《生物化学检验技术》技能实训指导与考核标准

技能实训指导与考核标准

目录

实训一分光光度计的使用...........................................3

实训二基础试剂的配制..............................................5

实训三标准曲线的绘制.............................................7

实训四静脉采血...................................................9

实训五回收实验（以二乙酰一脂法测尿素氮为例）....................11

实训六重复试验..................................................14

实训七质控图绘制................................................16

实训八Z分数质控图的绘制.........................................19

实训九血清总蛋白测定............................................22

实训十血清清蛋白测定............................................25

实训H--血清蛋白电泳............................................27

实训十二血清中葡萄糖测定........................................30

实训十三血清三脂酰甘油测定......................................33

实训十四血清总胆固醇测定........................................36

实训十五血清LDL-C.................................................................................................38

实训十六血清HDL-C................................................................................................41

实训十七半自动生化分析仪使用....................................43

实训十八血清总钙测定............................................45

实训十九血清中淀粉酶测定........................................48

实训二十血清乳酸脱氢酶活性测定...................................51

实训二十一血清肌酸激酶活性测定...................................55

实训二十二血清甲胎蛋白测定.......................................60

实训二十三血清钾、钠、氯化物的测定..............................62

实训二十四肝功能测定一（ALT、AST测定）..........................64

实训二十五肝功能测定一（TBIL、DBIL测定）.........................71

实训二十六肝功能测定三（ALP、r-GT测定）..........................74

实训二十七肾功能测定（Cr、BUN、Urea测定）79

实训一分光光度计的使用

项目名称分光光度计的使用实训室名称生物化学检验实训室

开设学期2019年第一学期实训课时2

1.掌握比色分析的基本原理

实训任务

2.规范使用分光光度计及利用错钱滤光片法对其波长的检测

描述

知识准备【原理】

利用被测物的有色溶液对某一特定波长的光谱具有选择性吸收的特性，

将吸收的光谱按不同强度转变相应的电能，再将电量的变化用检流计显

示出来，将显示的电量以光量强度(D或A)计算，根据朗伯-比尔定理，

实训准备即D=KCL,即吸光度与溶液的浓度与厚度的乘积成正比关系。

实训用品721型分光光度计、错钱滤光片、5%CUS04液、纱布、比色杯等

注意事项1.仪器需防震、防潮、避光。

2.比色时，手拿比色杯的毛面，液体倒杯高的2/3或4/5,比色

杯不能用硬毛刷刷洗，也不能用高温烘烤。

1.预习实训内容，明确实训目标；

任务分配2.全班分成若干小组，每组2-4人；

与组织3.每位学生完成一次操作，掌握其方法；

4.收拾好台面卫生，物品归位，完成实训报告。

顺

内容操作标准分值得分

序

用物

用物是否齐全，摆放科学，合理合格2

评评估

估自我

着装是否整齐3

20分评估

知识

能说出比色分析的原理。5

评估

用物721型分光光度计、错铉滤光片、5%CuS0”液、纱布、

5

准备比色杯、去离子水等

环境

实验室整洁、安静、安全5

准备

考评方案

与标准(-)基本操作

操①开机：打开电源开关，通电预热仪器20min;

作

步721

②波长设置、光路调节：选定所需波长，将波长

臊型分

光光旋至测定所需波长；将空白液、稀、浓硫酸铜应用液

6分0

度计45

的使装入比色杯的2/3到3/4体积，将开关置于T位，将

用

黑室置于光路中，调节T%为0.0;将空白液置于光路

中，调节T%为100.0；将开关置于A位，用消光调零

调节A为0.0,重复调节T%为100.0,A为0.0三次；

③样品测定：将校准液或待测液推入光路，测

量溶液的吸光度（A）。重复测量三次，取三次吸光度

值的平均值作为测定值；

④取出比色杯，将液体倒入废液缸，蒸馅水冲

洗，倒置滤纸上以备再用。

实验整理用物2

台正确处理所用物品3

整理实验台恢复整洁5

操作

步骤正确，动作规范、操作熟练5

方法

评操作

价熟练使用分光光度计5

效果

20操作具有一定生物安全防范意识，能正确处理使用过的物

分5

态度品

操作

时间30min5

时间

总分100

学生应提

1.实训总结

交资料清

2.实训成果

单及要求

1,提交实训资料（包括实脸原理、操作步骤等）

2、实训总结（对知识掌握与运用、实训方案设计、实训过程、实训结果等进行自我

评价，分析失误原因以及改进措施等）

实训

报告成果

学生签名：_________

年月日

（含知识考核、实训过程评价、实训结果评价等）

考核

评价

考核教师签名：

年月日

实训二基础试剂的配制

项目名称基础试剂的配制实训室名称生物化学检验实训室

开设学期2019年第一期实训课时2

实训任务掌握：基础试剂的配制

描述

物品准备：氯化钠（分析纯）、分析天平、校准祛码、称量纸、蒸镭水、烧

准备工作杯、容量瓶（1L）、玻璃棒、药匙、毛刷、大胶头滴管，标签纸、记录纸、

笔

准备工作：穿工作服、戴手套、不披发、准确清点实验器材、试剂

实训准备

注意事项1.生物安全要求

2.实训着装要求

3.实训场地卫生要求

4.实训设备或工具的清洁、整理、归还等要求

1、预习实训内容，明确实训目标。

任务分配2、全班分成若干小组，每组1~2人。

与组织3、实脸操作。

顺分

内容操作标准得分

序值

环境

实验室是否清洁、光线明亮，操作台是否摆放规范2

评估

用物

评用物是否齐全，摆放科学，合理合格2

评估

估

自我

20着装是否整齐2

考评方案评估

分

与标准什么是基础试剂6

知识

评估配制基础试剂的注意事项8

氯化钠（分析纯）、分析天平、校准硅码、称量纸、蒸馈水、

操用物

烧杯、容量瓶（1L）、玻璃棒、药匙、毛刷、大胶头滴管，5

作准备

标签纸、记录纸、笔

步

环境

躲实验室整洁、安静、安全4

准备

60操作步骤：

分1.实验项目:配制0.9%的氯化钠溶液WOOMLo

2.计算：计算配制0.9%生理盐水1000mL,所需NaCI固体

的量为9克。

3.试剂的称量：①检查并调整天平至水平位置；②打开天平

开关预热足够时间，天平则自动进行灵敏度及零点调节。待

稳定标志显示后，可进行正式称量：③称量时将洁净称量纸

折叠后置于托盘上，关上侧门，轻按去皮归“0”后，用药

匙盛试样，在容器上方轻轻振动，使试样徐徐落入容器，调

整氯化钠的量至达到指定的9.000克；④称量完后，将试

剂全部转移入实验容器中，并用蒸馅水冲洗称量纸上残留

35

的氟化钠；⑤称量结束应及时关上侧门，切断电源，清扫天

平内的残留物。

4.溶解转移及定容：容量瓶使用前先检漏；

把称量好的氯化钠加少量去离子水溶解于烧杯中，然后用

玻棒转移至容量瓶中，用去离子水润洗烧杯三次并全部转

移至容量瓶中，再缓慢加入去离子水至接近容量瓶刻度线，

用滴管滴加去离子水，直至平视刻度线时，液面凹面与刻度

线相切。定容后的溶液浓度不均匀，要把容量瓶瓶塞塞紧，

用食指顶住瓶塞，用另一只手的手指托住瓶底，把容量瓶倒

转和摇动多次，使溶液混合均匀；并贴上标签、注明试剂名

称、浓度、配制日期。

实脸实脸完成后用物归位、垃圾按分类入医疗废物桶，桌面洁净

台整齐，洗手方法准确6

整理

操作

步骤正确，动作规范、操作熟练3

方法

评操作

操作熟练，浓度准确5

价效果

20操作

具有一定生物安全防范意识，能正确处理使用过的物品4

分态度

操作

时间30min8

时间

总分100

学生应提

1.实训报告

交资料清

2.实训成果

单及要求

1、提交实训资料（包括实验原理、操作步骤等）

2、实训总结（对知识掌握与运用、实训过程、实训结果等进行自我评价，分析失误原因

实训

以及改进措施等）

报告

学生签名：__________

年月日

(含知识考核、实训过程评价、实训结果评价等)

考核

评价

考核教师签名：

年月日

实训三标准曲线的绘制

项目名称标准曲线的绘制实训室名称生物化学检验实训室

开设学期2019年第一期实训课时2

将160gL的标准硫酸铜溶液，稀释成，20g/L,40g/L,80gL,160g/L五个不

实训任务同浓度的标准溶液，在630nm处，以蒸憎水调零，测定不同浓度标准液所对应

描述的吸光度值，绘制标准曲线。

知识知识点1:如何倍比稀释，标准溶液如何配制？

准备知识点2:分光光度计的使用？

实训一大组三个托盘。每个托盘内需有：去离子水、刻度吸管、洗耳球、

用品大号试管，试管架、记号笔、标签纸、托盘、比色皿、、擦镜纸、滤

实训准备纸、坐标纸、铅笔、尺子、160gL的标准硫酸铜溶液

注意(1)容量瓶使用准确规范

事项(2)分光光度计注意开机预热

(3)进行吸光度测定，要求持杯方法、倒置溶液量及杯外壁黏附液处

理等得当，拉动拉杆读数准确，记录详细

(4)数据记录完整，标准曲线绘制规范

任务分配与

两个同学一小组，互采

组织

分

顺

值

序内容操作标准得分

用物

用物是否齐全，摆放科学，合理合格3

评估

评

自我

估着装是否整齐3

评估

20分容量瓶的检漏、洗涤、使用注意事项(口述)6

知识

评估一定物质的量浓度溶液的配制过程(口述)8

考评方案与

标准物品准备：去离子水、刻度吸管、洗耳球、大

号试管，试管架、记号笔、标签纸、托盘、

操用物

722s型可见光分光光度计、比色皿、、擦镜纸、5

作准备

步滤纸、坐标纸、铅笔、尺子、160gL的标准硫酸

骤铜溶液、黄色袋、锐器盒、消毒液桶

1、取试管5只，分别标记160g/L、80g/L、

6分0

倍比40g/L、20g/L、10g/L5种标准液浓度；

20

稀释2、分别在80g/L、40g/L、20g/L、10g/L试管

中加入去离子水5ML

3、用一只移液管从160g/L的标准原液中移取

5mL至标记为80g/L的试管中，再用一只干燥的

移液管吹吸混匀2-3次，然后移5mL至标记为

40g/L的试管中，重复以上步3聚至标记为10g/L

的试管，最后吸取5mL弃去。同时取5mL标准

原液于160g/L试管中待测。

分光

1.调节分光光度计波长630nm：以蒸镭水做为空

光度

白，把5种标准溶液依次倒入比色杯，进行吸

计比

光度的测定。要求持杯方法、倒置溶液量及杯

色及20

外壁黏附液处理等得当，拉动拉杆读数准确，

标准

记录详细.

曲线

2.应用电脑绘制标准曲线

绘制

结果

按要求做出相关系数在0.95以上的标准曲线10

判断

实验完成后用物归位、垃圾按分类入医疗废物

整理5

桶，桌面洁净整齐，洗手方法准确

操作

步骤正确，动作规范、操作熟练3

效果

作

操

评具有一定生物安全防范意识，能正确处理使用

态

度

价10

过的物品

20操作

分时间40min5

时间

总

100

分

学生应提交

1.实训总结

资料清单及

2.实训成果

要求

实训一、老师教学

过程二、学生操作

记录三、完成报告

1、对提交实训资料（含实物）

2、实训总结（对知识掌握与运用、实训过程、实训结果等进行自我评价，分

析失误原因以及改进措施等）

实训

报告

学生签名：_________

年月日

（含知识考核、实训过程评价、实训结果评价等）

考核

评价考核教师签名:

年月E)

实训四静脉采血

项目名称静脉采血实训室名称生物化学检验实训室

开设学期2019年第一期实训课时2

1,熟练掌握静脉穿刺标准操作规程，确保静脉穿刺操作的正确性和规范性

实训任务2.了解标本的处理方法

描述3.了解影响实验结果的各种因素

知识准备知识点1:如何防止溶血？

知识点2:生化检验常用的抗凝剂有哪些，如何选择使用？

实训用品一大组三个托盘。每个托盘内需有：注射器、一次性试管、75%酒精、络合

碘、止血带、棉签、标签纸等

注意事项(1)防止溶血

(2)避免充血和血液浓缩

实训准备3)若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女性病人做了

乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血

(4)采血的体位

(5)采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注人空气，形成气栓而

造成严重后果。

(6)很多生化成分受膳食影响

(7)晕血处理

任务分配

与组织两个同学一^卜组，互采

分

顺序内容操作标准得分

值

用物

用物是否齐全，摆放科学，合理合格3

评估

评

自我

估着装是否整齐3

评估

20分

血液采集的顺序(口述)6

知识

生化检验常用的抗凝剂有哪些，如何选择使用？(口

评估8

述)

考评方案

物品准备：手消毒水、紫帽管、黑帽管、红帽管、试

与标准用物

管架、消毒棉签、采血针、消毒压脉带、垫包、无菌5

准备

垫布、络合碘、酒精、医用胶布，送检单.

操75%

作1.确保穿刺用托盘准备好，内容包括所有采血用

步具(止血带、注射器、试管、消毒液、棉签等)。

骤

采血2.所有的样本试管编号或贴上标签。

6分0

前准3.请患者准备。做血液检验项目的病人，一般要求采20

备血前禁食8—12小时，心情平静。

4.查看检验单，查对检验单上病人姓名、性别、年龄

等项目与病人是否吻合，耐心检查需要空腹血检验的

项目，询问病人是否8小时以内没有能量摄入；需

要增添项目时先与出具检验申请单的医生联系。

5.洗手，带上手套，并注意常规防护。

6.在受试者的穿刺位以上约5~8厘米处。紧紧地系

上止血带，但不能太紧以至受试者不舒服，止血带的

捆绑时间不应超过1分钟。并注意常规防护。

7.嘱受试者握紧拳头，选择合适的血管：当轻压或轻

拍时能感觉其回弹的静脉即为合适血管。最常用的选

择部位是血管丰富并且血管贴近皮肤表层的肘前区

域。

8.消毒：以穿刺点为圆心，用蘸有碘酒的棉签由内到

外螺旋型涂抹，然后用75%酒精棉签脱碘，消毒范围

为直径大约3厘米，注意消毒过的地方不能重复涂

抹，在涂抹的过程中棉签必须也要同时旋转。如果

手臂皮肤不足够干净的则需重新擦拭

9.穿刺部位干燥。

10.在洁净后不要触摸穿刺部位.

1.准备好注射器，将针头斜面朝上，与针管的刻度同

在一平面上使针与手臂成约30度角，使其方向与血

管一致。

2.迅速地刺穿已选定的静脉。

3.若观察到回血现象，说明针已经准确地刺入血管。

嘱受试者松开拳头。

4.固定针具确保针头不移动。

5.平缓地回抽注射器以抽取所需体积血液。当出现异

静脉常时如：病人出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并

20

穿刺急救；操作失败，取得病人谅解，再次进行操作（“对

不起，由于……的原因需要再取一次血，请原谅”）。

采样尽量在1分钟内完成。

6.解开止血带。

7.退针。

8.请受试人自行轻压棉签3~5分钟。手臂需举至高于

心脏水平位置以控制血流。

9.将血液样本完全转移到指定的管内。顺序血培养

一血常规管一血凝管一血沉管一生化及其他。

结果

按要求静脉采血10

判断

整理正确处理所用物品，实验台恢复整洁5

评操作

步骤正确，动作规范、操作熟练3

价效果

20分操作具有一定生物安全防范意识，能正确处理使用过的

10

态度物品

操作

时间40min5

时间

总分100

学生应提

1.实训总结

交资料清

2.实训成果

单及要求

实训一、老师教学

过程二、学生操作

记录三、完成报告

1、对提交实训资料（含实物）

2、实训总结（对知识掌握与运用、实训过程、实训结果等进行自我评价，分析失误原

因以及改进措施等）

实训

报告

学生签名：_________

年月日

（含知识考核、实训过程评价、实训结果评价等）

考核

评价

考核教师签名：

年月日

实训五回收实验（以二乙酰一肪法测尿素氮为例）

项目名称回收实脸实训室名称生物化学检险实训室

开设学期2019年第一期实训课时4

1.掌握回收实验的基本原理

实训任务2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度--回收率实验的设计

描述3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价

知识准知识点1:回收实验的基本原理：在已知浓度的样品中加入一定量的被测

备物，然后用同样方法测定，测定值与“理论值”（样品浓度和加入浓度之

和）之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。

回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一，有人认为回收率

除鉴定测定方法的优劣处，不可用来纠正测定中的误差，其计算公式如

下：

回收率=暨鬟X100%

加入浓度

加入浓度=标准浓度X臂〃售喇

血清加数+标准""数

实训准备实训用（以二乙酰法测BUN为例）水浴箱（100℃）、721型分光光度计、混合血

品清（①②③）、BUN标准液（100mmol/L>200mmol/L,7.14

mmol/L）等

注意事1.加入标准液的体积在整个样品中占比例要少，一般不能超过10%,否则

项整个样品稀释过大，不能反映原有样品的实际情况。

2.加入被分析物后，使回收实验样品的溶度达到医学决定水平（是指对病

人医疗具有参考价值的临床分析物的溶度）。

3.回收实验应重复测定三次以上，以减少随机误差。

4.为防止因标准液不稳定，或制备中的误差，或因实验操作所致的误差，

应同时用已被公认的可靠性强的方法做比较；测定时应用2份以上的样

品：不同样品要同时测定以减少实验操作或样品对实验方法的影响。测定

病人的血清，应注意某些药物的干扰。

1、预习实训内容，明确实训目标。

任务分配

2、全班分成若干小组，每组2-4人。

与组织

3、进行回收实验的操作。

顺序内容操作标准分值得分

用力勿

用物是否齐全，摆放科学，合理合格3

评评估

估自我

着装是否整齐3

20评估

分知识说出回收实验的基本原理6

评估说出回收率和加入浓度的计算方法8

（以二乙酰法测BUN为例）水浴箱（100℃）、721

用物型分光光度计、混合血清（①②③）、

4

考评方案准备BUN标准液（100mm。I/L、200mmol/L、

与标准7.14mmol/L）等

操环境

实验室整洁、安静、安全2

作准备

步

以二1.样本处理：

a混合血清2ml+HzOO.1ml(R)

骤乙酰

b混合血清2mI+BUN标(200mm。I/L)0.1ml

60一月亍

(R+SO

分法测

c混合血清2ml+BUN标(100mmol/L)0.1ml15

尿素(R+SD

氮为2.测定：

例加入物

（ml）RR+S,R+S2

R血清0.02-

R+Si血清—0.02

R+Ss血清——0.02

BUN标准一一

蒸储水一一

酸性试剂4.04.04.0

二乙酰一肪0.50.50.5

混匀,置100℃12min,取出待冷比色（入=540nm）,

取各管A值计算。

—

计算回收率=一均~-r-——xlOO%12

100x—

2.0+0.1

结果能正确进行回收实验操作10

判断回收率的计算结果准确15

实脸整理用物2

台正确处理所用物品2

整理实验台恢复整洁2

操作

步滕正确，动作规范、操作熟练3

方法

评操作

能正确进行回收实验操作，准确计算回收率5

价效果

20操作具有一定生物安全防范意识，能正确处理使用过的

4

分态度物品

操作

时间30min8

时间

总分100

学生应提

1.实训总结

交资料清