凯氏定氮仪指南

凯氏定氮操作指导凯氏定氮的操作分为消化和定氮两步：一、 消化用微分天平准确称取一定质量的样品，置于消化管底部。对于固体或是半固体等可用称量纸称量的样品，可将称量纸置于消化管中（称量纸不含氮，不会影响结果）。每个样品2—3个平行。设置2—3个空白实验（不加样品）。注：因操作不当残留在管壁上的样品，在加入硫酸的时候需用硫酸将其冲入消化管底部，否则将造成测定结果偏低。加入0.3克的催化剂。加入一定量的浓H2SO4，在通风橱中操作，盖上小漏斗。举例，蛋白质含量20%左右的干酪0.6g所加浓H2SO4量为5ml。注：浓h2so4的添加量要考虑样品组成对消耗酸量的影响。酸量小，样品消化不完全，测定结果偏低；酸量大，定氮过程中与碱中和后酸过量，游离氨不能被蒸馏出来，严重影响测定结果。开始消化过程：在220。。预消化1h，然后将温度升高到400OC下进行消化全溶液澄清。注：a.预消化的目的是让样品和硫酸先缓慢的反应。不预消化，浓硫酸将和样品在高温下剧烈反应，造成炭化，测定结果将偏低；炭化造成的颗粒还将会在排废过程中堵塞管路，造成仪器不能正常工作；b.消化管中液体冷却后不返黄为消化终点，否则需继续消化。二、 定氮用蒸馏水将小漏斗的内壁润一下，使吸附在内壁上的液体进入消化管中，以备定氮所需。但是，蒸馏水用量不能过大，否则蒸馏水中的氮会对结果产生影响。检查蒸馏水、碱液、指示剂的量，保证各个溶液能够满足实验所需。碱液配制：碱液的浓度为33%—35%，一瓶未开封的NaOH（500g）加入1L水；注：NaOH溶液在配制时会释放大量的热，应在通风橱中操作。用大塑料杯子配制，先在杯子中加入水，将杯子放入冷水浴中，边搅拌边加入NaOH固体。待冷却之后，再倒入塑料桶中。酸液配制：根据称取样品质量，确定所配酸液的浓度，确保定氮所用酸量在15—25ml。举例，蛋白质含量20%左右的干酪0.6g所需HCl浓度为0.1mol/L。0.1mol/L的HCl溶液配制：9.0ml浓盐酸，稀释到1L。0.1mol/L的HCl溶液标定：三角瓶中加入0.1g左右Na2CO3（微分天平称量，准确记录读数），加入50ml蒸馏水，用配制的HCl溶液滴定。根据滴定体积，计算HCl准确浓度（精确到小数点后第四位）。将冷却水开关打开。进入到凯氏定氮仪界面，显示“R”。先按手动操作，再按手动选择，出现的参数分别代表：HB：硼酸； HA：碱；HD：蒸馏水；HT：酸液；HE：废液6.换酸操作：将白色的管子拧下来，将其中的HCl倒掉后再装上；注：拧管子的时候要注意，不能将管子拧得太紧或是太松，太松容易漏液对仪器造成污染，太紧则不容易下次操作。要掌握好力度。按手动选择，选择“HT”，按手动操作，让新换的酸液在管中润洗两次。开始定氮操作，按手动选择，选择“AUTO”，按参数设置，出现的参数分别代表：No：样品号； M：滴定所用酸浓度； K：1.0000（常数，不用设置）；A：加碱液时间； C：定氮系数（奶制品设置为6.38,蛋制品设置为6.25）；W：样品质量； V0：空白滴定体积（三次空白实验消耗酸液的平均值）；注：加碱液时间，空白实验不用设置，样品组设为4s或5s，需保证加碱正常或过量。正常时为土黄色，过量时为蓝色。，首先进行空管实验，参数设置完成后，按自动测定。一般一次定氮实验的时间为4—5min。完成后，打开盖，带着厚手套，将其中的液体倒入废液缸中。空管实验是为了检测仪器的稳定程度。当前后3次滴定酸值稳定时，可认为仪器稳定。仪器稳定后，开始空白管实验，更改参数后，拉下盖子即开始滴定实验。空白实验是为了排除加入试剂的干扰。定氮结束后，记录所用酸值。并将三次空白实验的滴定酸值取平均，作为空白滴定体积v0。样品溶液的凯氏定氮，方法依旧。实验结束后，关上开关，关掉冷却水，并将废液缸中的液体倒入厕所。三、含氮量计算含氮量计算公式：N(%)=1.401xMx(V