DB1509-T 0001-2023 奶绵羊冷冻精液生产技术规程_第1页
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文档简介

44

1509 DB

1509/T

0001—2023奶绵羊冷冻精液生产技术规程Technical

regulations

for

the

production

of

dairy

sheep

frozen

seme 乌兰察布市市场监督管理局  发

布DB

1509/T

00012023 本文件按照GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定DB

1509/T

00012023

GB

4789.2

GB/T

GB

motility

abnormal

percentage

bacteria

acrosome

plasma

membrane

frozen

经特殊方法处理超低温冷冻后在液氮中（-196

c)精子密度≥2×10

DB

1509/T

00012023

c)精子密度≥2×10

适量40

℃～45

时，利用假阴道迅速采集精液并将其置于38

a)

b)

d)

A液：Tris

2.71

g、柠檬酸1.4g、果糖1g、

M199

mL、大豆卵磷脂1

g、青霉素10000

素10

g，加超纯水至100

B液：取A液90

mL，甘油10

mL。稀释密度大于等于1.2×10

DB

1509/T

00012023稀释密度大于等于1.2×10

38

30

10

min

10

min

10

38

℃冰箱中平衡

用无菌0.25

mL细管分装，两端封口应严密，管内无气泡。细管横向标识顺序从左到右依次为：羊

制作冻精的设备为适用0.25

℃～-10

-10

℃～-100

60℃/min）；-100

℃～-140

20

30

30

当温度下降至-140

30

贮存冻精的低温容器应符合GB/T

5458的要求；及时补充液氮，每年补充液氮；取放冻精时，冻精离开液氮不应超过10

℃～40

气中放置15

DB

1509/T

00012023

GB

GB

细菌数≤800

GB

4789.2

DB

1509/T

00012023A.1

A.2

解冻3管冷精于1.5

mL离心管中，加入1

mL洗精液并混匀；1500

rpm离心5

min，弃上清，留约20

min。

向精液中加入PBS

mL，1500

rpm离心5

mL

PBS

FITC-PSA

荧光显微镜下观察，共计数至少200个精子来统计冻后精子顶体完整性，若精子头部均染成明亮的

C=C1/S×100%............................... （A.1）CC1SDB

1509/T

00012023 B.1

B.2

吸取200μL精液加到1

mL低渗溶液中。放入恒温水浴锅里38

℃，30

min。

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