替米考星肠溶微丸的质量评价

替米考星肠溶微丸的质量评价

氨基溶胶是一种特殊的抗生素，对革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性动物、霉菌和螺旋体等革兰氏阳性细菌有很强的抑制作用，在预防和控制家禽疾病方面发挥了重要作用。但替米考星味道较苦,对猪的采食量影响较大,难以保证动物体内的药物浓度,影响用药效果。目前主要通过添加甜味剂来改善适口性,取得了一定效果,但还不尽完善。因此通过改变替米考星的剂型来改善替米考星适口性成为主要的研究方向。肠溶微丸制剂为剂量分散型的球形口服制剂,具有吸收不受胃排空影响、释药均匀、生物利用度高、刺激小、重现性好等特点,可以掩盖药物的不良气味及苦味,为临床中一些对酸不稳定或对胃刺激性大的药物的使用提供了便利。用替米考星作为主药,以药用辅料羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HP-55)、丙烯酸树脂EudragitL100、EudragitS100中一种或两种任意比例结合,制备一种无味替米考星肠溶微丸,方法简单,成本可控,可实现产业化生产。目前国内关于替米考星肠溶微丸制剂的研究还处于实验阶段,尚没有法定的质量标准。本研究采用高效液相色谱法和体外溶出度法,主要对研制出的替米考星肠溶微丸进行载药量及溶出度的初步质量评价,为兽用肠溶微丸的进一步研究提供科学依据。1材料和方法1.1phs-25型ph计LC-10A高效液相色谱仪,岛津国际贸易(上海)有限公司;pHS-25型pH计,上海雷磁仪器厂;RCY-808智能溶出测定仪,天津海益达科技有限公司。1.2料、试剂及分析纯样品:选择不同肠溶包衣材料制得4批替米考星肠溶微丸。对照品:替米考星原料,含量85%,批号20091017,湖北龙翔药业有限公司。甲醇、乙腈均为色谱纯,N,N-二甲基甲酰胺、二丁胺均为分析纯。提取液:取磷酸二丁胺缓冲液25mL,加乙腈200mL,加水至1000mL,摇匀即得。1.3方法1.3.1顺式和反式异构体峰面积测定取样品适量,研细,精密称取0.5g,置50mL容量瓶,加一定量的二甲基甲酰胺溶解,后加入提取液定容,超声。精密量取5mL续滤液用提取液定容至25mL。精密量取20μL注入液相色谱仪,记录色谱图及顺式和反式异构体峰面积。另取替米考星对照品25mg,加入提取液定容至50mL容量瓶。精密量取5mL溶液用定容至25mL。同法测定,按外标法以顺式和反式异构体峰面积之和计算。替米考星载药量(%)=(m对×A对×S供÷m供÷S对)×100%。式中m对、m供分别为对照品、供试品的称量(g),A对为对照品的含量,S对、S供分别为对照品及供试品的顺式和反式异构体峰面积之和。1.3.2色谱柱及检测波长流动相为水∶乙腈∶四氢呋喃∶磷酸二丁胺缓冲液(805∶115∶55∶25);色谱柱为XTerraMS-C18(4.6mm×250mm,5μm);流速为1mL/min;紫外检测波长290nm;进样量20μL。1.3.3替米考星的高效液相色谱仪测定参照2005年版《中国药典》溶出度测定法第三法装置,称取适量样品,以0.1mol/L盐酸溶液和pH6.8的磷酸盐缓冲液250mL为溶出介质,转速为100r/min,依法操作,2h后取溶出液5mL,以直径0.45μm的微孔滤膜过滤,精密吸取各滤液20μL注入高效液相色谱仪,记录色谱图及替米考星顺式和反式异构体峰面积,求得滤液浓度。另取替米考星对照品25mg,加入提取液定容至50mL容量瓶。精密量取5mL溶液用定容至25mL。采用上述检测方法,对照品结果同载药量检测,计算溶出2h的替米考星肠溶微丸溶出度。2结果2.1制剂含量采用高效液相法测定4批样品平均载药量分别为:22.05%、21.95%、19.65%、20.89%,制剂含量平均20%(表1)。替米考星对照品反式异构体的保留时间为10.977min,顺式异构体的保留时间为12.753min,样品主峰的保留时间与替米考星对照品主峰的保留时间一致,如图1所示。2.2不同液出率的检测如表2所示,采用不同类型包衣材料制备的样品在人工胃液及在人工肠液中的溶出率不同,分别为86.73%、96.03%、91.79%、0和85.83%、98.41%、98.96%、96.29%,其中样品4在人工胃液中无明显破坏,形状保持完整,滤液残渣很少。3微丸在不同溶剂中的溶出率。在一般资料测定本研究主要对替米考星肠溶微丸在0.1mol/L盐酸溶液及pH6.8磷酸盐缓冲溶液的溶出度进行了测定。结果表明,替米考星肠溶微丸在模拟胃部环境中不溶出,而在模拟肠道环境中的溶出率为96.29%。这说明,所制得的替米考星肠溶微丸达到肠溶制剂在胃液中溶出率少于10%,在肠液中溶出率高于90%的要求,具有明显的定位释放功能,微丸在碱性介质中以壁材溶解的方式释放。肠溶微丸的溶出度主要受到肠溶包衣材料性质的影响,肠溶包衣材料的性质在一定程度上决定着肠溶微丸是