丙泊酚对离体大鼠缺血再灌注心肌内质网应激凋亡途径的影响及PI3KAkt信号通路的作用

丙泊酚对离体大鼠缺血再灌注心肌内质网应激凋亡途径的影响及PI3K/Akt信号通路的作用目的：观察丙泊酚(Propofol)对离体大鼠心肌缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤的保护作用，并探讨丙泊酚对缺血再灌注心肌内质网应激细胞凋亡途径的影响以及对PI3K/Akt信号通路的作用。方法：健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只，使用随机数字表法分为5组（n=8）：对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、丙泊酚组（P组）、丙泊酚+Wortmannin组（P+Wort组）、Wortmannin组（Wort组）。建立全心缺血30min，再灌注120min的Langendorff大鼠离体心脏全心缺血再灌模型。（1）对照组（C组）：Krebs-Henseleit（K-H）液持续灌注180min；（2）缺血再灌注组（I/R组）：K-H液灌注30min，全心停灌30min，再灌注120min；（3）丙泊酚组（P组）：平衡灌注20min后，含50μmol/L丙泊酚K-H液灌注10min，全心停灌30min，丙泊酚K-H液灌注20min，K-H液再灌注100min；(4)丙泊酚+Wortmannin组（P+Wort组）：缺血前后予含50μmol/L丙泊酚+100nmol/LWortmannin的K-H液灌注，余步骤同P组；（5）Wortmannin组（Wort组）：缺血前后予含100nmol/LWortmannin的K-H液灌注，余步骤同P组。于缺血前、再灌注120min时，分别测定各组左室心功能指标：左心室舒张末压力(Leftventricularend-diastolicpressure，LVEDP)、左室压力最大变化上升和下降速率(Maximumratesofleftventricularpressuredevelopmentanddecay，±dp/dtmax)；酶联免疫吸附试验（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）测定冠脉流出液中肌钙蛋白I（CardiactroponinI，cTnI）浓度；TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数；免疫组化法检测心肌组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/C/EBPhomologousprotein,chop)的表达；Westernblot测定心肌组织Akt、p-Akt蛋白的表达。结果：1丙泊酚对离体缺血再灌注大鼠心脏左室心功能指标的影响与I/R组比较，P组LVEDP降低，+dp/dtmax明显升高（P＜0.05），提示丙泊酚改善了再灌注心脏的心功能；与P组比较，Wortmannin部分阻断了丙泊酚改善缺血后心脏心功能的作用（P＜0.05）。2丙泊酚对cTnI浓度的影响与I/R组比较，P组cTnI浓度显著减少（P<0.05）；与P组比较，Wortmannin部分阻断了丙泊酚心肌保护的作用（P＜0.05）。3丙泊酚对心肌细胞凋亡的影响与I/R组比较，P组心肌凋亡指数显著减少（P<0.05）；与P组比较，Wortmannin部分阻断了丙泊酚减少细胞凋亡的作用（P＜0.05）。4丙泊酚对心肌组织caspase-12、chop的表达的影响与I/R组相比，P组caspase-12、chop表达显著减少（P<0.05）；与P组比较，Wortmannin部分阻断了丙泊酚抑制了内质网细胞凋亡途径的作用（P＜0.05）。5丙泊酚对心肌组织Akt、p-Akt蛋白表达的影响各组总Akt的相对表达量之间差异无统计学意义(P＞0.05),与I/R组相比，P组Akt的磷酸化水平显著升高（P＜0.05）；与P组相比，P+Wort组Wortmannin阻断了Akt的磷酸化（P＜0.05）；I/R组、P+Wort组、Wort组之间比较差异无统计学意