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文档简介

高中生物实验中酒精的作用一、无水酒精

作用

提取色素。

原理

叶绿体中的各种色素均是有机物,能溶解在有机溶剂中,各色素在无水酒精中的溶解度较大,且酒精无毒,方便操作。

应用

叶绿体中色素的提取。

二、体积分数为95%的酒精

作用

①解离;

②析出提取含杂质较少的DNA。

原理;

①解离原理:用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精1∶1混合,能使组织中的细胞相互分离开来;

②析出提取含杂质较少的DNA的原理:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。

应用:

①观察植物细胞的有丝分裂;

②DNA的粗提取与鉴定。

三、体积分数为70%的酒精

作用

消毒杀菌。

原理

体积分数为70%的酒精,能够顺利地渗入到细菌体内,吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能,以达到消毒杀菌的目的。高于体积分数为70%浓度的酒精与细菌接触时,就可能使得菌体表面迅速凝固,形成一层薄膜,阻止了酒精继续向菌体内部渗透,待到适当时机,薄膜内的细胞可能将薄膜冲破而重新复活。在此高浓度下,酒精迅速凝固蛋白质的作用往往随着其浓度升高而增强,因此,其消毒杀菌的效果也就越差。若酒精的浓度低于70%,也因不能顺利地渗入到细菌体内而彻底杀死细菌。如果使用体积分数为70%的酒精,既能使组成细菌的蛋白质凝固,又不能形成薄膜,这样,酒精可继续向内部渗透,从而达到较好的消毒效果。值得注意的是,体积分数为70%的酒精溶液的杀菌能力不是绝对很强,它对芽孢就不起作用。

应用

学习微生物的培养技术。在接种开始时,待用肥皂将双手洗干净后,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭双手,然后在进行接种操作。

四、体积分数为50%的酒精

作用

洗去浮色。原理

苏丹Ⅲ是弱酸性染料,易溶于体积分数为50%酒精。

应用

:脂肪的鉴定实验。在该实验中,用苏丹Ⅲ对花生子叶薄片染色后,在薄片上滴1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,可以洗去被染玻片标本上的苏丹Ⅲ染液浮色。

五、工业酒精(一般是体积分数为95%的酒精)

作用

燃烧加热。

原理

酒精是富含能量的有机物,燃烧能产生大量的热量。

应用

此处包括各类必须加热的实验,如生物组织中还原糖的鉴定、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取与鉴定、温度对酶活性的影响、学习微生物培养的基本技术、自身固氮菌的分离等实验。生物实验中颜色反应的总结1.斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+菲林试剂→砖红色沉淀注意:菲林试剂的甲液和乙液要混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件是需要加热。应用:检验和检测某糖是否还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。2.苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。3.双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件不需要加热。应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。4.碘液检测淀粉和观察动植物细胞的基本结构的染色剂原理:淀粉+碘液→蓝色;碘液能使动植物细胞着色。注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉;验证光合作用产生淀粉;在观察动植物细胞基本结构——细胞膜、细胞质、细胞核时用碘液做染色剂,使细胞核染上颜色便于观察。5.DNA的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿→绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色应用:用于DNA粗提实验的鉴定试剂6.吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红→红色应用:可以显示RNA在细胞中的分布。7.台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。8.线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。9.酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。10.CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。11.染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液、醋酸洋红溶液、改良苯酚品红染液)染成深色。应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂;观察低温诱导植物细胞染色体数目变化;植物花药离体培养时,可以通过染色镜检来确定其中的花粉是否处于适宜离体培养的发育期。12.吲哚酚试剂与维C溶液呈褪色反应原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维C具有还原性,能将其褪色。维生素C溶液在中性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成无色,在酸性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成粉红色。也可以用氯化铁溶液代替吲哚酚试剂,维生素C溶液可把黄色的氯化铁溶液还原成无色的氯化亚铁溶液。应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。13.亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。14.脲酶的检测原理:细菌合成的脲酶可以将尿分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。15.伊红美蓝检测大肠杆菌原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈深紫色。应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。16.刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。应用:筛选纤维素分解菌。17.植物花粉细胞核的染色

原理:在做月季的花药离体培养实验时,选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素,一般在单核靠边期花药培养成功率最高。选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法(花粉细胞核内有染色体,染色体主要由DNA和蛋白质组

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