DB3301-T 1119-2023 杂交兰种苗组培快繁技术规程

65.020.20CCS

B

053301 DB3301/T

1119—2023杂交兰种苗组培快繁技术规程 杭州市市场监督管理局 发

布DB3301/T

1119—2023 本文件按照GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由杭州市农业农村局提出、归口并组织实施。本文件起草单位：杭州市农业科学研究院。本文件主要起草人：李春楠、傅巧娟、张晓莹、赵福康、钱丽华、阮若昕、沈国正。DB3301/T

1119—20231 范围的要求。本文件适用于杂交兰种苗组培扩繁至驯化栽培的生产过程。2 规范性引用文件文件。GB/T

8321（所有部分） 农药合理使用准则NY/T

—2010 肥料合理使用准则 NY/T

1276—2007 农药安全使用规范 3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。杂交兰 Cymbidium

由国兰和大花蕙兰种间杂交选育的一类兰花杂交种。类原球茎

bodies兰花外植体诱导培养时，茎尖生长点组织逐渐膨大形成的、可发育成完整试管苗的扁形球状物。4 组培苗培养外植体的选择和处理4.1.1 母株的预处理

多菌灵可湿性粉剂

3

天

1

2

3

环境，温度宜

25

℃，光照宜

8000

～

。4.1.2 外植体的选取母株基质干透后，选择苞叶尚未展开、露出基质表面

2

～6

cm

的新生芽，从基部切断取下，置于无菌样品袋中带回实验室。DB3301/T

1119—20234.1.3 外植体消毒4.1.3.1

50

min～80

min，再流水充分冲洗，置于超净工作台上。4.1.3.2 剥去

1

片～2

片外苞叶，酒精浸泡消毒

90

s，无菌水清洗

2

次～3

4.1.3.3 再剥去

1

2

片外苞叶，浸入

10%

NaClO

溶液，加入

2

滴～3

滴吐温

20，处理

菌水清洗

3

次～4

4.1.3.4 浸入

0.1%

HgCl2溶液，加入

2

3

滴吐温

20，根据芽的大小灭菌

15

min～

min，无菌水清洗

5

次～6

4.1.3.5 再剥去

1

2

0.05%

2溶液中消毒

60

s

5

6

次。初代培养4.2.1 接种取消毒后的芽，剥离

0.3

cm～

的茎尖组织接种于初代培养基诱导类原球茎。4.2.2 培养基培养基配方宜为：1/2MS

+

1

mg/L

6-BA

+

1

mg/L

IBA+

1

活性炭+

30

+

5

琼脂，

值

5.6～5.8。4.2.3培养条件光照

，光照强度

lux～1000

，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。继代培养4.3.1 转接初代培养

d

后，将诱导形成的类原球茎分割为体积约

×

0.4

cm

×

0.4

的团块，接种于继代培养基上，每隔

60

d～75

d

继代一次，分割时去除类原球茎上分化的芽和根，继代次数不宜超过

4.3.2培养基培养基配方宜为：

1（花宝

1

+

mg/L

6-BA

+

0.5

mg/L

+

50

g/L

香蕉泥+

2g/L

水解酪蛋白+

1

g/L

活性炭+

30

蔗糖+

5

琼脂，pH

值

～5.8。4.3.3 培养条件光照

，光照强度

lux～1000

，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。分化培养4.4.1 转接将增殖的类原球茎分割为体积约

0.4

cm

×

0.4

cm

×

cm

的团块，转接至分化培养基上分化成芽，类原球茎之间的距离不宜少于

1.5

cm。4.4.2 培养基DB3301/T

1119—2023培养基配方宜为：1/2MS

+

0.5

mg/L

6-BA

+

0.1

mg/L

+

+

0.2

活性炭+

20

蔗糖+

6

琼脂，pH

值

5.6～。4.4.3 培养条件光照

，光照强度

lux～2000

，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。生根培养4.5.1 转接待芽长至

3

cm～5

时，将其切下接种于生根培养基培养

50

d～

d。4.5.2 培养基培养基配方宜为：

1（花宝

1

号）+

0.1

6-BA

+

mg/L

+

100

g/L

香蕉泥+2

g/L

水解酪蛋白+

1

活性炭+

30

+

7

g/L

琼脂，pH

值

5.6～。4.5.3 培养条件光照

，光照强度

lux～2500

，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。5组培苗驯化移栽瓶苗驯化当苗高长至

8

～

、根数达到

3

5

条、根长

3

cm～5

cm

时，将瓶苗转移至温室驯化培养，覆盖

遮阳率的遮阳网

5

d～7

d，而后揭去遮阳网继续培养

10

d～20

d，移栽前，打开瓶口放置

2

d～3

d

4000

～5000

lux

25

℃～30

20

℃，宜春、秋两季驯化。瓶苗移栽取出幼苗，洗净根部培养基，宜用

多菌灵可湿性粉剂

1000

倍液等广谱杀菌剂浸泡

干至根变白后移栽至营养钵。宜选用经消毒的基质，体积比为松鳞、鹿沼土与仙土=1:1:1。幼苗栽培管理栽后具体管理措施详见附录

A。6 质量等级组培苗质量等级见附录

B。7 包装、标签和运输包装7.1.1 组培瓶苗DB3301/T

1119—2023物隔离填充。7.1.2营养钵苗

50%以内，外观为表面基质较干，盆内基质湿润。密封的包装箱箱侧应设通风孔。标签每箱应贴上标签，标明品种名称、等级、数量、产地、出苗日期等，并在纸箱上做好“请勿倒置”的明显标志。运输运输时选择整洁的保温车辆，车厢内温度保持在

℃～25

℃之间，车辆行驶过程中避免剧烈颠簸以防组培瓶破碎或幼苗脱落，并应在

5

h

以内到达目的地。此外，不宜在严寒、酷热天气运输。8 模式图杂交兰种苗生产模式图见附录

C。

15

3000

15

30

5000

8000lux

15

15

15

13

1500

202020

NY/T

2010

15

15

3000治蓟马，吡虫噻嗪酮防治蚧壳虫，吡虫啉防治蚜虫。施药防治应按照

GB/T

8321

NY/T1276

DB3301/T

1119—2023

附 录 A（资料性）杂交兰组培苗栽后管理杂交兰组培苗栽后管理措施参见表。表A.1

杂交兰组培苗栽后管理措施表A.1