冬虫夏草的人工栽培程序

冬虫夏草的人工栽培程序1.菌种感染虫草的必须是有性生殖孢子，即子囊孢子；虫草菌的分离方法有组织分离法、稀释分离法等。稀释分离法适用于虫草子囊孢子的分离，可进行单孢分离。组织分离法最常用。虫草菌种分离培养基为：蛋白胨10克，葡萄糖100克，酵母膏1克，硫酸镁O.5克，磷酸二氢钾1克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升，维生素液20毫升。维生素液配制方法为：盐酸硫胺素100毫克，核黄素25毫克，吡哆醇25毫克，泛酸钙100毫克，对氨基苯甲酸25毫克，氯化胆碱100毫克，肌醇100毫克，烟酰胺100毫克，叶酸2.5毫克，生物素1毫克，蒸馏水500毫升，过滤灭菌后，取一定体积加入已灭过菌的培养基。组织分离方法为：取虫草尚未成熟且颜色正常的子座或具有外膜包裹的菌核，表面消毒后，在无菌条件下切去外层，再切取内部白色组织l毫米左右大小，压碎后将碎粒涂于培养基表面，20C培养，一般4个月后可得到母种。冬虫夏草子囊抱子悬浮液制备：用无菌的不易透水的纸制小口袋，套于天然生长或人工栽培的尚未成熟的虫草子座上，待子座成熟，子囊孢子弹射附着于纸袋内壁上。取附有子囊孢子的纸袋100个，浸于1:10的土壤浸液中（取土样1000克，以采集到虫草的土壤为好，加水1000毫升，高压蒸气121°C灭菌30分钟，冷却后双层滤纸过滤，滤液酸碱度调至pH6.0）,2小时后用小刀仔细把子囊孢子从小袋上刮出，收集于离心管中，1000转/分离心10分钟，弃去上清液，用无菌土壤浸出液离心洗涤5次，沉淀悬浮于土壤浸出液中，即为虫草子囊孢子悬浮液。将冬虫夏草菌种接种到含有葡萄糖（10克）、蛋白胨（10克）、含脂蚕蛹（10克）、全脂奶粉（10克）、磷酸二氢钠（1.5克）、磷酸二氢钾（1.5克）、琼脂（20克）和蒸馏水（1000毫升）的培养基上，26C培养3天即可长出白色绒状菌丝体。冬虫夏草菌丝体在这种培养基上生长良好。.蝙蝠蛾4-5龄幼虫感染率最高，老熟幼虫和3龄以下幼虫不被感染。幼虫蜕皮和活动进食增加感染的机会，幼虫体内的微量元素、氨基酸组成对虫草菌的侵染有影响。冬虫夏草寄主蝙蝠蛾幼虫为乳黄色，头壳红紫色，一般生长在海拔4000米左右的高山草甸地带。这里气候多变，常有雨雪，气温在0-23C,20厘米深处的地温为5-75C，空气相对湿度为50%-70%,土壤含水量40%-60%。蝙蝠蛾幼虫多分布于阳光充足、排水良好、环境潮湿的地势和地貌上。1年中的7-9月土壤中都可找到该虫，一般在土壤10厘米以下深处越冬。蝙蝠蛾整个生活史中，幼虫期最长，至少经历2年时间才能化蛹。扁辐蛾幼虫主要取食莎草料篙草属植物和蓼科珠芽蓼、头花蓼、小大黄，以及豆科黄茋属植物和蔷薇科金腊梅等。饲养虫草昆虫可在野外饲养，也可在人工饲养室进行。可在自然或人工条件下栽培幼虫喜食的珠芽蓼等植物，也可用配合饲料来饲养。.野外栽培先制备虫草菌子囊孢子悬浮液，用微型喷雾装置把子囊孢子喷散到虫草蝙蝠蛾幼虫主体上。为了获得较大的感染机会，还要在幼虫的食物中混入虫草菌菌丝体。一般可通过虫体壳颜色的变化来判断幼虫是否已感染。幼虫感染几天后，主体的外壳会出现很明显的褪色现象，由深褐色转为淡黄色；已感染虫草菌的幼虫，动作逐渐迟缓，最终死亡僵化。将已接种的幼虫放置到幼虫自然生存环境中，让虫草菌利用虫体内营养生长繁殖，长出子座，第2年夏天人工采集己长出子座的主体，即冬虫夏草。.室内栽培室内设立多层木架立体栽培，每层用10-15厘米宽的木板在架的四周框住，并铺上7厘米厚的砂土，砂土湿度保持在40%左右。将虫草菌子囊孢子悬浮液适当稀释，再将适龄幼虫置于木架砂土层上，用喷雾器将子囊孢子悬液均匀喷散在虫体上，用树叶遮盖。然后用孢子悬液喷洒树叶，每天喷2次，连续喷2天。喷洒时间选择傍晚、阴天效果更好。开始7天每天检查，观察幼虫是否入土，并观察幼虫是否已被感染。至收获季节（6-7月），翻开遮荫物，采集已露出砂土面的子座和虫体。5.瓶式栽栽容器为广口瓶。培养料为菜园土加15%的泥土，或黄泥土加10%的泥砂。培养料的pH为6-7。将培养料充分拌均后装瓶，不要装得太紧，广口瓶装至瓶肩。装完后集中在一起，放到荫蔽的地方，用树叶遮盖每个容器口。将适龄幼虫集中接种，接种过的幼虫放入容器内，开始7天每天检查，观察幼虫是否入土，是否已被感染，防止幼虫爬出瓶外。到夏季7-8月扒开泥土，采集已长出子座的冬虫夏草。6.无虫栽培不采用虫体，可用下述培养料栽培：麸皮75%，米糠10%,蔗糖2%,维生素0.1%，蚕蛹粉5%,尿素0.1%，木屑6%,硫酸镁1%,料水比1:1.2-1.3,pH5-6;蛋白胨1%,葡萄糖10%,酵母膏0.1%，