精液检验课件

精液检验

（SeminalFluidTest)

精液检验概述一般性状检查显微镜检查精子功能试验精液检验（SeminalFluidTest）精液化学检查精液的免疫学检查精液的自动化检查尿液脑脊液

浆膜腔积液

前列腺液

阴道分泌物

精液

粪便检查精液检验男性生殖系统的结构精子的发生、运行与受精精液的组成精液的检验目的及意义标本的采集一、精液检验概述概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验（一）男性生殖系统的结构内生殖器生殖腺——睾丸输精管——附睾、输精管、射精管、尿道附属腺体——精囊腺、前列腺、尿道球腺外生殖器阴茎阴囊男性生殖器结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验男性生殖系统结构

结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验睾丸：是男性主要生殖器官，具有产生精子和分泌雄性激素的双重功能，睾丸小叶内为充满迂回曲折的曲细精管，曲细精管为产生精子的场所，其管内的生精上皮由5-8层多种形态的生精细胞和支持细胞所组成，生精细胞包括精原细胞、初级、次级精母细胞、精子细胞和精子，支持细胞具有支持和营养生精细胞的作用，并且贯穿整个生精上皮层。男性生殖系统的结构

结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验睾丸附睾结构图结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集形态描述精液检验曲细精管横断面结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集形态描述精液检验附睾:附睾附着于睾丸的上缘及后缘，是促使精子成熟和贮存精子的地方。男性生殖系统的结构附属腺体：精囊腺、前列腺、尿道球腺的分泌物为精液的主要成分，称为精浆。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精子（spermatozoon）是在脑垂体前叶分泌的促性腺激素（FSH）的刺激与睾丸自身所分泌的雄激素（睾丸酮）的维持下，由睾丸曲细精管的生精细胞不断增值、分化产生的。（二）精子的发生、运行和受精结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验初级精母细胞（上百个）精原细胞（1个）次级精母细胞精子细胞精子1、精子的发生（spermatogenesis）有丝分裂第一次减数分裂结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集第二次减数分裂精液检验精原细胞精液检验初级精母细胞、次级精母细胞精液检验精液检验2、精子的结构

（spermatozoonfabric）精子形似蝌蚪，全长60微米，分为头、尾两个部分，头部为卵圆形，内有一个致密的核。核的前部分被覆有顶体，内含有多种水解酶，尾部分为颈、中段、主段和末段，构成尾部的主要结构是微管组成的轴丝。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精子的结构模式图顶体末段主段中间段颈头尾结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精子形态结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精子的运行除包括精子在男性生殖道内的成熟、储存及输送外还包括在女性生殖道内的生存、穿行及获能，最终到达受精部位，并且具备使卵子受精的能力。3、精子的运行

（spermatozoonmove）

结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验Spermatozoonmove在睾丸内新形成的精子尚不成熟，既无受精能力，亦无运动能力，需到达附睾停留一段时间，并经历一系列成熟变化才能获得运动能力和受精能力。精子在附睾头体部成熟后，逐渐移向附睾尾部，在尾部贮存。精子在附睾中运行的时间约为12-21天；在男性生殖道内存活的时间一般为28天。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验Spermatozoonmove精子于射精时，通过附睾及输精管的强烈收缩，由附睾经输精管、射精管及尿道，同精浆一起排出体外。精液进入阴道后穹部，约有1％-5％的精子脱离精浆而进入子宫颈，穿行于女性生殖道的分泌液中，经子宫颈、子宫及输卵管间质部、峡部，最后到达输卵管壶腹部，即受精部位。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验4、精子与卵子结合过程

（受精fertilization）精子与卵子结合的过程称为受精，即精子和卵子自发融合成为成为受精卵的过程。在精液中，精子的受精能力被去能因子（DF）所抑制，在女性生殖道内孵育一段时间后才能去除DF因子，使精子细胞膜活化，精子才真正具有了受精能力，这个过程叫获能（capacitation）。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验Fertilization已获能的精子到达输卵管峡部与壶腹部的连接处与卵子相遇后，受卵细胞的影响而引起顶体反应（acrosomereaction），顶体反应即是精子膜与顶体外膜发生间断融合，出现许多小孔，精子发生形态学变化，使顶体内的酶系释放，释放出顶体酶、放射冠穿透酶、透明质酸酶、蛋白分解酶。

结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验Fertilization受精的过程包括精子与卵子识别和接触、精子穿越放射冠和透明带及两性原核融合形成合子的过程。精子释放出的顶体酶、放射冠穿透酶、透明质酸酶、蛋白分解酶等，它们能解离放射冠，使精子穿过透明带到达卵黄间隙。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验Fertilization精子细胞膜与卵细胞膜融合，随即精子的细胞核和细胞质进入卵内，精子穿入后，卵细胞内的皮质颗粒释放，使透明带结构发生变化，从而阻止了其他精子进入卵细胞。受精的时间在排卵后24h内。顶体反应的诱导与发生，一般认为卵泡细胞和透明带是诱发产生顶体反应的主要因素。精子与卵子结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验顶体反应及受精过程示意图结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集形态描述精液检验三、精液的组成精液由精子（spermatozoon）和精浆（seminal）组成；精液中水分约占90%，固体成分占10%有形成分：除精子外，还有少量的白细胞及生殖道脱落的上皮细胞、精母细胞等；精浆由附睾、精囊腺、前列腺、尿道球腺等腺体的分泌液组成。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精液的组成精囊液：占70%，淡黄色、粘稠、弱减性，内含果糖、维生素C、前列腺素、精浆凝固酶等；前列腺液：30%，为稀薄的乳白色、弱减性，PH7.2，含有淀粉酶、蛋白水解酶、纤维蛋白酶、酸鳞酶等；除外还有少量的附睾液、尿道球腺液等。结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验随着男性学、优生学及计划生育等学科的发展与需要，精液分析不仅重要而且其内容不断丰富充实，精液检验除了精液常规外，还有精子穿透能力的检验，精子细胞遗传学检验，精液生化检验，精液免疫学检验及微生物学检验等。四、精液分析（seminalfluidanalysis）的目的和意义结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验1、评介男性生育功能，寻找男性不育的原因，为不育症的诊断和疗效提供依据。

2、观察输精管结扎手术后的效果（术后六周精液中不应有精子）。精液分析的目的和意义结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验3、辅助男性生殖系统疾病的诊断。4、为人工受精和精子库筛选优质精子。5、男性计划生育科研工作6、法医学鉴定。精液检查的目的结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验精液标本的采集是保证分析结果准确性的重要步骤。采集的方法采集的注意事项五、精液标本的采集

结构运行与受精组成检验目的及意义标本的采集精液检验手淫法精液标本的采集方法采集的方法采集的注意事项性交中断法，但易漏掉精液中质量较高的最初部分，也易混入阴道分泌物。精液取样器。

精液检验1、采集前必须禁欲3-7天，禁欲包括无遗精和手淫。标本的采集注意事项采集的方法采集的注意事项2、收集精液的全部，收集的容器必须洁净干燥，玻璃试管。精液检验3、立即送检，存放时间不得超过2小时，在送检的过程中温度应保持25-35度。标本的采集注意事项采集的方法采集的注意事项4、精子数量变化范围大，不能仅凭一次分析结果作出判断，间隔1-2周进行复查，反复2-3次方能作出正确判断。精液检验精液量颜色、透明度、气味及精液PH值粘稠度、液化二、精液的一般性状检查概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验以毫升数报告，正常精液每次排出量2-6ml，平均3.5ml，精液的排出量与排精间隔时间长短有关，5-7天未射精，量小于1.5ml。则为异常，精液量减至数滴，排不出精时，称为无精液症，多见于生殖道炎症；量大于8ml时，精子浓度低，活动力不佳，也见于禁欲时间过长，影响生育。（一）精液量精液量颜色、透明度、气味及精液PH值粘稠度、液化精液检验正常人刚射出的精液为灰白色、半透明。（二）颜色、透明度、气味、PH精液量颜色、透明度、气味及精液PH值粘稠度、液化血精见于生殖道炎症、结核、肿瘤等。黄色、棕色脓性样精液见于精囊炎或前列腺炎。气味：石榴花味。精液弱减性，PH：7.2-8.0。精液检验（三）粘稠度与液化精液粘稠度测定可用玻棒法和粘度计法测定：

1、玻棒法：玻棒与精液标本接触，提棒时可拉起粘丝，形成不连续的悬滴，正常精液粘丝长度不超过2cm；粘稠度测定可分为三级：I级为30分钟基本液化；II级为60分钟不液化，吸取时有大量的粘稠丝；III级为24小时不液化。

2、粘度计法;

精液量颜色、透明度、气味及精液PH值粘稠度、液化精液检验精液的液化时间：正常情况下新排出的精液从胶冻状转变为自由流体状态所需要的时间，为精液的液化时间。（三）粘稠度与液化精液量颜色、透明度、气味及精液PH值粘稠度、液化正常情况下新排出的精液迅速凝成胶冻状，由于精液中含有纤溶酶而逐渐液化，刚射出的精液室温25-35度，30分钟内自行液化。室温1小时不液化则视为异常，24小时不液化则不需要做镜检，直接报告。精液检验精液液化后，取1滴于载玻片上，加盖片后，低倍镜观察有无精子及精子是否活动，如果无精子，离心1500转/分钟，沉渣中有无精子，然后作以下检查：

活动分析形态学检查精子密度检查三、精液的显微镜检查精液检验精子活动分析形态学检查精子密度（精子数量）检查精液的显微镜检查概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精子存活率——活动精子数精子活动分析精子活动力——精子的活动能力（一）精子活动分析活动分析形态学检查精子密度检查精液检验精子的活动力是指精子向前运动的能力，WHO将其分为a、b、c、d四级1、精子活动力的分级

活动分析形态学检查精子密度检查a级：精子呈前向运动b级：精子运动缓慢的前向运动c级：非前向运动或精子活动呆滞d级：精子不动精液检验一般我们将精子分为四级：精子分级

活动分析形态学检查精子密度检查0级：不活动精子；I级：活动不良，精子动作迟钝，原地打转；II级：活动较好，方向不变；III级：活动良好，呈直线活泼运动。精液检验2、精子存活率精子的活动率检查是指高倍镜下，至少观察100个精子，计算有活动能力的精子占全部精子的百分率，即为精子的活动率。计算公式为：精子活动率（%）＝活动精子数/（活动精子数＋不活动精子数）X100

温度可影响精子的活动，25-30°C为益。

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验精子存活率若不活动精子大于50%，应进行体外活体染色，如伊红染色法。原理：活精子的细胞膜能阻止伊红Y、胎盘蓝等染液进入细胞内，故不被染色，而死精子细胞膜完整性被破坏，失去屏障作用而被染成红色。方法：即取液化精液＋5ｇ/L伊红染液各1滴，玻片上混匀，1分钟推片，死精子染成红色，活精子不着色。

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验正常精液于排精后1小时III级活动精子≥60%，若0级和I级的精子≥40%则视为异常。精子的活力标志着排精后精子体外的生活力，其存活时间长短、活动力的优劣，反映了精子的质量。精子的活动力与温度、时间等因素密切相关。正常精液排出后精子活动率1h>60％，3h>50％，6h>30％。3、精子活动分析正常值

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验4、精子活动分析的临床意义精子的活动分析与受精的关系十分密切。精子活动力低下，难以抵抗输卵管或无力与卵子结合而不能完成受精的过程。a级活动力的精子数不足会影响受精率。如连续检查，精子存活率不足40％，且以c级活动力精子为主，则可以成为男性不育的原因之一。活动分析形态学检查精子密度检查精液检验精子活动分析检查的临床意义精子活动力下降见于：（1）精索静脉曲张，由于静脉血回流不畅，导致阴囊内温度升高及睾丸组织缺氧，使精子活力下降。（2）生殖系非特异性感染以及使用某些代谢药、雌激素等时。活动分析形态学检查精子密度检查精液检验精液中有形成分除精子外，还可以见到精母细胞、上皮细胞及少量的WBC精子形态生殖细胞其他细胞成分（二）形态学检查

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验1、精子形态

精子；形似蝌蚪，长约60微米，分头、尾两部分。头部正面观呈卵圆形，侧观呈梨形。正常精子形态满足以下标准：头部呈椭圆形，顶体占头部的40%以上；必须不存在颈部、中段和尾部的缺陷；细胞质微粒不大于正常头部的1∕3；精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验正常精子形态精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验观察精子形态是否异常主要是考虑的是精子细胞的功能部位，如果大多数精子细胞中出现某一部位的的异常，则应说明和描述。精子形态变异最主要的变化是在精子的头部，亦可见中间段或尾部变异，可分为生理变异和异常精子。正常生理变异的精子可有大头、小头、尖头及圆头等；异常精子包括巨大头、双头等畸形。尾部异常可见短尾、多尾、断尾等。精子形态变异精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验精子形态变异正常精液中正常形态精子应≥30%，精液中正常形态的精子数减少≤30%，则称为畸形精子症，主要与睾丸功能异常有关，见于生殖道炎症、精索静脉曲张、化学药物等影响睾丸的生精功能。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验畸形精子形态精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验正常精液中可见少量的精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞，当曲细精管生精功能受到损害时，精液中可出现较多的病理性幼稚细胞，这些细胞形态各异。2、生殖细胞精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验生殖细胞形态精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验正常生殖细胞形态描述精原细胞；最幼稚的一类生精细胞，它位于生精小管上皮的基层，胞体较小，呈圆形或椭圆形，直径约12微米，胞核大，圆形或卵圆形，核染色质疏松细粒状，胞浆少呈不透明兰色。初级精母细胞，体积较精原细胞大，形态多样，胞体大小与核染色质粗细、大小不一致，核染成深蓝色，胞质浅染。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验生殖细胞次级精母细胞；由初级精母细胞增殖分化而来，胞体较小，直径约12微米，核圆形，有单核和双核，染色质呈细网状，着色较浅，次级精子细胞存在的时间很短。精子细胞；靠近管腔，体积很小，直径约8微米，核大而圆，染色质致密，着色较深。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验生殖细胞的异常（1）存在异常无论生育和不育男性的精液中都存在一定量的生精细胞，若精液中找不到精子和生精细胞，即为生精细胞存在异常。（2）形态异常精液中各级生精细胞都可以存在形态异常，以胞膜和胞浆异常最为明显。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验生殖细胞的异常（3）比例异常指精液中的各级生精细胞的比例异常，其中一种或一种以上的生精细胞比例超出生育男性的比例。常见精母细胞成熟障碍，初级精母细胞比例增加，精原细胞比例增加，精子细胞比例下降。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验正常精液有极少数的RBC和少许的WBC及上皮细胞；3、形态学检查其他成分精子形态生殖细胞其他细胞成分WBC＜5个/HP，主要来自精囊腺和前列腺；WBC↑见于生殖道炎症。RBC↑见于血精、前列腺癌等；精液检验生殖细胞与白细胞的鉴别精液常规检查白细胞是用新鲜精液直接涂片镜检，易把生精细胞判为白细胞。可以通过染色镜检区别。正甲苯胺蓝过氧化物酶染色法白细胞染成棕色，而生精细胞不着色。瑞-吉氏混合染色法。精子形态生殖细胞其他细胞成分精液检验精子密度指单位容积内精子的数目，亦称精子浓度。精子总数是指全部射出精液量的精子总数，即单位容积精子量×精子密度。测定方法有：粗略估计法和精确计数法。（三）精子密度

（spermdensity）检查

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验spermdensity

1、粗略估计法：直接涂片+盖片后高倍镜下计数5个视野精子数，取其平均值×109/L则得精子数。2、精子计数法：原理：碳酸氢钠破坏精液的粘稠性，以甲醛固定精子，精液定量稀释后计数。试剂：精子稀释液：碳酸氢钠5g，浓甲醛1ml，加水至100ml。活动分析形态学检查精子密度检查精液检验操作：取精液20µl于0.38ml稀释液中混匀充池静置5分钟。高倍镜下计数中央大格内四角及正中共5个中方格内的精子数。spermdensity

活动分析形态学检查精子密度检查0.005mm1.0mm精液检验血细胞计数池结构0.005mm1.0mm活动分析形态学检查精子密度检查精液检验计数原则活动分析形态学检查精子密度检查精液检验计算：spermdensity

活动分析形态学检查精子密度检查精子数（/L）=5个中方格内精子×5×20×10×106=5个中方格内精子数×109/L正常参考值：精子数为20～200×109/L精液检验精子密度检查的临床意义精子密度减低可见于：（1）精索静脉曲张；（2）有害金属和放射性损伤；（3）先天性和后天性睾丸疾病（如睾丸畸形、萎缩、结核、炎症等）：（4）射精管、精囊缺陷；（5）老年人在50岁以下精子生成减少。

活动分析形态学检查精子密度检查精液检验正常精液中的精子能够穿透女性生殖道分泌液，运行到达受精部位，并经过获能和顶体反应后，能够穿透细胞的放射冠、透明带及细胞膜，使卵细胞受精，精子所具备的这种穿透能力即为精子的穿透力。四、精子功能试验概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精子功能试验精子的穿透试验是评价精液质量、检测精子功能的重要检测方法，对原因不明的男性不育患者、体外受精等有重要价值。精子的穿透试验分为体内试验和体外试验两种。概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精子功能试验体内试验——性交后实验毛细血管穿透试验体外试验玻片穿透试验去透明带仓鼠卵人精子穿透试验概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精子功能试验精子毛细血管穿透实验：该方法是在体外毛细血管内测量精子穿透宫颈粘液能力的试验。将含有宫颈粘液或其代用品的毛细管插入精液池，在一定时间内观察精子穿透介质中向前运动的距离及该距离的活动精子数目，用以判断精子的穿透能力，又称为精子爬高实验。概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精子功能试验器材：精子穿透计，介质：鲜鸡蛋清概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化操作：（1）取新鲜精液0.2ml于精液池中。（2）将穿透介质吸入毛细管内，无气泡，用胶泥封闭一端，另一端垂直插入精液池中。（3）37℃水浴后观察结果。精液检验毛细管穿透实验精子0.5ml精液橡皮泥概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化鲜鸡蛋清精液检验精子功能试验结果：测定精子在毛细管中的移动距离及活动精子数。根据穿透高度、穿透密度和活动力三项指标进行评分判断结果。概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化穿透高度：指毛细管中最前方的精子高度，单位为mm；穿透密度：毛细管中精子数目最多一段的精子数；活动力：观察毛细管中活动精子的能力。精液检验精子化学试验精浆果糖测定酸性磷酸酶（ACP）的测定精子顶体酶活力测定概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验精浆果糖是精囊腺将血糖转化分泌而来的，是精子功能的主要来源，其含量的高低直接影响精子的活动，可以反映精囊腺的分泌功能。正常精浆中果糖浓度为9.11-17.67mmol∕L。精浆果糖为0可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如，两侧输精管完全阻塞或逆行射精。精浆果糖降低见于精囊炎和雄激素分泌不足。1、精浆果糖测定

精浆果糖测定酸性磷酸酶（ACP）的测定精子顶体酶活力测定精液检验精浆中ACP来源于前列腺，其含量的多少直接影响精子的活力和代谢。ACP含量高于任何体液，因此，检测ACP是法医鉴定有无精液最敏感的方法。前列腺炎时，精浆ACP下降,前列腺肥大和前列腺癌时ACP升高。2、酸性磷酸酶（ACP）的测定精浆果糖测定酸性磷酸酶（ACP）的测定精子顶体酶活力测定.精液检验顶体酶是蛋白水解酶，存在于精子顶体内，当精子头部进入卵细胞的透明带时，被激活而水解卵细胞的透明带，使精子与卵子融合。正常精液顶体酶活性为36.72±21.43mU/ml。顶体酶的酶活性与精子的密度及精子完整率成正相关。3、精子顶体酶活力测定

精浆果糖测定酸性磷酸酶（ACP）的测定精子顶体酶活力测定精液检验概述抗精子抗体（AsAb）精浆免疫抑制物（SPIM）五、精液的免疫学检查概述一般性状显微镜精子功能精液化学免疫学自动化精液检验不孕和不育的原因是非常复杂的，在原因不明的不育症中，免疫性不育占了10-20%，近年来对免疫性不育的研究发展很快，测定精液中的抗原、抗体对研究免疫性不育有重要价值。概述概述抗精子抗体精浆免疫抑制物精液检验概述免疫学因素的参与和某些病人的发病有密切关系，在男性和女性病人都可能出现的抗精子抗体，对精子有制动和细胞毒作用；在女性出现的抗透明带抗体，可阻止精子对卵细胞的附着和穿透；抗子宫内膜抗体则可阻止受精卵的着床。检测这些自身抗体，有助于对男性病特别是男性不育症的综合分析或辅助诊断。概述抗精子抗体精浆免疫抑制物精液检验AsAb产生的原因：1、血睾屏障的生理作用被破坏正常情况下，血睾屏障将精子抗原与机体免疫系统隔离，因而不会发生抗精子自身免疫。当生殖系统炎症、阻塞或手术等均可造成精子抗原外溢，与机体免疫系统接触而产生抗精子抗体。（一）抗精子抗体(AsAb)

概述抗精子抗体精浆免疫抑制物精液检验抗精子抗体(AsAb)2、免疫抑制功能的障碍精浆中含有精浆免疫抑制物，这些物质包括丝氨酸蛋白酶、前列腺素等可抑制机体对抗原发生免疫应答。正常女性生殖道与精子接触后，虽有少量的经阴道粘膜、子宫内膜等部位吸收，降解，但不致使体内产生抗精子抗体。当这些物质含量下降时，男性和女性体内产生抗精子抗体。概述抗精子抗体精浆免疫抑制物精液检验抗精子抗体(AsAb)3、遗传因素有研究表明，在决定人对精子