新鲜粪便标本,若标本有脓血粘液应挑取脓血粘液部分,以提高阳性率。正常粪便标本要多点取样涂片检查。2、从粪便中检查阿米巴滋养体等寄生虫原虫时,应在收集标本后30分钟内送检,注意保温。3、粪便标本收集后应放在清洁干燥的容器内。在采取后一小时内检查完毕。4、粪便隐血试验检查,病人应素食三天后送检,消化道大出血除外。5、无粪便排出又必须检查时,可经肛门指诊或采便管采取标本。
一般性状检查——颜色一般性状检查——性状显微镜检查制片与结果报告
玻片生理盐水1-2滴挑取少量粪便与盐水混匀制成涂片。
低倍镜观察全片情况:有无虫卵、原虫及包囊
高倍镜仔细观察病理成分的形态和结构细胞-白细胞123肠道上段炎症白细胞多分散存在,常有退行性变。肠道下段炎症白细胞多集中在粘液,细胞结构较清晰。过敏性肠炎、肠道寄生虫病粪便中嗜酸粒细胞增多。细胞-红细胞阿米巴痢疾红细胞多于白细胞,红细胞成堆并有残碎现象。红细胞细菌性痢疾白细胞多于红细胞,多分散存在,形态正常。患者突然起病,有发热、腹痛、食欲不佳表现。患者自述大便次数约3-5次/日,糊状或水样,里急后重较轻,伴有轻度的腹痛实验室检查:外观:稀糊样便,含少量粘液,无脓血。急性细菌性痢疾细胞肿瘤细胞上皮细胞巨噬细胞巨噬细胞常伴大量脓细胞出现在细菌性痢疾粪便中正常粪便中少见,炎症时可大量出现,并可见细胞退行性变见于消化道的肿瘤食物残渣肌纤维肠蠕动亢进、腹泻、消化不良时可增多。淀粉颗粒正常粪便中少见,胰腺功能不良、碳水化合物消化不良时可大量出现。脂肪中性脂肪游离脂肪酸结合脂肪酸结缔组织胶原纤维弹性纤维
Charcot-Leyden结晶阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎粪便中可出现。棱形血晶肠道出血后可出现结晶真菌人芽孢子虫普通酵母菌寄生虫虫卵隐血试验
隐血:上消化道出血少量时,红细胞被消化液破坏,以致粪便外观无异常改变,显微镜也不能证明的微量血液为隐血。检测隐血的方法为隐血试验。隐血试验目前临床上多釆用化学触酶法H2O2
过氧化物酶
新生态氧
色原(邻甲苯胺)
邻甲苯胺蓝
POD原理(三)注意事项
1234试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,可致假阳性。禁服铁剂、维生素C后者可致假阴性。H2O2最好新鲜配制所用的器具要清洁每天做阳性对照和阴性对照临床意义粪便隐血试验阳性对消化道出血的诊断有重要的价值。在消化性溃疡时,阳性率为40%-70%,呈间断性阳性。消化道癌症时阳性率可达95%,呈持续性阳性。故粪便隐血试验常作为消化道恶性肿瘤的一个筛选试验。隐血试验方法学进展为解决粪便隐血试验的特异性问题,当前发展最快的是免疫学方法,此类试验所用的抗体分为两类:一种为抗人血红蛋白抗体,另一种为抗人红细胞基质抗体。器材1、显微镜
2、微量吸管
3、计数板
4、盖玻片
(2)枸椽酸钠稀释液
氯化钠
10.0g
枸椽酸钠
5.0g
甲醛
5.0ml
蒸馏水
加至1000ml
其中
氯化钠
维持渗透压
枸椽酸钠
抗凝和维持渗透压
甲醛
固定红细胞和防腐
优点
★配制简单,红细胞不凝集,稀释数小时后仍然保
持正常的圆盘形
★遇自身凝集素过高患者可用不含甲醛的此液红细胞稀释液操作方法1、准备:干净干燥小试管一支,加红细胞稀释液1.99ml2、
吸取血液10ul,擦去管外余血,将微量吸管插入小试管稀释液的底部,轻轻将血打出,并用上清液洗数次混匀3、计数板和盖玻片擦干净备用
4、充液:混匀液体,用吸管吸取少量混匀的红细胞悬液充入计数池内,静止2-3分钟,待细胞下沉后进行计数。5、计数:
高倍镜计数中央大方格内四角及正中五个中方格的细胞数。
计算:X/5×25×10×200×106/L=X×1010/L
白细胞计数原理用白细胞稀释液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,滴入计数池中,在显微镜下计数一定范围内白细胞数,经换算即可求得每升血液中各种白细胞总数。
试剂冰乙酸:2.0ml10g/L亚甲兰:3滴蒸馏水加至100ml作用:冰乙酸溶液溶解红细胞亚甲兰:使白细胞核稍着色,并与其他细胞稀释液区分。1、准备:小试管加白细胞稀释液0.38ml。
2、
吸取血液20ul,擦去管外余血,将毛细吸管插入小试管稀释液的底部,轻轻将血打出,并用上清液洗数次,混匀。
3、计数板和盖玻片擦干净备用。
操作方法4、
充液:混匀液体,用吸管吸取少量混匀的白细胞悬液充入计数池内,静止2-3分钟,待白细胞下沉后进行计数。
5、
计数:
用低倍镜计数四角四大方格的白细胞。计数原则压线细胞数上不数下,数左不数右。
式中:在法定计量单位制中用△.△
△
×109/L表示
X:为4个大方格内白细胞总数。
÷4:为每大方格(即0.1ul)内白细胞平均数。
×10:1个大方格的容积为0.1ul,换算成1ul。
×20:血液的稀释倍数。
×106:将ul换算成L。
计算
X/4×10×20×106/L=白细胞/L0.39ml白细胞稀释液中加入10ul血液,混匀,充入计数池,计数二侧计数池四角共8个大方格内的细胞数为64个,请计算该标本的白细胞数。WBC=64/8×10×40×106/L=3.2×109/L
血小板计数
(bloodplateletcount,BPC)试剂要求
能有效防止血小板粘附、聚集、破坏
很快将血小板固定
破坏红细胞,但对血小板无损伤
等渗,防止血小板收缩[操作]吸取稀释液(草酸铵)-采血-稀释混匀-充液静置-计数-计算-结果报告计数范围:中央大方格四角及正中五个中方格计算:血小板/L=N×5×10×20×106
结果报告:BPC(PLT)×109/L
显微镜计数法[操作]
RBC
WBC
BPC稀释液量(ml)20.380.38血量(μl)102020稀释倍数200
20
20计数范围计算公式1、计数时应注意与杂质相鉴别2、刺血深度要深,使血液自然流出。3、采血后1h内计数完毕,滴入计数池后必须静置15min后再计数显微镜计数法[质量控制]标本:EDTA盐抗凝血指血观察要点:血小板大小血小板形态(胞质受色、颗粒大小、形态等)血小板分布高铁氰化钾
Hi
+CN-过氧化物酶
HiCN
HbPOD
氰化高铁血红蛋白测定法试剂HiCN转化液
氰化钾
0.05g
高铁氰化钾
0.2g
无水磷酸二氢钾
0.14g
非离子型表面活性剂
1.oml
蒸馏水
加至1000ml
方法A/44×64458(mg)/1000×251=A×367.7=Hb(g/l)(大试管)转化液5ml末梢血20ul+静止5分钟比色注意事项1、
分光光度计波长、灵敏度以及比色杯内径均应严格校正。2、
血红蛋白转化液必须放在棕色玻璃瓶内保存防止分解。3、
血红蛋白转化液中有剧毒的KCN故要进行无公害处理后方可排入下水道。精液(semen)的组成精液由精浆(seminalplasma)和精子(spermatozoa)组成精子在睾丸中形成,在附睾中成熟精液中为精子提供活动能力的物质是果糖
精子的形态和结构精子形似蝌蚪分为头、尾两部分头部有核和顶体尾部可分为颈段、中间段、主段和末段精液分析的意义1、寻找男性不育的原因2、观察输精管结扎术后的效果3、作为男性生殖系统疾病诊断的参考4、计划生育和科研5、筛选优质精子6、法医鉴定一般性状检查
Generalproperties)精液量:每次2-6ml,平均3.5ml。量少多见于生殖道炎症,尤其是结核性病变。颜色和透明度:正常精液呈灰白色,自行液化后为半透明的乳白色。异常可见血精和脓性精液
粘稠度正常情况下新排出的精液胶胨状;异常新排出的精液呈米汤样
测定方法:玻棒法;粘度计法液化时间(liquefaction)
精液液化时间:是指刚排出的精液由胶胨状自行转变为自由流动状态所需的时间。正常精液排出后60分钟内液化。精子活动率检查精子活动力检查精子浓度和总数精子形态的观察显微镜检查精子活动率检查测定方法:
1.湿片法:
混匀高倍镜观察
2.精子体外染色法:精液+染液推片计数(不着色)参考值:以“活”精子比率表示
1.湿片法:
>70%(30-60min)2.精子体外染色:>75%(30-60min)
精子活动力(spermmotility)
精子向前运动的能力
WHO:a级--快速前向直线运动
b级--缓慢或呆滞的前向运动
c级--精子呈缓慢或非前向运动
d级--精子呈不动状
正常:射精后60分钟内
a级+b级≥50或a级≥25%精子
精子浓度(spermdensity)和总数1.粗略估计法2.显微镜计数法(手工法)①血细胞计数板法
②Makler精子计数板法3.计算机辅助精液分析精子计数血细胞计数板法
原理:
碳酸氢钠破坏精液的粘稠性,甲醛固定精子,稀释后充入计数池内计数。
一次排出精子总数=精子浓度×精液量精子浓度(20-200)×109/L
精子总数(40-60)×106精子形态观察
【检测原理】1.湿片法:高倍镜观察
2.染色法:涂薄片
干燥、固定
染色
油镜观察
【方法学评价】1.湿片法:简便、快速,结果偏差大。
2.染色法:复杂、费时,准确可靠,重复性好,
为WHO推荐方法。精子形态判断标准
正常形态:似蝌蚪状,分头、体、尾①头部正面呈卵圆形,侧面呈扁平梨形,头部长4.0~5.5μm,宽2.5~3.0μm②体部轮廓直而规则,与头部纵轴成一直线,长5-7μm,宽1μm③尾部细长,外观规则而不卷曲,长50-60μm精子形态判断标准
异常形态:头、颈、尾、联合缺陷体
临床意义:正常精液异常精子<20%,若异常精子>50%为不育原因之一。化学检查一、精浆果糖(seminalplasmafructose)
阴性:先天性精囊缺如降低:精囊炎二、精浆乳酸脱氢酶-X(LDH-X)降低:睾丸萎缩,少精或无精患者三、精浆α-葡糖苷酶对鉴别输精管阻塞和睾丸生精障碍所致的无精症有一定意义。四、精浆酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)
减低:前列腺炎增高:前列腺癌,前列腺肥大五、精子顶体酶(acrosomalenzyme)
与不育指标相关六、精浆锌:减低:生育力下降、生殖器官发育不良
化学检查习题:()正常精液液化时间不超过:
A、10minB、20minC、30min
D、60min()精液中提供精子活动力能量来源的是:
A、蔗糖
B、葡萄糖
C、果糖
D、糖原
出血(bleeding)止血(hemostasis)
凝血(bloodcoagulation)
血栓形成(thrombosis)
血栓(thrombus)
出血(bleeding)血管损伤后,血液自血管内溢出或流出止血(hemostasis)自发的阻止出血和维持体内血液呈溶胶状态的一系列过程凝血(bloodcoagulation)血液由溶胶状态转变为凝胶状态血栓形成(thrombosis)在某些因素作用下,活体血管内或心脏中形成纤维蛋白块或出现血凝块的过程,所产生的纤维蛋白块或出现血凝块成为血栓出血和止血血液从破损的血管壁流出的过程,谓之出血。出血后的及时止血是机体维持生命的重要功能。出血后的止血过程是快速的,局限性的。止血的性质:血液凝固,堵塞住血管破损的部位,防止血液进一步丢失。影响血液凝固的6个方面1.血管壁2.血小板系统3.凝血系统4.抗凝血系统5.纤维蛋白溶解系统6.血液流变学系统各系统相互制约处于动态平衡保持血液流通一、血管壁的作用:⑴止血作用:①血管收缩;②激活血小板;③激活凝血系统;④局部血粘度的增高。⑵血管壁又有抗血栓形成的能力。
血管壁的止血作用1.血管壁的结构与调控(1)结构:内层:内皮细胞(肝素、vWF、tPA、TM、AT-Ⅲ)中层:外层:(2)调控:神经、体液、内皮细胞内皮系统:最初的保护血管内壁有一层内皮细胞。完整的内皮细胞是防御出血和血栓形成的最初防线。内皮细胞一旦损伤,易引发血栓形成。正常的血管内皮细胞1.血小板的粘附功能机制:直接粘附血管内皮下成分机制:依赖于vWF、血小板膜糖蛋白
2.血小板聚集功能血小板血小板活化血小板聚集3.血小板释放功能溶酶体、a-颗粒和致密颗粒内容物参与凝血、溶栓和组织修复4.血小板促凝功能血小板能与血浆凝血蛋白反应的过程5.血块收缩功能释放血小板收缩蛋白6.维护血管内皮的完整性凝血酶、ADP血小板膜糖蛋白血小板的止血作用Ca2+、Ⅰ内皮下组织暴露血小板粘附血小板聚集血小板释放纤维蛋白形成坚固的凝血块ADP血小板的促凝血块收缩凝血系统正常止血的两个阶段一期止血:血小板粘附、血小板聚集以及血管收缩二期止血:血浆凝血因子活化,形成纤维蛋白凝块止血机制血管损伤内皮下组织暴露血小板粘附初期止血血小板聚集凝血酶形成血小板释放反应止血栓形成纤维蛋白形成二期止血加固止血栓止血栓收缩血凝块形成ADP、TxA2三、凝血因子作用及血液凝固机制凝血系统:凝血因子的活化。功能:是血栓形成的物质基础。内容:凝血因子目前包括14个,包括12个经典的凝血因子以及激肽系统的激肽释放酶原(PK)和高分子量的多肽(HMWK),凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ。凝血因子及血液凝固机制凝血因子的特性正常血液中除组织因子(因子Ⅲ)分布在全身组织外,其余均可在血浆找到除Ca2+(因子Ⅳ)外,均为蛋白质。凝血因子的种类依赖维生素K的凝血因子:Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ接触凝血因子:Ⅻ、Ⅺ、激肽释放酶原(PK)及高分子量激肽原(HMWK)对凝血酶敏感的凝血因子:Ⅰ、Ⅴ、Ⅷ、ⅩⅢ其他凝血因子组织因子(Ⅲ)、因子Ⅳ(Ca2+)三、凝血因子作用及血液凝固机制:①外源性凝血途径:由组织因子启动的凝血过程称为外源性凝血途径,参与的凝血因子少(Ⅲ、Ⅶ、Ca2+),反应速度快(15秒以内)。②内源性凝血途径:内源性凝血从因子Ⅻ激活开始。参与的因子还有激肽酶原、激肽酶、高分子激肽原(HMWK)、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ca2+、PF3等。③凝血的共同途径:凝血酶原激活物使凝血酶原激活为凝血酶。凝血酶再激活纤维蛋白原为纤维蛋白,凝血即告完成。
血液抗凝系统抗凝血系统:抗凝血蛋白质(酶)对凝血因子的灭活功能:抵抗凝血系统,灭活活化凝血因子。内容:①细胞抗凝作用:单核巨噬细胞系统,肝细胞和血管内皮细胞②体液抗凝作用
抗凝血酶(AT)、蛋白C系统、组织因子途径抑制物、肝素辅因子Ⅱ等抗凝血酶(ATⅢ)肝、内皮细胞分泌的抑制凝血因子(Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅱ)及蛋白酶(纤溶酶、激肽释放酶),肝素加强抗凝血酶活性蛋白C系统
微循环抗血栓形成的主要血液凝固调节物质组织因子途径抑制物
抑制Ⅹ因子纤维蛋白溶解(纤溶)系统的作用:溶解体内或体外的凝血块。纤溶酶原被激活,成为纤溶酶,纤溶酶作用于纤维蛋白(原),使之降解成多种肽链碎片。血液纤溶系统功能:在血栓形成后,溶解血栓。机制:血液凝块形成,激活纤维蛋白溶解系统水解纤维蛋白和纤维蛋白原。治疗:溶栓治疗的理论基础即将纤溶酶原转化为纤溶酶组成:纤溶酶原激活物、纤溶酶原、纤溶酶及纤溶抑制物
纤溶酶原和纤溶酶
裂解纤维蛋白原和纤维蛋白,分解凝血因子纤溶酶原激活物
组织纤溶酶原激活物(t-PA):
体内最强烈的纤溶酶原激活物
尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)纤溶抑制物
纤维蛋白的溶解机制纤溶酶原激活途径
内激活途径:内源凝血途径中的某些因子(Ⅻ)继发纤溶的理论基础外激活途径:体内合成的某些激活物(tPA、uPA)原发纤溶的理论基础
外源激活途径:药物(链激酶、尿激酶)溶栓治疗的基础纤维蛋白降解机制纤维蛋白原
可溶性纤维蛋白
交联纤维蛋白凝血酶ⅫⅠ纤溶酶纤溶酶纤溶酶D二聚体X’Y‘DE’等X‘Y’DE’等XYDE等两个系统间,动态平衡。凝血系统:过度活化易导致血栓形成。凝血系统:过度抑制易导致出血。抗凝血系统:过度活化易导致出血。抗凝血系统:过度抑制易导致血栓形成。毛细血管脆性试验(CFT)出血时间BT血小板计数PLT血块收缩时间CRT凝血时间测定CT血浆凝血酶原时间PT活化部分凝血活酶时间APTT凝血酶时间TT纤维蛋白原降解产物FDPD-二聚体测定DD第二节血栓与止血常用实验出血时间(BT)测定
【原理】
将皮肤毛细血管刺破后,出血自然停止所需的时间(初期止血时间)。其长短主要受血小板质、量,血管壁完整性、收缩力的影响;其次与凝血因子Ⅷ和vWF有关。
【方法及评价】
出血时间测定器法首选方法
【参考值】
测定器法:6.9±2.1min,超过9min为异常。
【质量控制】1、不服用对管壁和血小板有影响的药物2、采血部位应注意保暖3、穿刺时应避开浅表静脉、疤痕和病变皮肤4、血液应自动流出,滤纸吸去血液时,避免与伤口接触,更不能挤压伤口。【临床意义】1.BT延长①血小板显著减少:如原发性及继发性血小板减少性紫癜。②血小板功能不良:如血小板无力症、巨大血小板综合征。③毛细血管壁异常:如维生素C缺乏症、遗传性出血性毛细血管扩张症。④某些凝血因子严重缺乏如血管性血友病、DIC。2.BT缩短主要见于血栓前状态及血栓形成性疾病3.术前筛查及用药监控不能区分血管功能和血小板质和量的缺陷,重复性差血管退缩试验CRT【原理】在一定条件下,按规定的时间观察血块收缩情况或计算血块的收缩率,这主要与血小板的数量和功能有关。【方法及评价】定性法:定量法:全血定量法:与血小板功能障碍程度不一致血浆定量法:富含血小板的血浆中加入Ca或凝血酶,去除血浆凝块,测定析出血清体积占PRP体积的百分比参考值全血定量法:48%-64%
血浆定量法:大于40%以上[临床意义]血块收缩不佳或完全不收缩:
血小板数量异常:血小板减少性紫癜(尤其血小板数<50×109/L)血小板功能异常:血小板无力症纤维蛋白原、凝血酶原严重减少
血块收缩过度:见于先天性凝血因子ⅩⅢ缺乏症、严重贫血
凝血时间测定(clottingtime,CT)
【原理】
静脉血放在玻璃试管中,观察自采血开始至血凝所需要的时间称为凝血时间。主要反映内源性凝血过程第一期有无异常,与Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子关系最大。【方法及评价】
玻璃试管法硅管法塑料试管法
【参考值】
4~12min(试管法)。
【质量控制】1、抽血必须顺利,不应有溶血。2、实验温度应保持恒定一致3、被APTT取代【临床意义】
①凝血时间延长见于血浆Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子严重减少;凝血酶原严重减少;纤维蛋白原严重减少;DIC后期。
②缩短见于血液呈高凝状态时,如DIC早期、脑血栓形成或心肌梗死。
活化部分凝血活酶时间测定
(activatedpartialthromboplastintime,APTT)
【原理】活化部分凝血活酶时间测定是在受检血浆中加入APTT试剂(接触因子活化剂和部分磷脂)和Ca2+后,观察其凝固时间。反映内源性凝血系统较好的筛选试验。
【方法及评价】手工法:结果不易标准化仪器法:自动化程度高、参数多、抗干扰、速度快【参考值】
男性:37+-3.3秒,女性:37.5+-2.8秒较正常对照延长10秒以上为异常。【质量控制】1、标本应及时检测,是最迟不得超过2小时。2、离心3000r/min,10min,除去血小板。3、白陶土规格不一,参考值不一样。【临床意义】
同凝血时间,但较其试管法敏感,正逐渐取代凝血时间测定。APTT监测肝素的首选指标。血浆凝血酶原时间(prothrombin
time,PT)
【原理】
在被检血浆中加入足够的组织因子(Ⅲ因子如兔脑或胎绒浸液)和适量的钙离子后,血浆凝固所需要的时间。外源性凝血活性的检查。
【方法及评价】ISI(国际敏感指数)=标准品组织凝血活酶(PT)与每批组织凝血活酶(PT)校正曲线的斜率INR(国际标准化比值)=(PT病人/PT正常)ISI【参考值】
11~13s。应有正常对照,超过正常对照3s以上则有病理意义。【质量控制】1、采血应顺利,避免溶血,凝固,3000r/min,离心10min去除血小板。2、1小时内测试完毕,4度冰箱保存不超过4h。3、选择ISI值小的凝血活酶。4、双份测定,正常对照。【临床意义】
1.凝血酶原时间延长见于:①先天性:Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋白原减少。②后天性:严重肝病、维生素K缺乏、
DIC后期,使用双香豆素抗凝时。2.PT缩短:主要见于血液高凝状态时,如DIC早期、脑血栓形成、心肌梗死等。3.INR用于监测口服抗凝药的首选指标血浆凝血酶时间(thrombin
time,TT)
【原理】
在待检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后,至血浆凝固所需的时间,抗凝物质增多,时间延长。
【参考值】
16~18s。应有正常对照,超过正常对照3s以上则有病理意义。
【质量控制】1、待测血浆要新鲜。2、实验前凝血酶要标准化。3、每次终点的判断标准要统一。4、肝素或EDTA-Na2不宜作为抗凝剂。【临床意义】
①TT延长:抗凝物质增多;低(无)纤维蛋白原血症
②TT缩短:常见于血样本中有微小凝板或Ca2+
存在。
③作为使用链激酶、尿激酶时的监护指标。血浆纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)【原理】
凝血酶比浊法:在受检血浆中加入一定量凝血酶,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白,通过比浊原理计算纤维蛋白原的含量。
【方法及评价】在受检血浆中加入一定量的凝血酶,使血浆中的Fg转变为纤维蛋白。凝固时间与纤维蛋白原的含量呈负相关。此法操作简单,敏感性和特异性较高,是目前常用的测定方法。【参考值】2~4g/L。【临床意义】
①增高见于血栓前状态:急性心肌梗死、急性肾炎、糖尿病、多发性骨髓瘤、休克、大手术后、妊娠高血压综合征、恶性肿瘤等。②减低见于DIC、重症肝炎和肝硬化等。血浆纤维蛋白(原)降解产物测定纤维蛋白原和纤维蛋白受到纤溶酶作用后,形成多种肽链碎片,如片段A、B、C、X、Y、D、E等,统称为纤维蛋白降解产物〔FDP〕。
【原理】降解产物具有纤维蛋白原的抗原决定簇,可获得抗FDP抗体,利用免疫方法可检测血浆中的FDP含量【方法及评价】红细胞凝集抑制试验参考方法胶乳凝集试验常用方法【参考值】
胶乳凝集法:<5mg/L。【临床意义】
FDP增高是体内纤溶亢进的标志,但不能鉴别原发和继发性。增高见于原发性纤溶症;继发性纤溶(DIC,恶性肿瘤,急非淋M3,各种栓塞,器官移植的排斥反应,心、肝、肾疾病,溶栓治疗)。
血浆D-二聚体测定【原理】
在继发性纤溶时,纤维蛋白被纤溶酶水解,先生成碎片YD/DY、YY/DXD、DD/E等中间产物,再进一步被纤溶酶分解为DD(D-二聚体)和E片段。继发性纤溶的标志。【方法及评价】胶乳凝集试验用于定性测定ELISA法全自动血液凝固测定仪【参考值】
胶乳凝集法为阴性;ELISA法小于400µg/L。
【临床意义】
继发性纤溶症(如DIC、恶性肿瘤、各种栓塞,心肝肾疾病等)为阳性或增高;原发性纤溶症为阴性或不升高,本试验为鉴别原发与继发纤溶症的重要指标。FDP和D-D筛选试验的结果分析
1.FDP和D-D均正常:表示纤溶活性正常,表明临床的出血症状,与原发性和继发性纤溶无关。
2.FDP阳性伴D-D阴性:表示只有纤维蛋白原被降解,而纤维蛋白未被降解,见于原发性纤溶。
3.FDP阴性伴D-D阳性:表示只有纤维蛋白被降解,而纤维蛋白原未被降解,见于血栓栓子自发性溶解。
4.FDP和D-D均阳性:表示纤维蛋白原和纤维蛋白同时被降解,见于继发性纤溶,如DIC和溶栓治疗。毛细血管脆性试验(CFT)出血时间BT血小板计数PLT血块收缩时间CRT凝血时间测定CT血浆凝血酶原时间PT活化部分凝血活酶时间APTT凝血酶时间TT纤维蛋白原降解产物FDPD-二聚体测定DD血管壁和血小板凝血机制是否存在纤溶亢进和抗凝物质血栓形成前后纤溶系统血凝仪及临床应用
全自动血液凝固测定法使用的全自动血液凝固测定仪,采用多参数检定质控,有多次质量控制的能力,具有加样、预温、检测、报告结果全部自动化及快速、准确、定量的优势。其特点是:①测定运转速度快,单位时间内检测的标本数多,使离体血标本在最短时间内,即血浆凝血因子活性最微小量改变前,测定完毕;②检测方法多样,具有生物(凝固)法、生物化学(呈色)法和免疫法;③检测项目的任意组合和检测随机性;④先进的软件系统有利于检测数据的处理和检测参数的设置;⑤检测成本低(使用微小量试剂)和取血量少;⑥抗凝血浆中所含食糜或脂肪混浊或溶血或深浅不一黄疸等物质的干扰;⑦贮存试剂的部位具有冷藏功能;⑧测定仪对部分常规检测项目的试剂已提前预先制定标准曲线,一旦起用这类试剂后,预定标的标准曲线立即生效;⑨全部标准曲线均具最优化的直线稳定性;⑩针对不同浓度的血样本,测定仪进行自动在线稀释。实验方法的选择血液标本的采集与处理检测试剂的选择仪器的选择和校准操作过程的质量控制血凝仪及临床应用标本的采集抗凝剂的选择及使用标本的运送和保存标本的分离血栓与止血的检测主要用于血小板量与质异常、凝血障碍、血栓前状态和血栓性疾病的临床诊断、鉴别诊断、病情观察、疗效评价和预后判断,也用于抗栓治疗的监测。血栓与止血检查方法繁多,可先选择简单易行的筛选试验,再逐步做确诊试验。血栓与止血检查进展
(一)一期止血缺陷的选择
一期止血缺陷指血管壁和血小板异常所致的出血性疾病。
1.筛选试验
血小板计数(Plt)和出血时间(BT)
筛选试验
(1)Plt和BT都正常:多见于血管壁异常所致的出血性疾病,如过敏性紫癜、单纯性紫癜、遗传性出血性毛细胞血管扩张症和其他血管性紫癜。(2)Plt减少,BT延长:多数为血小板减少性紫癜,如原发性或继发性。
(3)Plt增多,BT延长:多数为继发性血小板增多症。(4)Plt正常,BT延长:见于:①血小板功能异常:血小板无力症、;②某些凝血因子缺乏:低(无)纤维蛋白原症、血管性血友病。2.诊断试验
血小板减少:骨髓穿刺涂片、骨髓活检、血小板寿命测定、血小板相关免疫球蛋白测定等。
血小板功能异常:血小板粘附试验、血小板聚集试验、血块收缩时间、血浆β血小板球蛋白、血小板第4因子和血小板第3因子有效性测定等。
血小板聚集实验在富血小板血浆中,加入致聚剂,血小板发生聚集,血浆浊度减低,透光度增加。将此光浊度变化通过光电池用电讯号方式记录于图纸上,形成血小板聚集曲线。血小板聚集曲线反映了血小板聚集程度和速度。(二)二期止血缺陷的选择
二期止血缺陷指凝血因子缺乏和抗凝物质所致的出血性疾病。
1.筛选试验
APTT和PT(1)APTT和PT都正常:除正常人外,仅见于先天性和获得性因子ⅩⅢ缺乏症。(2)APTT延长,PT正常:多数见于内源性凝血途径中1个或几个凝血因子缺乏。(3)APTT正常,PT延长:多数见于外源性凝血途径缺陷。(4)APTT和PT都有延长:共同凝血途径缺陷,以及肝脏疾病、应用肝素等。
2.诊断试验凝血因子缺乏可选用纠正试验、凝血因子促凝活性等测定。血浆因子ⅡⅤⅦⅩ促凝活性检测受检血浆分别于乏因子ⅡⅤⅦⅩ基质血浆混匀,在家兔脑粉浸出液和钙液,分别作血浆凝血酶原时间测定,将受检者血浆测定结果与正常人新鲜血浆比较,计算因子促凝活性。血浆因子ⅧⅨⅪ促凝活性检测受检血浆分别于乏因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ基质血浆白陶土脑磷脂悬液和钙液,分别记录开始出现纤维蛋白丝所需的时间,在各自的标准曲线中,分别计算出血浆中各因子相当于正常人的百分率。抗凝蛋白检验血浆蛋白C活性检验受检血浆中加入蛋白C激活剂,PC被活化后作用于发色底物,释出显色集团,显色深浅与PC含量平行。临床意义:易栓症寻找动静脉血栓的病因(三)纤维蛋白溶解综合征包括原发性纤溶和继发性纤溶两种。1.筛选试验
FDP和D-二聚体
3.弥漫性血管内凝血(DIC)检查法DIC是一种多种病因所引起的血栓止血病理生理改变的一个中间环节。其特点是体内有血小板聚集,病理性的凝血酶生成,纤维蛋白在微血管中沉积,形成广泛性的微血栓。在此过程中消耗了大量的血小板和凝血因子,是凝血活性减低,同时引起继发性的纤溶亢进发生在感染、外科手术或创伤、恶性肿瘤、产科意外等许多疾病基础上,由致病因素激活凝血系统,导致全身微血栓形成。发病早期凝血系统功能亢进,高凝状态/血小板聚集和血栓形成;其后消耗大量凝血因子和继发性纤溶亢进。临床表现为出血、栓塞、微循环障碍及溶血等。诊断根据病人的临床资料和实验室检查综合判断。检验PLT减低、PT延长、Fg含量减低为DIC的基本实验FDP、D-D聚体阳性为筛选试验第一部分
正常血细胞形态血细胞分化模式1-1血细胞成熟过程规律胞体:大—小(巨核小—大)胞浆:细胞越幼稚,染色越深;细胞越成熟,染色越浅淡,以胞浆染色判断有核红细胞、粒细胞、巨核细胞成熟度。胞浆染色:深蓝(原始)---蓝色(早幼)---浅蓝(中幼)---粉色颗粒变化:由无颗粒(原始)---噬天青颗粒(早幼)---特异性颗粒(中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒)胞浆量:有少----多胞核:体积:有大---小,成熟红细胞无核染色质:细致疏松---粗糙紧密快状核膜:不显著
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