醒脑解郁胶囊对卒中后抑郁症大鼠影响的实验研究

醒脑解郁胶囊对卒中后抑郁症大鼠影响的实验研究

中风后抑郁（psd）在中国发病率很高，通常发生在脑血管疾病的早期阶段，严重影响患者的恢复，降低神经功能恢复率，导致中风和脑损失率降低。通过多年临床观察我们认为卒中后抑郁症多为痰瘀交阻、气郁不畅,采用醒脑解郁胶囊治疗,前期临床疗效满意,通过实验研究试图进一步阐明醒脑解郁胶囊的作用机制,具体实验如下。1中药来源及实验条件选用清洁级健康成年SD大鼠60只,雌雄各半,周龄为24周,由西安交通大学医学院实验动物中心提供。醒脑解郁胶囊(由石菖蒲、远志、半夏、郁金、陈皮、竹茹、巴戟天、川芎、鸡血藤组成),0.3g/粒,含生药3.5g,中药的提取条件采用正交实验法,由陕西中医学院附属医院制剂中心制备。百忧解由美国礼来苏州制药有限公司生产。2方法2.1青少年抑郁症模型造模及观察大鼠适应性饲养1周后,随机分为空白对照组、模型对照组、阳性药物组、醒脑解郁胶囊大剂量组、醒脑解郁胶囊中剂量组、醒脑解郁胶囊小剂量组。除空白对照组外其余各组先进行卒中模型复制(单侧颈总动脉不全结扎术)。手术成功3d后,进行抑郁症模型复制。孤养法结合小剂量利血平皮下注射,1次/d,共14d。造模成功后,分别在实验第14和21天进行OFT评分。并观察大鼠一般状态,进行第一次糖水消耗实验。经治疗21d后,并观察大鼠一般状态,进行第2次糖水消耗实验。大鼠断头后在冰上剥离脑组织,称重,冷冻保存。2.2糖的消耗实验2.2.1原理利用大鼠对蔗糖水的嗜好,用以模拟人类的兴趣感。若PSD大鼠的蔗糖水饮用量下降则可模拟PSD患者以兴趣感下降为核心的抑郁症状。2.2.2实验设备纯正砂糖;100ml量筒(西安市化学玻璃仪器厂)。2.2.3为水之道实验第7天、第14天和第21天,让各组动物任意饮用两种不同的水:其中一瓶为含1%蔗糖的自来水,一瓶为自来水。通过称饮水瓶重量测定7:00AM至次日7:00AM自来水和蔗糖水饮用量,以蔗糖偏嗜度(Sucrsepreference)[蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+自来水饮用量)×100]作为衡量标准,比较实验前后各组动物蔗糖偏嗜度的变化(糖水消耗反映动物的奖赏反应程度)。2.3动物活动评分reging行为学测定(Open-Field):实验采用敞箱为立柱体,高为40cm,长宽各为80cm,周壁为黑色,底面由面积相等的25块组成。以动物穿越地面块数为水平活动得分(crossing),动物穿越1格为1次,如动物沿线行走,以每10cm为1次。以直立次数为垂直活动得分(rearing),动物双足离开底面为标志,无论动物站立多长时间直至放下双足为1次活动。在实验的第14天和21天分别进行测定。每只动物进行1次,每次3min(敞箱试验水平运动反映了动物的活动度,垂直运动反映了动物对新鲜环境的好奇程度)。2.4海马神经元形态观察大鼠断头后剥离脑组织,分离双侧海马区,标本在10%甲醛溶液中固定,然后按常规步骤制做病理切片,采用苏木-伊红(HE)染色,电镜下观察海马神经元形态。2.5统计处理以平均值x¯±sx¯±s表示,并对组间差异采用方差分析q检验,显著性水平设定α=0.05。3结果3.1大、中剂量组与大、中剂量组大鼠养殖血糖及醉脑解郁胶囊添加量的比较表1从表1可以看出,醒脑解郁胶囊大、中、小剂量组和百忧解组均能增加大鼠糖水消耗量(P<0.05或P<0.01),但醒脑解郁胶囊大、中剂量组与百忧解组无显著差异(P>0.05)。醒脑解郁胶囊大、中剂量组和百忧解组升高程度明显优于小剂量组(P<0.05)。3.2组大鼠自发行为情况从表2、3可以看出,醒脑解郁胶囊大、中、小剂量组和百忧解组均能增加大鼠自发行为(P<0.05或P<0.01),但醒脑解郁胶囊大、中剂量组与百忧解组无显著差异(P>0.05)。醒脑解郁胶囊大、中剂量组和百忧解组升高程度明显优于小剂量组(P<0.05)。3.3大、中、小剂量对大鼠额叶及海马区神经元形态、细胞间隙的影响空白组大鼠大脑额叶及海马区神经元细胞形态规则,细胞间隙正常,排列整齐。模型对照组大鼠额叶及海马区神经元的大小、数量及胶质细胞均明显减少,细胞形态不规则,细胞间隙增大,排列疏松不齐,有的细胞尼氏体消失,经计数发现细胞数量明显减少。醒脑解郁胶囊大、中、小剂量组和百忧解组大鼠额叶及海马区神经元的大小、数量及胶质细胞均增加,细胞形态、细胞间隙较模型对照组改善。醒脑解郁胶囊大、中剂量组和百忧解组较小剂量组改善明显。醒脑解郁胶囊大剂量组改善优于百忧解组。4讨论4.1直接医疗费用支出脑卒中是危害人类生命与健康的常见病和多发病,具有发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高的特点,位居人类死亡原因第三位和致残原因第一位。2008年我国卫生部公布的“第三次全国居民死因调查”显示:脑血管病为第一死因,占22.45%;每年新发200万人,死亡150万人,75%致残,5年复发率41%;现有患者600万～700万人,每年的直接医疗费用支出为200亿元。由于脑卒中不仅给患者身心造成极大的痛苦,而且给社会和家庭带来巨大的精神和经济负担,因此,医学界越来越关注对脑卒中的发生、发展和防治措施研究。4.2脑卒中的脑中神经功能缺失卒中后抑郁症(Post-StrokeDepression,PSD)是指有明显临床症状的卒中后引发的抑郁症,表现为忧伤或郁闷,情绪低落,是对丧失、失望或者失败所产生的一种异常的负面情绪反应。卒中后抑郁症患者由于悲观失望,认知能力下降,对疾病康复丧失信心,不能积极主动配合治疗,甚至拒绝治疗,绝食、绝望自杀,延缓神经功能缺损的恢复时间,使劳动力丧失,严重影响卒中患者预后,使患者的生存质量和生活满意度下降,延长住院时间,甚至增加卒中的死亡率。国际多中心临床试验的循证医学证据表明,脑卒中患者的情绪稳定,对脑卒中的康复与治疗起着关键的作用。卒中后抑郁症的死亡率是非卒中后抑郁症的3～4倍,不仅给患者带来躯体和精神上的痛苦,亦增加了家庭和社会的负担。随着生物-心理-社会医学模式的转变和全球老龄化阶段的到来,对卒中后抑郁症的研究得到国内外学者的广泛关注。4.3抑郁症患者整体形态的改变临床资料越来越提示抑郁症并非完全功能性的精神障碍,部分类型确有其器质性基础。利用计算机断层扫描、正电子断层扫描和核磁共振等影像技术进行检查,发现抑郁症患者大脑及海马存在与慢性应激动物相似的整体形态的改变,机体可能通过一系列的神经生化机制导致脑组织器质性损害,而与情绪密切相关的边缘系统尤其是海马结构最易受到损害。包括海马及杏仁体容积的缩小和边缘系统神经元的损伤,表现为侧脑室扩大、脑沟变宽、前脑体积缩小、海马容量减少。整体形态的改变正是从宏观上支持微细结构改变。这些都可能构成了抑郁症的重要解剖学基础。其中以额叶及海马区病理改变最明显。4.4中医治疗psd我们经长期临床研究认为卒中后抑郁症病机是气郁不畅、痰瘀交阻,采用醒脑解郁、化痰活血为法,研制醒脑解郁胶囊。方中以石菖蒲为君药,取其味辛能开窍宁神,温以化湿豁痰。《重庆堂随笔》中早就指出:“石菖蒲舒心气,畅心神,怡心情,益心志,妙药也”。石菖蒲、远志相须,醒脑解郁,祛痰开窍,且远志又能安神益智;辅以半夏、郁金、柴胡,前者辛温燥湿化痰,镇静降血脂,后者辛寒活血化瘀,行气解郁、清心。君臣配合,开窍解郁,活血化痰并举,且方中温凉平衡。天竺黄味甘、性寒归心、肝经,清热豁痰、镇心定惊。丹参、鸡血藤共为佐药。丹参活血化瘀,清心安神。鸡血藤养血活血,舒筋通络。二者共奏活血化瘀、舒筋通络作用。巴戟天补肾解郁,滋补肝肾以治本。已有实验室研究及临床观察发现巴戟天的水提物具有抗抑郁的药理活性,且毒副作