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文档简介
广东省“十二校”2024届高三压轴卷生物试卷请考生注意:1.请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上,请用0.5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2.答题前,认真阅读答题纸上的《注意事项》,按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.近年来的研究初步表明,βAP(β淀粉样蛋白)沉积是Alzheimer型老年痴呆的主要病因。βAP是由其前体蛋白APP(一种含695个氨基酸的跨膜蛋白)在病理状态下异常加工而成的。APP形成βAP的过程如图所示。根据上述信息所做的推论错误的是()A.用双缩脲试剂检测βAP,有紫色反应B.βAP的效果可能是引起大脑功能异常C.一个βAP分子中至少含有39个肽键D.β分泌酶很可能是突变基因表达的产物2.动作电位是可兴奋组织或细胞受到足够强刺激时,在静息电位基础上发生的快速、可逆转、可传播的细胞膜两侧的电位变化。如图所示为刺激强度与膜电位变化之间的关系。下列相关叙述正确的是()A.神经细胞受到刺激时,刺激位点就会出现大量钠离子内流现象B.图中曲线峰值表示动作电位,该峰值大小与刺激强度呈正相关C.动作电位恢复到静息电位时,膜外电位由负电位转变成正电位D.神经细胞兴奋部位的Na+内流需要消耗能量3.下列关于免疫调节的叙述,正确的是()A.抗体能通过胞吞方式进入细胞消灭寄生在其中的麻风杆菌B.人一旦感染HIV就会导致体内T细胞数量大量减少C.B细胞和T细胞分别是在胸腺和骨髓中由造血干细胞分裂分化产生的D.体液免疫和细胞免疫的二次免疫应答都与记忆细胞的迅速增殖有关4.将某一植株放在密闭玻璃罩内,置于室外一昼夜,获得实验结果如图所示。下列有关说法错误的是()A.图一中BC段较AB段CO2浓度增加减慢,是因为低温使植物呼吸作用减弱B.两图中分别出现FG段与ef段的变化,原因是部分气孔关闭,叶片吸收CO2的量减少C.图二中gh段时氧气含量增加,且到达i点时,该植株积累的有机物最多D.上图所示的结果表明,该植株经过这一昼夜之后,植物体中有机物含量有所增加5.下列有关科学史的叙述正确的是()A.欧文顿提出:生物膜是由脂质和蛋白质组成的B.斯他林和贝利斯通过实验证明小肠黏膜产生促胰液素并进入血液,随血液到达胰腺,引起胰液的分泌C.卡尔文等用蓝藻做实验,探明了CO2中碳在光合作用中转换成有机物中碳的途径D.孟德尔用豌豆做实验发现了两大遗传定律,提出性状是由基因控制的6.为研究酵母菌的发酵产物,某研究小组设计了如下图甲所示的装置,并将有关检测结果绘制成图乙。①号、②号试管中均加入3ml蒸馏水和一定量的检验试剂。据图分析下列说法正确的是()A.发酵产物酒精在①号试管中B.设②号试管对照组是为了排除无关变量温度对实验的干扰C.图乙曲线b表示①号试管内玻璃管口气泡释放速率变化D.图乙曲线a表示酵母菌培养液中酵母菌数量变化规律7.下列反应在细胞质基质和线粒体内均能完成的是()A.葡萄糖→丙酮酸 B.丙酮酸→酒精+CO2C.ADP+Pi+能量→ATP D.H2O→H++O28.(10分)科研人员采用错时添加或除去DNA合成抑制剂的方法,制备了均处于G1/S临界处的洋葱根尖分生组织细胞群,现将上述细胞群转移至正常培养液中继续分裂,下列叙述正确的是()A.转移至正常培养液后,细胞首先进行的是合成DNA所需蛋白质的合成B.由于间期长于分裂期,适当时间后制片观察,可发现间期细胞占绝大多数C.在中期,显微镜下能观察到该细胞的染色体组型图D.在末期,分离的两套染色体的距离相比后期进一步加大二、非选择题9.(10分)某动物的毛色有白色。棕色和黄色三种,现用黄色个体和白色个体杂交,子代F1为棕色个体和黄色个体。现欲研究该动物毛色的遗传规律,不同实验小组提出了不同观点:观点一:该动物毛色由一组复等位基因(同源染色体上的相同位置上存在两种以上的等位基因)控制,其中E1、E2、E3分别控制黄色、棕色、白色;观点二:该动物毛色由两对等位基因(A/a、B/b)控制,显性基因同时存在时表现为黄色,无显性基因时表现为白色,其余情况表现为棕色。请回答下列问题:(1)若观点一正确,则亲本黄色个体和F1棕色个体的基因型分别为__________________,且让F1中的棕色个体与F1中的黄色个体进行杂交,子代的表现型及比例为_____________________________。(2)若该动物毛色的遗传规律符合观点二,能否确定A/a、B/b基因的遗传遵循自由组合定律?若能确定,请说明理由,并从F1中选择材料设计实验进行辅证;若不能确定,请说明理由,并从F1中选择材料设计实验探究这两对等位基因的遗传是否遵循自由组合定律。(要求写出实验思路和实验结果及结论)_____(填能或不能)确定,理由是_______________________________。实验思路:______________________________________________。实验结果及结论:_____________________________________________。10.(14分)某家系中有甲、乙两种单基因遗传病(如下图),其中一种是伴性遗传病。请回答下列问题:(1)甲病的遗传方式为____________,乙病遗传特点有____________。(2)Ⅱ-3的致病基因来自于____________。(3)Ⅱ-2有____________种基因型,Ⅲ一8基因型有____________种可能(4)若Ⅲ一4与Ⅲ一5结婚,生育一患甲、乙两种病孩子的概率是____________,生育只患甲病孩子的概率是____________,生育不患甲病孩子的概率是____________。11.(14分)斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达,研究人员构建了HuC基因的表达载体,并导入到斑马鱼细胞中研究其作用,请回答:(1)为获取HuC基因,研究人员从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA,通过_________获得大量的DNA,进而构建出HuC基因的______________。(2)DraⅢ,SnaBⅠ等是质粒上不同限制酶的切割位点。为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体,需要对HuC基因和质粒选用图中的____________酶进行切割,这样做的原因是_________。不选择NotⅠ酶切割的原因是_____________。(3)用Ca2+处理大肠杆菌,大肠杆菌细胞即能够______________。实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察________________________或者在培养基中添加______________,筛选出导入表达载体的大肠杆菌。12.研究发现,牛的瘤胃中含有多种纤维素分解菌,这些纤维素分解菌可用于分解秸秆等废弃物。某科研小组按以下实验流程分离获取了牛瘤胃中的纤维素酶高产菌株。(1)纤维素酶是由多种酶组成的复合酶,其中能催化纤维二糖水解的是________。纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_______进行定量测定。(2)步骤A是_____________,可以通过此步骤增加______________________。(3)科研小组的某个同学将瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养液中,调节pH及温度至适宜条件,并持续通入无菌空气,结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌种,原因是_________。(4)按照修正后的实验方法,研究人员在刚果红培养基平板上,筛选到了几株有透明圈的菌落(如图)。图中透明圈的大小与纤维素酶的________有关;图中降解纤维素能力最强的菌株是____________。(5)现利用稀释涂布平板法测定该目的菌的数量,在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1ml样品溶液,菌落数分别为156、178、486、191,通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌1.75×108个,则稀释倍数是________________。
参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解题分析】
根据题意,β-AP(p-淀粉样蛋白)的化学本质是蛋白质,用双缩脲试剂检测成紫色,A正确;“β-AP(p-淀粉样蛋白)沉积是Alzheimer型老年痴呆的主要病理征”,则β-AP的作用效果可能是引起大脑功能异常,B正确;据图分析,β-AP分子中氨基酸=695-596-(695-635)=39,则肽键数=氨基酸数-肽链数=38个,C错误;β-AP的过程需在β-分泌酶和γ-分泌酶的作用下将APP分解,正常的机体发生病变,很可能是基因突变的结果,D正确;故选C。2、C【解题分析】
静息时,神经纤维膜动物为外正内负,兴奋时膜电位为外负内正,兴奋在神经纤维上的传导是双向的。从图中看出只有当刺激强度达到S5时,才产生了动作电位,并且刺激强度增大,动作电位的值没有发生改变。【题目详解】A、从图中看出,必须刺激达到一定的强度才出现动作电位,因此可以推测必须刺激达到一定的强度才会出现大量钠离子内流现象,A错误;B、从图中看出刺激强度增大,动作电位的值没有发生改变,B错误;C、动作电位是外负内正,静息电位是外正内负,所以动作电位恢复到静息电位时,膜外电位由负电位转变成正电位,C正确;D、细胞外Na+浓度大于细胞内,所以神经细胞兴奋部位的Na+内流不消耗能量,D错误。故选C。【题目点拨】本题考查了神经调节的相关知识,掌握兴奋在神经纤维上传导的原理,分析图中动作电位的产生和刺激强度的关系,是解题的关键。3、D【解题分析】
人体的防卫功能(三道防线):
第一道防线是由皮肤和黏膜构成的,他们不仅能够阻挡病原体侵入人体,而且它们的分泌物(如乳酸、脂肪酸、胃酸和酶等)还有杀菌的作用。
第二道防线是体液中的杀菌物质——溶菌酶和吞噬细胞。第三道防线主要由免疫器官(扁桃体、淋巴结、胸腺、骨髓、和脾脏等)和免疫细胞(淋巴细胞、吞噬细胞等)借助血液循环和淋巴循环而组成的。【题目详解】A、有一些致病细菌如麻风杆菌、结核杆菌等,是寄生在宿主细胞内的,而抗体不能进入宿主细胞,消灭这些病原体要靠细胞免疫,A错误;B、HIV最初侵入人体时,免疫系统可以摧毁大多数病毒,在一定时间内T细胞数量会增加,大约一年后,HIV浓度增加,T细胞数量减少,并伴随一些症状出现如淋巴结肿大等,B错误;C、B细胞和T细胞都在骨髓中产生,前者在骨髓成熟,后者在胸腺中发育成熟,C错误;D、体液免疫和细胞免疫的二次免疫应答都是在特定抗原的刺激下,记忆细胞迅速增殖分化,形成大量的浆细胞或效应T细胞并起作用,D正确。故选D。【题目点拨】抗体在内环境中起作用,不能进入细胞内发挥作用。4、C【解题分析】
分析图解:图一中,玻璃罩内二氧化碳浓度上升表示呼吸作用大于光合作用或光合作用为0;二氧化碳浓度下降时,表示光合作用大于呼吸作用;D点时玻璃钟罩内CO2浓度最高,此时净光合速率为0;H点玻璃钟罩内CO2浓度最低,此时净光合速率也为0。图二中,纵坐标表示植物吸收或释放CO2的速率,d、h两点植物光合速率为0;f点时可能由于光照过强导致气孔关闭,二氧化碳吸收减少,导致光合作用强度下降。【题目详解】图一中的B点为凌晨,此时植物只进行呼吸作用,凌晨气温下降,植物呼吸作用减弱,因此BC段较AB段CO2浓度增加减慢的原因是低温使呼吸作用减弱,A正确;图一中,FG段CO2下降明显减慢,说明净光合速率下降,与图二中ef段(中午的时间段)出现下降的可能原因都是部分气孔关闭,叶片吸收CO2的量减少,B正确;图二中gh段时虽然光照强度减弱,但植物的净光合速率大于0,氧气含量增加,且到达h点(植物光合速率=呼吸速率)时,该植株积累的有机物最多,C错误;图甲中比较A点和I点,I点的二氧化碳浓度低于A点,说明一昼夜二氧化碳净吸收用于合成有机物,因此植物体的有机物含量会增加,D正确。【题目点拨】注意抓住两条曲线中的关键点含义:一是图一中D、H两点的含义都是净光合速率=0,二是图二中dh两点的含义也是净光合速率=0;其次要注意两曲线中出现FG段和efg段原因相同,都是部分气孔关闭,叶片吸收CO2的量减少,净光合速率下降所致。5、B【解题分析】
19世纪末,欧文顿对细胞膜结构的研究结论是:膜是由脂质构成的。1925年,两位荷兰科学家用丙酮从人的红细胞中提取脂质,在空气-水界面上铺成单分子层,测得单分子层的面积恰为红细胞表面积的2倍,由此得出结论:细胞膜中的脂质分子必然排列为连续的两层。1959年,罗伯特森利用电镜观察细胞膜的结构提出:所有的生物膜都是由蛋白质-脂质-蛋白质三层结构构成,他把生物膜描述为静态的统一结构。1972年桑格和尼克森提出了膜的流动镶嵌模型。【题目详解】A、欧文顿提出:生物膜是由脂质组成的,A错误;B、斯他林和贝利斯的实验证明了胰液的分泌不受神经调节控制,而是在盐酸的作用下,小肠黏膜产生了一种化学物质(促胰液素)进入血液后,随血流到达胰腺,引起胰液分泌的化学调节,B正确;C、卡尔文等用小球藻做实验,探明了CO2中碳在光合作用中转换成有机物中碳的途径,C错误;D、孟德尔用豌豆做实验发现了两大遗传定律,提出性状是由遗传因子控制的,D错误。故选B。6、C【解题分析】
1.甲装置若有酒精生成的话,也应该在含酵母菌的葡萄糖溶液中,不在①中。2.①、②号试管中加入的是澄清的石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液,②试管的设置是为了排除空气中二氧化碳的干扰。3.随着培养时间的延长,由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累等因素,导致酵母菌的数量先增加后减少,①号试管内玻璃管口的气泡释放速率先增加后下降。【题目详解】A、根据以上分析可知,酒精不存在于①号试管中,酒精应该在应该在含酵母菌的葡萄糖溶液中,A错误;B、①②号试管中加入的是澄清的石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液,②试管的设置是为了排除空气中二氧化碳的干扰,B错误;C、随着培养时间的延长,由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累等因素,导致酵母菌的数量先增加后减少,①号试管内玻璃管口的气泡释放速率先增加后下降,曲线b符合该变化,C正确;D、随着培养时间的延长,由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累等因素,导致酵母菌的数量先增加后减少,曲线a不符合该变化,D错误。故选C。7、C【解题分析】
有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜.有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H],合成少量ATP;第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H],合成少量ATP;第三阶段是氧气和[H]反应生成水,合成大量ATP。无氧呼吸的场所是细胞质基质,无氧呼吸的第一阶段和有氧呼吸的第一阶段相同.无氧呼吸由于不同生物体中相关的酶不同,在植物细胞和酵母菌中产生酒精和二氧化碳,在动物细胞和乳酸菌中产生乳酸。【题目详解】A、葡萄糖→丙酮酸是有氧呼吸和无氧呼吸的第一阶段,场所是细胞质基质,A错误;B、丙酮酸→酒精+CO2是无氧呼吸过程,场所是细胞质基质,B错误;C、在细胞质基质可以合成少量ATP,在线粒体内可以合成大量ATP,C正确;D、H2O→H++O2是光合作用的光反应阶段,场所是叶绿体的类囊体膜,D错误。故选C。【题目点拨】本题主要考查了学生对细胞呼吸类型和过程的理解.细胞呼吸过程是考查的重点和难点,可以通过流程图分析,表格比较,典型练习分析强化学生的理解.要注意,一般的植物细胞无氧呼吸产物是酒精和二氧化碳,但少数植物营养器官如马铃薯的块茎、玉米的胚、甜菜的块根进行无氧呼吸的产物是乳酸。8、D【解题分析】
DNA复制发生在S期,若用DNA合成抑制剂多次处理后,获得洋葱根尖分生组织细胞群将都处于G1/S临界处,若将该细胞群转移至正常培养液中继续分裂,则其将直接进入S其进行DNA的复制。【题目详解】A、转移至正常培养液后,细胞首先进入S期进行DNA的复制,而合成DNA所需蛋白质的合成发生在S期前面的G1期,A错误;B、由于这一细胞群是同步的,因此接下来任意时间去观察它们,都处于同一阶段,不会出现大多数细胞处于间期、少数细胞处于裂期的情况,B错误;C、在中期,显微镜下能观察到该细胞的染色体,但是不是染色体组型图,C错误;D、在末期,分离的两套染色体的距离相比后期进一步加大,D正确。故选D。二、非选择题9、E1E2、E2E3黄色∶棕色∶白色=2∶1∶1不能不论A/a、B/b基因的遗传是否遵循自由组合定律,都可满足题干所述杂交情况让F1中的黄色雌雄个体相互杂交,统计子代的表现型及比例(或让F1中的黄色个体与F1中的棕色个体相互杂交,统计子代的表现型及比例)若子代表现型为黄色∶棕色∶白色=9∶6∶1,则A/a、B/b基因的遗传遵循自由组合定律;若子代表现型及比例为黄色∶白色=3∶1,则A/a、B/b基因的遗传不遵循自由组合定律(或若子代表现型及比例为黄色∶棕色∶白色=3∶4∶1,则A/a、B/b基因的遗传遵循自由组合定律;若子代表现型及比例为黄色∶棕色∶白色=2∶1∶1,则A/a、B/b基因的遗传不遵循自由组合定律)【解题分析】
若观点一正确,E1、E2、E3分别控制黄色、棕色、白色,根据题目中的杂交信息,黄色个体和白色个体杂交,子代F1为棕色个体和黄色个体,子代等位基因重新组合后,白色性状消失,说明控制白色性状的E3基因显性最弱;亲本和子代中均存在黄色性状且亲本无棕色性状而子代出现棕色性状,说明黄色性状相对于棕色性状为显性。综上所术,E1、E2、E3的显隐关系为E1>E2>E3。若观点二正确,根据题目信息,A_B_为黄色,aaB_和A_bb为棕色,aabb为白色。【题目详解】(1)若观点一正确,E1、E2、E3分别控制黄色、棕色、白色,根据题目中的杂交信息,黄色个体和白色个体杂交,子代F1为棕色个体和黄色个体,在亲、子代中出现了三种表现型,说明亲本中存在E1、E2、E3三种基因,又因为黄色与白色杂交,子代等位基因重新组合后,白色性状消失,说明控制白色性状的E3基因显性最弱;亲本和子代中均存在黄色性状且亲本无棕色性状而子代出现棕色性状,说明黄色性状相对于棕色性状为显性。综上所术,E1、E2、E3的显隐关系为E1>E2>E3,亲本的基因型为E1E2(黄色)E3E3(白色),F1基因型为:E1E3(黄色)E2E3(棕色);让F1中的棕色个体与F1中的黄色个体进行杂交,子代基因型及比例为:E1E2∶E1E3∶E2E3∶E3E3=1∶1∶1∶1,因此子代的表现型及比例为:黄色∶棕色∶白色=2∶1∶1。(2)若该动物毛色的遗传规律符合观点二,根据题设条件可推测出亲本基因型组合为AABb×aabb或AaBB×aabb。当A/a、B/b基因位于同源染色体上或位于非同源染色体,都满足题干黄色和白色个体杂交,子代F1为棕色和黄色个体的要求,因此不能确定A/a、B/b基因的遗传遵循自由自由组合定律。若从F1中选择材料设计实验进行探究,可以选择让F1中的黄色(AaBb)个体相互杂交,统计子代的表现型及比例;也可以让F1中的黄色(AaBb)个体与F1中的棕色(aaBb或Aabb)个体相互杂交,统计子代的表现型及比例。但不能让F1中的棕色个体相互杂交,因为F1中的棕色个体相互杂交的结果无法用来判断A/a、B/b基因的遗传是否遵循自由自由组合定律。故实验结果及结论:让F1中的黄色雌雄个体相互杂交,若子代表现型为黄色∶棕色∶白色=9∶6∶1,则A/a、B/b基因的遗传遵循自由组合定律;若子代表现型及比例为黄色∶白色=3∶1,则A/a、B/b基因的遗传不遵循自由组合定律。(如果让F1中的黄色个体与F1中的棕色个体相互杂交,若子代表现型及比例为黄色∶棕色∶白色=3∶4∶1,则A/a、B/b基因的遗传遵循自由组合定律;若子代表现型及比例为黄色∶棕色∶白色=2∶1∶1,则A/a、B/b基因的遗传不遵循自由组合定律。)【题目点拨】本题主要考查遗传规律,考查学生的理解能力和实验探究能力。着重利用假说——演绎法,恰当地提出相应的假说,并用所学的知识进行演绎推理,找出不同假说间的区别,最后加以论述。10、常染色体显性遗传;患者中男性多于女性、交叉遗传(男性患者致病基因只能从母亲那里传来,以后只能传给女儿)I-1和I-2145/125/121/6【解题分析】
分析系谱图:Ⅱ-4和Ⅱ-5都患有甲病,但他们有一个正常的女儿(Ⅲ-7),即“有中生无为显性,显性看男病,男病女正非伴性”,说明甲病是常染色体显性遗传病;Ⅱ-4和Ⅱ-5都无乙病,但他们有患乙病的儿子,即“无中生有为隐性”,说明乙病是隐性遗传病,又已知甲和乙中有一种是伴性遗传病,因此乙病为伴X染色体隐性遗传病。【题目详解】(1)根据试题分析:甲病是常染色体显性遗传病。乙病为伴X染色体隐性遗传病,乙病遗传特点有男性患者多于女性,隔代交叉遗传,母病子必病。(2)Ⅱ-3两病均患,甲病的致病基因来自I-2,乙病是伴X隐性遗传病,致病基因来自I-1。(3)假定甲病由A控制,乙病由b控制,Ⅱ-2不患甲病,有关甲病的基因型为aa,不患乙病,但有患乙病的儿子,故Ⅱ-2有关乙病的基因型为XBXb,综合两对基因,Ⅱ-2基因型只有一种为aaXBXb。Ⅲ-8患甲病,Ⅱ-4和Ⅱ-5都患有甲病,故关于甲病的基因型为AA、Aa,Ⅲ-8不患乙病,但是有患乙病的哥哥6号,故其父母有关乙病的基因型为XBY、XBXb,Ⅲ-8有关乙病的基因型为XBXb、XBXB,综合两对基因,Ⅲ-8基因型有2×2=4种。(4)假定甲病由A控制,乙病由b控制,先分析甲病,Ⅲ-4的基因型为Aa,Ⅲ-5的基因型为AA或Aa,Aa占2/3,后代患甲病的概率是1-2/3×1/4=5/6;再分析乙病,Ⅲ-4的基因型为XBXb,Ⅲ-5的基因型XbY,后代患乙病的概率是1/2,若Ⅲ-4和Ⅲ-5结婚,后代两病都患的概率是5/6×1/2=5/12,后代只患甲病的概率为5/6×1/2=5/12,生育不患甲病孩子的概率是1-5/6=1/6。【题目点拨】本题结合系谱图,考查人类遗传病,要求考生掌握人类遗传病的类型及特点,能根据系谱图和题干信息“一种是伴性遗传病”判断甲和乙两种遗传病的遗传方式及相应个体的基因型,再运用逐对分析法进行相关概率的计算。11、逆转录和PCR技术扩增cDNA文库EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接破坏标记基因无法筛选(且没有启动子)吸收周围环境中的DNA分子表达的绿色荧光蛋白菌落卡那霉素【解题分析】
基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】(1)从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA,通过逆转录过程合成目的基因,并通过PCR技术在体外扩增可获得大量的目的基因,进而构建出HuC基因的cDNA文库。(2)构建基因表达载体时,不能破坏运载体上的启动子、复制原点,以及运载体上需要保留标记基因,为了防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接,常用不同的限制酶切割质粒和目的基因,结合图示中各种限制酶的酶切位点可知,为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体,需要对HuC基因和质粒选用图中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶进行切割。卡那霉素抗性基因为标记基因,若用NotⅠ酶切
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