DB37-T 4177-2020 蔬菜中4-羟基百菌清残留量的快速测定 液相色谱-串联质谱法

65.100G

25DB37

37/T

4177—2020蔬菜中

羟基百菌清残留量的快速测定液相色谱-串联质谱法

of

4-hydroxychlorothalonil

vegetables

—

Liquidchromatography-tandem

山东省市场监督管理局 发

布DB37/T

4177—2020 本标准按照GB/T

1.1—给出的规则起草。本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会种植业标准化分技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业环境保护和农村能源总站。本标准主要起草人：吴成、王蕾、赵志强、于富昌。DB37/T

4177—2020 1 范围本标准规定了蔬菜中4-羟基百菌清（参见附录A）残留量液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于蔬菜中4-羟基百菌清残留量的快速测定。2 规范性引用文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB

2763 食品安全国家标准

食品中农药最大残留限量GB/T

6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理-4 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为色谱纯，水为符合

6682中规定的一级水。4.1 试剂4.1.1

乙腈（CH3，4.1.2

甲醇（CH3，4.1.3

甲酸（CH2O2，4.1.4

醋酸铵（C2H7NO2，631-61-8）。4.1.5

氯化钠（NaCl，7647-14-5），分析纯，

℃烘烤

4

h。4.2 溶液配制0.1

%+5

mmol/L醋酸铵水溶液：称取0.385

g醋酸铵于500

mL烧杯中，用水充分溶解后，准确加入1

mL甲酸，将上述溶液转移至1

mL容量瓶中，用水定容，现用现配。4.3 标准品4-羟基百菌清标准品：纯度≥98

%，标准品信息参照附录A。4.4 标准溶液配制4.4.1 标准储备溶液

5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾负离子源（

5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾负离子源（ESI

）。准确称取适量（精确至

mg）10

容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成1

mg/L的标准储备溶液（或购买有证标准储备溶液），0

℃～4

℃保存，保存期为6

个月。4.4.2 中间标准溶液4.4.110

mg/L的羟基百菌清中间标准溶液，0

℃～4

℃保存，保存期为2周。4.4.3 标准工作溶液准确吸取适量的中间标准溶液（4.4.2），用空白样品基质溶液稀释配制成所需浓度的标准工作溶液，现用现配。4.5 材料微孔滤膜：有机系，0.22

μ

m。5 仪器和设备-5.2

分析天平：感量分别为

01

g

和

0.01

g。5.3

组织捣碎机。5.4

旋涡混合器。5.5

均质器：转速不低于

15

r/min。5.6

离心机：转速不低于

5

r/min。6 试样制备蔬菜样品取样部位按GB

的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大

下冷冻保存。7 分析步骤7.1 提取称取15.0

g

g100

mL

30

mL12

r/min匀浆提取2

min6

g1

，4

200

r/min离心5

min2

mL0.22过滤，待测。7.2 测定7.2.1 液相色谱－串联质谱参考条件参考条件如下：a)

色谱柱：Shim-pack

Ⅲ

色谱柱，50

mm×2.0

mm(i.d.)，

μ

m，或相当者；minA/%B/%0.590102.050505.050509.09511.59513.0901050

20

10

10

20

25

30

50

k)

电喷雾负离子源（

k)

电喷雾负离子源（

）

接口电压：-3.5

kV；b)

流动相：A

为

%甲酸

mmol/L

B

1速：0.35

；c)

柱温：40

℃；d)

进样体积：10.0

μ

L；e)

扫描方式：负离子模式；f)

检测方式：多反应监测（），多反应监测条件参照附录

B；g)

加热块温度：

h)

脱溶剂管(DL)温度：250

℃；i)

干燥气（N2）流速：15.0

L/min，纯度≥99.999

%；j)

雾化气（N2）流速：3.0

，纯度≥99.999

%；-l)

检测器电压：1.74

；m)

碰撞气（Ar）压力：0.23

MPa。表1 表1 梯度洗脱程序SHIMADZU

LCMS-80407.2.2 定性测定被测试样中4-羟基百菌清色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5

%之内。且在扣除背景后的样品质谱图中，4-品中4-许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在羟基百菌清。表2 定性时相对离子丰度的最大允许偏差表2 定性时相对离子丰度的最大允许偏差本方法采用外标法单定量离子对定量测定,定量用标准溶液采用基质标准工作溶液。在仪器最佳工

VDB37/T

4177

V中4-4-羟基百菌清标准物质多反应监测色谱图参照附录A，质谱图参照附录C。7.3 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。7.4 平行试验按以上步骤对同一试样进行平行测定。8 结果计算和表述液相色谱-串联质谱测定结果可由计算机按外标法自动计算，也可按式

.......................................

(1)m式中：ω

4-羟基百菌清残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρ ——从标准工作曲线上得到的试样中4-羟基百菌清的质量浓度，单位为毫克每升（mg/LV ——提取溶剂总体积，单位为毫升（mL）；m ——试样的质量，单位为克（g留两位有效数字，含量超过1

mg/kg时保留三位有效数字。9 精密度9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录

E

的要求。9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录

F

的要求。10定量限和回收率10.1 定量限本方法的定量限（）参照附录A。10.2回收率当添加水平为、5×、10×LOQ时,

添加回收率参照附录D。

minmg/kg4-4-hydroxychlorothalonil83228343-61-56.910.01DB37/T

4177—2020AA附

录 A（资料性附录）4-羟基百菌清中英文名称、分子式、CAS

号、保留时间、定量限和标准物质多反应监测色谱图4-照图。表A.1 4-羟基百菌清中英文名称、分子式、CAS

号、保留时间和定量限表A.1 4-羟基百菌清中英文名称、分子式、CAS

号、保留时间和定量限Q1CE/VQ3/%4-2458210112512DB37/T

4177—2020BB附

录 B（资料性附录）4-羟基百菌清监测离子对、碰撞能量和碎裂电压4-羟基百菌清监测离子对、碰撞气能量和碎裂电压，参照表。表B.1 4-羟基百菌清监测离子对、碰撞能量和碎裂电压表B.1 4-羟基百菌清监测离子对、碰撞能量和碎裂电压DB37/T

4177—2020CC附

录C（资料性附录）4-羟基百菌清标准物质多反应监测（MRM）质谱图4-羟基百菌清标准物质多反应监测（MRM）质谱图，参照图C.1。图C.1 4-羟基百菌清标准物质多反应监测（MRM）质谱图mg/kg4-0.017073867380710.058080767680800.1888278787879DB37/T

4177—2020DD附

录D（资料性附录）4-羟基百菌清在

6

种蔬菜中的添加回收率4-羟基百菌清在6种蔬菜中的添加回收率，参照表。表D.1表D.14-羟基百菌清在

6

种蔬菜中的添加回收率mg/kg0.001360.0010.01320.01220.11814DB37/T