DB37-T 4686-2023 海洋生物体中金刚烷胺的测定 液相色谱-串联质谱法

67.120.30CCS

B

5037 DB37/T

4686—2023海洋生物体中金刚烷胺的测定 液相色谱-串联质谱法

of

—Liquid

tandemmass

山东省市场监督管理局发

布DB37/T

4686—2023 前言

.................................................................................

II1

...............................................................................

12 规范性引用文件

.....................................................................

13 术语和定义

.........................................................................

14

...............................................................................

15 试剂及配制

.........................................................................

16 仪器和设备

.........................................................................

27

...............................................................................

28 分析步骤

...........................................................................

39 结果计算与表示

.....................................................................

410 准确度

............................................................................

511 质量控制和质量保证

................................................................

512 废物处置

..........................................................................

5附录

A（资料性） 色谱图...............................................................

6附录

B（资料性） 方法的准确度

.........................................................

8DB37/T

4686—2023 本文件按照GB/T

—《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省海洋局提出并组织实施。本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。IIDB37/T

4686—2023 串联质谱法接触，样品前处理过程应在通风橱中进行。1范围本文件描述了海洋生物体中金刚烷胺液的液相色谱-串联质谱测定方法，包括原理、试剂及配制、仪器和设备、样品、分析步骤、结果计算与表示、准确度、质量控制和质量保证、废物处置等。3.00

g刚烷胺检出限为0.5

μg/kg，测定下限为

μg/kg。2 规范性引用文件文件。GB/T

6682 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理海洋生物体样品用乙酸乙腈提取后，经固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。5 试剂及配制5.15.25.35.45.55.65.7

实验室用水：GB/T

6682，一级。甲醇（CH3）：色谱纯。甲酸（HCOOH）：色谱纯。乙腈（CH3）：色谱纯。氨水（NH4）：优级纯。乙酸（CH3COOH）：优级纯。1%乙酸乙腈溶液（体积分数）。取1

mL乙酸，用乙腈定容至100

mL。5.8 5%氨水甲醇溶液（体积分数）。取5

mL氨水，用甲醇定容至100

mL。DB37/T

4686—20235.9 0.1%甲酸溶液（体积分数）。取0.10

mL100

mL。5.10 0.1%甲酸乙腈定容液（体积分数）。将1

mL甲酸与

mL乙腈，加入到700

mL水中。5.11 金刚烷胺标准品：

号

，纯度大于

99.0%。5.12 D15-金刚烷胺内标溶液：

号

，1

。5.13 金刚烷胺标准贮备液。称取金刚烷胺0.010

0

g，用乙腈溶解，并定容至

mL，配制成1.0

mg/mL标准贮备液，

℃下避光保存，有效期为90

d。5.14 金刚烷胺标准工作液。移取

μL5.13

μg/mL标准工作液，4

℃下避光保存，有效期为30

d。5.15 D15-金刚烷胺内标标准中间液。移取100

μL

D15-金刚烷胺内标溶液（5.12），用乙腈溶解，并定容至100

mL，配制成

μg/mL内标标准中间液，4

℃下避光保存，有效期为30

d。5.16 D15-金刚烷胺内标标准工作液。移取1

mL

D15-金刚烷胺内标标准中间液（），用乙腈定容至10

，配制成100

μ内标标准工作液，4

℃下避光保存，有效期为7

d。6 仪器和设备6.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾电离源（ESI

源）。6.2 天平：感量分别为

0.01

g

和

0.000

1

g。6.36.46.56.66.76.86.96.106.11

均质机。高速离心机：10

000

r/min。超声波清洗器。涡旋混合器。固相萃取装置。固相萃取柱：（混合型阳离子固相萃取柱），60

mg/3

，或相当者。氮吹仪。聚丙烯离心管：50

。滤膜：聚偏氟乙烯滤膜，孔径为

0.22

μm。7 样品7.1 制备-18

量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。7.2 提取minmL/min0.000.25950.500.25950.600.25955.000.25955.100.25957.000.2595DB37/T

4686—2023称取3.00（±0.01）g样品至50

mL离心管中，加入

μL内标标准工作液（5.16）和15

mL

1%乙酸乙腈溶液（5.7），涡旋

s，超声提取15

min，8

r/min10

，待净化。7.3 净化MCX固相萃取柱经6

mL5.26

水（5.1）活化后，取5

mL上清液移入固相萃取柱，3

水（）淋洗，6

mL

5%氨水甲醇溶液（）洗脱，全程控制流速为2

～3

。收集洗脱液，用氮吹仪于40

℃下吹至近干，用定容液（5.10）定容至1

mL，过滤膜，供液相色谱-串联质谱仪分析。7.4 空白试样的制备除不加试料外，均按上述测定步骤进行。8 分析步骤8.1 液相色谱质谱条件8.1.1 液相色谱条件：a)

色谱柱：

(100

×

mm，1.8

μm)，或相当者；b)

色谱柱温度：40

℃；c)

流速：0.25

mL/min；d)

进样量：10

μL；e)

流动相：A

为乙腈（5.4B

为

0.1%甲酸溶液（）；流动相梯度洗脱程序见表

1。表1 流动相梯度洗脱程序表8.1.2 质谱条件：a)

离子化模式：ESI+；b)

电离电压：2.50

kV；c)

锥孔电压：25

V；d)

离子源温度：

e)

锥孔反吹气流速：50

L/h；f)

脱溶剂气温度：400

℃；g)

脱溶剂气流速：700

L/h；h)

氩气流速：0.12

mL/min；i)

测定方式：选择反应监测模式（SRM），定量离子和定性离子参数见表

2。m/zm/zeV15293253013525171671412517a

5020202510301050DB37/T

4686—2023表2 待测物定量离子和定性离子参数8.2 标准曲线的建立）

μL、20

μL、40

μL、50

μL、100

μL100

μL5.165.101

mL10.0

µ、20.0

µg/L、40.0

µ、50.0

µ、

µ，现用现配。以各标准工作液金刚烷胺峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标，以各标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线。8.3 试样测定按照仪器条件（8.1），分别测定金刚烷胺标准工作液（8.2）、试样（7.3）、空白试样（7.4金刚烷胺标准溶液、空白样品和加标样品的色谱图参见附录A。9 结果计算与表示9.1 定性分析的校正标准溶液相对丰度一致。定性确证时相对离子丰度的允许偏差应符合表3的要求。表3 定性确证时相对离子丰度的允许偏差𝑚

𝑚

(1)按8.12响应值均应在仪器检测线性范围内。9.3 结果计算样品中金刚烷胺的含量按公式（1𝑥

（𝑐−𝑐0）𝑉DB37/T

4686—2023式中：x

——样品中金刚烷胺的含量，单位为微克每千克（µg/kgc

——试样溶液中金刚烷胺的浓度，单位为微克每升（µc——空白试样溶液中金刚烷胺的浓度，单位为微克每升（µg/L）；V

——试样溶液的定容体积，单位为毫升（mL）；m——样品的湿重，单位为克（g9.4 结果表示计算结果扣除空白值，测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。10 准确度10.1 精密度本方法批内相对标准偏差和批间相对标准偏差均小于15%。详见表。10.2 正确度金刚烷胺在添加浓度1.0

μg/kg～100

μg/kg时，回收率为～120%。详见表。11质量控制和质量保证11.1 空白试验每2020个样品/1方法检出限。11.2校准2020个样品/1个中30%r应大于0.99。11.3 平行样每20个样品或每批次（少于20个样品/批）应至少测定一个平行样。平行样测定结果的相对偏差应在±10以内。11.4 基体加标每2020个样品/～120%之间，见附录B。12废物处置实验过程中产生的废液和废物应分类收集，集中保管，委托有资质的单位进行处理。RelativeAbundanceRelativeAbundanceRelativeAbundanceRelativeAbundanceDB37/T

4686—2023RelativeAbundanceRelativeAbundanceRelativeAbundanceRelativeAbundance附 录 A（资料性）色谱图图A.1、图给出了金刚烷胺标准溶液色谱图、空白样品色谱图和加标样品色谱图。

图A.1

金刚烷胺标准溶液色谱图（10.0

µ）

ESI

ESI

图A.2

空白样品色谱图RelativeAbundanceRelativeAbundance

RelativeAbundanceRelativeAbundance1009080706050403020

DB37/T

4686—20231.63E4

+

ESISRMms2

152.000MS

20201216-31100100

2.25E4

+

ESISRM9080706050403020

ms2

167.000MS

20201216-31100

图A.3

金刚烷胺加标样品色谱图（金刚烷胺添加量为

5.0

µg/kg）µg/kgµg/kgµg/kg101.962.631.010.85502.593.064.653.681002.503.339.587.28101.772.931.050.94503.973.404.983.691002.853.408.977.98103.873.341.030.82502.282.155.023.651002.192.899.268.26102.542.711.040.86504.603.315.134.981003.363.059.648.26104.014.251.060.75503.476.385.264.951005.876.178.797.69DB37/T

4686—2023附 录 B（资料性）方法的准确度方法精密度和正确度汇