丙泊酚对卵巢早衰小鼠学习记忆的影响及其机制

丙泊酚对卵巢早衰小鼠学习记忆的影响及其机制目的:比较顺铂及卵巢切除法诱导小鼠卵巢功能早衰模型及其对小鼠学习记忆功能的影响,寻找适合本研究的卵巢早衰模型;研究丙泊酚对卵巢早衰小鼠学习记忆的影响及其可能的分子机制。方法:1、雌性6～8周ICR小鼠随机分成四组:空白对照组,顺铂模型组,假手术组和卵巢切除模型组。观察四组小鼠一般情况、动情周期;称量空白对照组和顺铂模型组小鼠的卵巢、子宫湿重;采用HE染色观察顺铂造模后卵巢及子宫的病理改变;采用ELISA检测小鼠血清中FSH、LH、P及E2的水平;采用避暗实验检测小鼠的学习记忆行为。2、雌性6～8周ICR小鼠随机分成六组:假手术对照组(sham-operated)、50mg/kg丙泊酚组(Pro50)、250mg/kg丙泊酚组(Pro250)、卵巢切除模型对照组(OVX)、50mg/kg丙泊酚应用于卵巢切除模型组(Pro50+OVX)、250mg/kg丙泊酚应用于卵巢切除模型组(Pro250+OVX)。观察小鼠一般情况;采用避暗实验检测小鼠的学习记忆行为;采用westernblot及免疫组化检测给药lh及24h后海马中GSK-3β、p-GSK-3β-Ser9、CREB、p-CREB-Ser133及caspase-3的水平;采用尼氏染色观察海马神经元的损伤情况。结果:1、顺铂模型组:与空白对照组比较,顺铂模型组小鼠体重明显减轻(P<0.01),行动缓慢,整体状态较差,动情间期持续或延长;卵巢、子宫湿重明显减轻(P<0.01),顺铂造模后卵巢及子宫病理改变明显;避暗潜伏期显著缩短(P<0.01),错误次数显著增加(P<0.01);血清FSH、LH和E2浓度均无显著改变(P>0.05),P浓度显著降低(P<0.01)。卵巢切除模型组:与假手术组比较,卵巢切除模型组小鼠体重无明显变化(P>0.05),动情周期停滞于动情间期;避暗潜伏期显著缩短(P<0.01),错误次数无显著性差异(P>0.05);血清FSH和LH的浓度显著升高(P<0.01),P和E2的浓度显著降低(P<0.01)。2、各小鼠在丙泊酚给药前后及组间自主活动均无显著差异(P>0.05);与sham-operated组相比,Pro50、Pro250及OVX组避暗潜伏期显著缩短(P<0.0001),Pro50+OVX组较OVX组潜伏期显著延长(P<0.0001)。3、给药后lh:不同剂量丙泊酚均会导致正常成年小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表达下调、caspase-3表达上调,亚麻醉剂量的丙泊酚会使得卵巢切除小鼠p-GSK-3p-Ser9表达上调;给药后24h:不同剂量丙泊酚均会导致正常成年小鼠caspase-3表达上调,亚麻醉剂量的丙泊酚会使得卵巢切除小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表达上调、caspase-3表达下调;与Sham-operated组相比,Pro50、Pro250、OVX及Pro250+OVX组小鼠海马区可见神经细胞部分缺失,细胞轮廓模糊且排列紊乱,神经元胞浆内尼氏体减少,神经元数量减少;Pro50+OVX组仅偶可见细胞形态异常,神经元受损较OVX组有明显改善。结论:1、小鼠卵巢切除模型能够更好地模拟小鼠卵巢早衰的症状,且对全身系统及学习记忆的影响较顺铂模型组小;2、丙泊酚剂量依赖性的损伤正常成年雌性小鼠的记忆巩固功能;亚麻醉剂量的丙泊酚可以改善卵巢切除小鼠的记忆巩固功能。3、丙泊酚可以降低假手术小鼠海马区p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133的水平,影响小鼠的记忆巩固功能;丙泊酚可以升高假手术小鼠海马区caspase-3的水平,加重海马区神经元的损伤;亚麻醉剂量的丙泊酚可以升高卵巢切除小鼠海马区p-GSK