高二生物动物细胞工程5

2.2动物细胞工程单克隆抗体等

动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。为什么要进行动物细胞培养?1.动物细胞培养如何进行细胞培养?2.2.1动物细胞培养和核移植技术

从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。1.1概念1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞50细胞剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、分离原代培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越强，越容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞增殖缓慢，核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。贴壁生长接触抑制10代以内，保持正常二倍体核型传代培养细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系原代培养和传代培养、细胞株和细胞系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖

多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？

2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？

讨论充足营养适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境1.3动物细胞培养的条件（无菌处理和添加抗生素、更换培养液）与体内相同。合成培养基：糖、氨基酸、促生长因子（血清、血浆）、无机盐、微量元素等（36~37℃、7.2~7.4）（O2、CO2--维持培养液PH）植物组织培养和动物细胞培养

的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白1.4动物细胞培养技术的应用2.动物细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）分类胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易

细胞分化程度高，恢复全能性不容易2.1动物细胞核移植概念：2.2体细胞核移植的过程：思考：1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？MⅡ中期卵母细胞诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。讨论：1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？

为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。

培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。2.3体细胞核移植技术的应用前景：1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程2、保护濒危物种3、医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植4、了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病2.4体细胞核移植技术存在的问题：思考与探究2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。3.1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4t。（1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由。可以。卢辛达的产奶量很高，有高产奶的遗传基础，利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础，如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广，克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的后代，从而加快奶牛改良进程。该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多，尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群出现近亲繁殖而引起种质衰退。（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进行克隆？从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。4.体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么问题？请你查阅资料，了解这方面的前沿动态。研究方面：克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。应用上：生产克隆动物费用昂贵，距大规模应用还有一定距离。；/item.htm?id=535464336197群控手机架mqu91hno碎碎的姜末。八月十五一大早，郭氏就兴致勃勃地吩咐两个女儿去镇上张家肉铺割五斤现宰羊肉、各样儿的鲜菜、鲜瓜和鲜果子、特大的团月饼、六斤普通的小月饼和二斤豆腐干儿。看看鸡蛋还有不少，就没有吩咐再买。耿英不解，说：“鲜菜、鲜瓜和鲜果子就不要买了哇，俺大娘和婶儿不是每年的八月十五都会给咱们送来不少嘛！”耿兰也说：“就是哇娘，这些东西就不要买了。要不咱们买了，待会儿秀儿姐和妞儿姐她们又给送来不少……”郭氏打断耿兰的话，只管高兴地说：“要买，要买，娘想买，咱们今儿个都吃自己买的。待会儿秀儿和妞儿送来多少也不打紧哇，咱家这么多人，还愁吃不了！”看到娘这么高兴，姐儿俩也就不再说什么了，只管按照娘的吩咐采购一通。她们把大多数的东西置买好后，用两个好大的竹篮子装了，“吭哧吭哧”挎了回来，把五斤新鲜羊肉、二斤豆腐干儿和所有的月饼放在堂屋的桌子上，各样儿的鲜菜晾开了摆放在檐台上，鲜瓜鲜果子放在堂屋一边的地上。西瓜带不上了，姐儿俩又专门跑了一趟，用扁担和大箩筐合抬回来放在檐台上。匆匆吃过早饭以后，耿老爹问郭氏：“咱俩把八仙桌搬过来哇？中午吃饭需要呢！”郭氏说：“不光是吃饭需要哇，俺这收拾准备的，一个桌子也是放不开的呢！”于是，俩人去南房里将八仙桌搬出来放在堂屋前，耿老爹亲自帮妻子擦洗干净了，俩人再抬起来搁兑着慢慢搬进来，再和堂屋里原先放的那张桌子并起来放好。郭氏高兴地对丈夫说：“没有你的事儿了，去看你的那些宝贝们去哇！”耿老爹笑一笑，像往常一样又下地看他的水稻去了。为了防止被家雀啄食，耿老爹让妻子和小女儿帮忙，在稻田的周围扎了好多草人进行守护。这些草人都穿了衣服，戴了草帽，手里举着长长的小旗儿。风一吹，还真能吓唬走那些偷食者们呢！耿正和耿直则一心只记挂着学堂和戏台那边的事情，自然不关心娘和姐姐妹妹的都在准备些什么过节的东西，只是按照娘的吩咐，早在几天前就开始往家里捎带高脚凳子了。到现在，搁在东西两屋檐台上的高脚凳子，已经足够三大家子的人坐了。那日早饭后，这兄弟俩还和往常一样，放下饭碗后，就一起出门往小学堂和大戏台那边的工地上去了。且说留在家里的这娘儿