制剂制备车间净化系统验证方案

1.1系统简介:干细胞制剂制备车间空调净化系统是依据《药品生产质量管理规范》（GMP）的要求组织设计施工.其洁净生产区环境须符合B级洁净度标准，细胞培养室须符合B+A级洁净度标准，包括温度、相对湿度、静压差、洁净度及换气次数等。空气净化系统（HVAC）就是将进入洁净生产区的空气进行提前处理并达到标准，以满足生产工艺要求。1.2设计要求：由空气处理机组及初、中、高过滤器组成。系统经初效过滤及温、湿处理，再经加压风机中效过滤后，通过保温管道送至设在洁净区各功能间顶部的高效送风口，经高效过滤后，扩散送至洁净区，再经下侧阻尼排风口进入回风管道；回风经回风管道送至经初效过滤的新风段，与新风汇合，经过过滤及温、湿处理后，再经加压风机中效过滤后，通过保温管道送至设在洁净区顶部的各功能间之高效风口，经高效过滤后，扩散送至洁净区。新空气经过HVAC处理后能够保证洁净区房间的尘埃粒子、沉降菌及环境温湿度等指标达到工艺要求，符合新版GMP标准。洁净室隔断，天花板及墙面均采用采钢板材料，各交角处均作圆角处理，利于清洁处理。地面采用不起尘的环氧树脂，自流平利于清洁处理。所有用料均为易清洁，不长霉菌材料。结构全密封处理。洁净区内采用顶送下侧排气流型式，流程如下：冷水机组冷水机组1.3系统工作流程：干蒸汽加湿器↓冷冻水↓蒸汽↓↓纯净蒸汽↓新风→初效过滤器→中效过滤器→表冷段→加热段→加湿段→风机 回风管←回风口←洁净生产区←高效过滤器←送风管 臭氧←臭氧发生器排风2验证目的通过对空气净化系统（HVAC）进行验证，确认其经过一年运行后，能持续稳定地为洁净区药品生产提供符合GMP要求的环境；该系统的各项性能符合设计要求；系统标准操作规程适用性符合要求。3验证范围本验证方案适用于干细胞制剂制备车间空气净化系统再验证。该系统的设计、安装在上一验证周期内均未发生过变更，系统运行稳定，各参数没有发生漂移。故本次验证的内容包括对该系统的文件资料、安装情况进行检查；对系统运行情况进行再确认；在空间灭菌时对臭氧浓度进行检测。4机构与职责4.1验证小组：由仪器确认相关人员组成验证小组，验证小组应包括验证小组组长、验证小组副组长、验证小组成员组成。验证小组成员应至少包括专业技术人员及QA。4.2职责：4.2.1验证小组组长职责:-根据验证计划安排或其它能引起确认需求的情况，提出项目确认立项；确认项目评估的审核；组织验证小组人员按方案及确认项目实施评估表要求，实施确认；对各阶段确认结果进行评价，根据验证报告提出项目总结，对整个项目验证负责；4.2.2验证小组副组长职责:-协助组长工作，根据确认立项对确认项目进行评估，组织技术人员成立验证小组。按已批准的确认方案内容实施确认项目；对确认过程及结果进行审核；有关检验记录及偏差的审核；验证报告的起草。4.2.3验证小组成员职责:在验证小组组长的领导下，负责在各自的职责范围内完成确认的具体实施，对确认的结果进行记录，对确认实施的结果负责。5再验证依据：《药品生产质量管理规范（2010年修订）》；《洁净室施工及验收规范》GB50591-2010；《气溶胶发生器使用操作规程》；《气溶胶光度计使用操作规程》；《臭氧发生器(水冷)使用维护操作规程》；《数字式风速计使用维护操作规程》；《气流流型测试仪使用及维护操作规程》；《GMP附录11《确认与验证》》。6风险分析通过风险分析确定后续验证工作的范围和程度，并制定降低风险的措施，避免影响本方案实施的结果。降低风险的措施可以是确认中的某个项目的具体测试，或者增加相应的控制和检查程序等。措施的执行情况须在验证过程前进行检查。本方案采用失效模式与影响分析法（FMEA）进行风险分析。6.1定义：6.1.1风险：危害发生的可能性及其危害程度得综合体。6.1.2风险分析：运用合适的信息和工具，对危险进行识别和评价。6.1.3严重性（S）：危害的后果的严重程度，分值：1～3。6.1.4可能性（O）：危害发生的频率，分值：1～3。6.1.5可检测性（D）对可能引起危害情形的测定能力，分值：1～3。6.1.6风险指数（RPN）：用来综合评价某项风险的严重程度，分值：S×O×D。6.2风险水平评定标准：类别分值含义风险水平严重性（S）5直接影响产品的安全性、有效性，违反GMP原则，可能成为审查中的严重缺陷项。严重4直接影响产品质量，或影响工艺与质量数据的可靠性、完整性和可追溯性，不完全符合GMP规定，可能成为审查中的主要缺陷项。高严重性（S）3间接影响产品质量，或间接影响工艺与质量数据的可靠性、完整性和可追溯性，不完全符合GMP规定，可能成为审查中的一般缺中2间接影响产品质量，或间接影响工艺与质量数据的可靠性、完整性和可追溯性，可能对资源的浪费、成本的升高有较大的影响。低1不影响产品质量和工艺与质量数据的可靠性、完整性和可追溯性，可能对资源的浪费、成本的升高有较小的影响。无影响可能性（O）5基本确定的问题，每次均会发生。严重4必然的问题，几乎每次都发生。极高3反复出现的问题，通常会发生。高2偶尔出现的问题，有时会发生。中1不太可能出现的问题。低可检测性（D）5不可能被检测到。严重4被检测到的可能性极低。高3有时能被检测到，大多数检测不到。中2大多数能被检测到。低1肯定能被检测到。无影响6.3风险等级标准：风险指数（RPN）风险等级应采取的措施Ⅰ风险是可以接受的，不需要主动采取风险控制措施。9～18Ⅱ先考虑接受风险的受益和进一步降低的可能性，如果受益超过风险，则风险是可以接受的；反之，风险是不可以接受的，须采取控制解决措施将风险降到可行的最低水平。>18Ⅲ应立即采取措施控制解决，在得不到有效解决之前，不得继续操作。6.4风险评估及控制措施序号风险及可能导致的后果SODRPN风险等级采取的控制措施1空气净化机组室外新风口过滤网破损，影响新风质量，造成初效过滤器使用周期缩短。3216Ⅰ安装符合规格的过滤网，纳入预防性维护计划。风机未定期维护三角带老化严重、轴承磨损、风叶变形，造成系统送风量减少。2112Ⅰ按操作规程定期检查。空调机组箱体检修门密封不严，影响送风质量。2214Ⅰ按操作规程定期检查。初效过滤器未定期清洗、更换，导致泄露、破损或积尘量过多，影响送风量，缩短中效过滤器使用时间。323Ⅱ安装在校验有效期内的压差计，根据压差显示数据对初效过滤器定期进行清洗更中效过滤器未定期清洗更换，导致泄露、破损，影响送风量，缩短高效过滤器使用寿命323Ⅱ安装在校验有效期内的压差计，根据压差显示数据对中效过滤器定期进行清洗更箱体泄露，导致送风泄露送风量不足。322Ⅱ在IQ中进行组合式空调机组安装确认，确保空调机组严密、不漏。新风电动阀关闭不严，停机后室外空气倒灌，污染回风系统和洁净区。3216Ⅰ纳入预防性维护计划，定期检查电磁阀可靠性。2加热、加湿段蒸汽压力不稳导致洁净区湿度或温度超标，影响洁净区高效过滤器使用寿命。3216Ⅰ蒸汽管路安装减压阀及压力表，控制蒸汽压力。3冷水机组制冷量达不到要求，温度控制不稳定或无法控温，环境温湿度超标，影响产品生产。422ⅡOQ中确认冷水机组温控可靠性。4风管泄漏影响洁净区空气消毒效果，影响风量，影响洁净区洁净度，污染药品。523ⅢIQ中确认风管密封性。5高效过滤器未按规定周期性更换，未按期做完整性检测，导致泄漏、破损，造成生产环境微生物污染，影响洁净度。524Ⅲ按规定周期更换，定期做完整性测试。PQ中进行高效过滤器检漏测试。6洁净区自净时间不当，达不到洁净要求，对产品造成污染。322ⅡPQ中确认，确定自净时间。压差值不符合规定，造成生产环境微生物污染。532Ⅲ设置合适的送风量、排风量、回风量比例；岗位人员出入时随手关门；在PQ中进行关键房间的静压差确认。温湿度值不符合规定，影响舒适度，造成生产环境微生物污染。532Ⅲ关键房间安装温湿度表，通过空调调节房间温湿度，在PQ中确认房间温湿度。风速、风量及换气次数不符合规定，造成生产环境微生物污染，影响洁净度。433Ⅲ调整洁净室风阀，使换气次数符合标准，PQ中确认风量及换气次数。微生物超标，对产品造成污染。523Ⅲ定期进行环境监测。气流方向测试和可视化检测不符合规定，造成产品污染532Ⅲ调节空调系统风向。7臭氧发生器臭氧量低，达不到灭菌浓度，造成微生物超标，污染生产环境。532ⅢPQ中确认臭氧浓度8计量器具不在检定有效期内，影响检测数据。2112Ⅰ9培训操作人员未经有效培训，导致操作错误，出现操作事故。2112Ⅰ制定培训计划，进行有效培训。7.验证内容7.1安装确认（IQ）目的：核对系统相关的技术资料、设备档案是否齐全；对设备系统、配套公用系统的检查，以确认其安装有无变更，状态是否仍然完好。7.1.1人员确认、文件资料检查：检查与确认有关的文件资料，确认现行使用操作和维护保养文件为有效的在执行版本。参与验证人员已经过验证方案的培训。确认结果：名称基本要求仪器档案应保存完好，内容齐全仪器使用操作规程应经过批准并保存完好，为现行版本本验证方案培训参与验证人员应经过培训，且有培训记录7.1.2安装检查按照安装确认的每项内容，检查安装是否符合设计及安装规范。检查设备各部件的安装是否完好、可保证系统正常运行。检查项目可接受标准机组箱体箱体对接严密，接缝处无泄漏，保温效果好。检修门钢制检修门，密闭、保温效果好，密封条无老化破损。初、中效过滤器无纺布多折袋式过滤器，安装有压差计，初效为G4型，中效为F7型；箱体外标示初始压差。过滤袋用铝合金压框安装，拆卸方便。表冷段列管无泄漏、堵塞，挡水板无锈蚀。安装排水阀门，能自流排尽内部存水。加热、加湿段蒸汽管路安装有减压阀并加装压力表与调节阀门。电气部分接地、绝缘良好，接线防水包扎。管路连接管路保温层良好、无脱落，软连接处完好无老化破损现象。风机风机在减震座上固定牢固，不存在松动现象；风叶无变形，轴承润滑良好，手动转动流畅；连接皮带松紧适宜，无破裂、断裂现象。风管检查风管保温阻燃型橡塑板无脱落，支架、法兰处均密封完好。风口软连接连接完好，无老化破损现象。风阀风阀手动转动开关灵活，无卡死现象。冷冻水系统冷水机组安装牢固、地脚无松动；制冷剂充足且无泄漏；冷却水、冷冻水管路接口连接良好，无泄漏现象。冷冻水循环管路冷冻水泵安装固定牢固；管路连接完好、无泄漏；管道阀门开启、关闭灵活；管道压力表校验合格。冷却水系统冷却水循环管路冷却水泵安装固定牢固；管路连接完好、无泄漏；管道阀门开启、关闭灵活；管道压力表校验合格。冷却塔各部位连接紧固牢靠；风机皮带无老化破损；塔内填料完好。7.2运行确认（OQ）目的:运行确认是安装检查通过后，检验系统运行一段时间后，其各项技术性能参数还能否达到设计要求和和生产工艺要求；洁净区内空气环境能够达到GMP要求所进行的实际运行检查，并且对空调净化系统标准操作规程进行检验。7.2.1系统设备、设施检查检查项目可接受标准空气处理机组风机运行开机、运转、停机平稳，无异常声响，箱体无漏风现象。过滤器压差初效、中效压差值未超过初始压差2倍。新风电动阀阀板无缝隙；停机后能自动可靠关闭，不发生倒风。温湿度表已校验合格，显示准确清晰。冷水机组运行开机、运转、停机平稳，无异常声响，散热器散热正常，无异常报警现象。冷冻水温度设定出水温度设定值在7-12℃范围内。达到设定值后自动停机；倒计时结束后自动开机。臭氧发生器运行接通自来水、压缩空气后可正常开启，计时器准确计时。防护装置不接通自来水、压缩空气、臭氧管道阀门不开启，设备无法启动。循环水系统运转正常，水压符合要求，各连接点无泄漏。7.2.6运行确认结论由设备部、生产部按照组合式空气处理机组标准操作规程进行运行试验，运行确认由设备部负责，生产部、质量部协助。设备部按运行确认内容逐一检查各部件的运行情况；质量部检测各项技术参数和洁净区环境是否符合设计标准和GMP要求，做出运行确认结论。7.3性能再确认（PQ）7.3.1臭氧灭菌确认通过对房间臭氧浓度和微生物检测，确认灭菌效果是否可靠。证明预先确定的灭菌时间持续时间30min）7.3.1.1房间臭氧浓度检测检测点设定：检测地点选取距空气净化系统送风距离最远且送风口分布最少的房间，按此标准，检测各个房间。检测方法：臭氧灭菌过程中，在臭氧发生器和空气净化系统启动60min时，利用臭氧检测指示卡在各个房间采样检测。可接受标准：系统运行60min时，臭氧浓度≥10ppm。7.3.2洁净区悬浮粒子的检测7.3.2.1方法：采用静态检测方式，利用尘埃粒子计数器检测φ≥0.5um和φ≥5um的悬浮粒子浓度。系统运行30min后，测试人员穿洁净服进入测试现场，测试人员不得多于2名。7.3.2.2采样点数量设定：依据公司实际生产车间的面积，决定每个房间设置4个采样点。7.3.2.3采样点位置：距地面0.8m高度的水平面上按数量均匀布置，并避开回（排）风7.3.2.4采样方式：尘埃粒子计数器采样口应正对气流方向，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量减少活动。7.3.2.5采样次数及采样量：每个采样点采样三次；每次采样30s（尘埃粒子计数器标准采样量：28.3L/min）。7.3.2.6按要求调节尘埃粒子计数器参数，打印并记录检测粒子数。可接受标准：洁净级别静态悬浮粒子>0.5µm(粒/m3)>5.0µm(粒/m3)A级区≤3520B级区≤3520C级区≤352000≤2900D级区≤3520000≤290007.3.3房间沉降菌检测方法：7.3.3.1测试前，按《微生物限度检查操作规程》提前准备好胰酪大豆胨琼脂（TSA）培养皿及沙氏葡萄糖琼脂（SDA）培养皿。7.3.3.2在臭氧灭菌结束后，测试人员穿洁净服进入测试现场，测试人员不得多于2名。设置好采样点，采样点距离地面0.8～1.5m（略高于工作面）均匀布置。依据公司实际生产车间的面积，决定每个房间设置4个采样点。每个采样点采样一次。7.3.3.3采用静态测试方式沉降法，将已准备好的培养基平皿放置于采样点，培养基暴露4h通过自然沉降收集空气中的微生物粒子于培养基平皿将培养基平皿上盖后倒置。7.3.3.4全部采样结束后，将TSA培养皿盖盖上后倒置在37℃±1℃培养箱中培养48h；SDA培养皿盖盖上后倒置在20℃-25℃霉菌培养箱中培养120h；用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。7.3.3.5培养皿在用于检测时，为避免培养皿运输或搬动过程造成的影响，宜同时进行对照试验，每次或每个区域取1个对照皿，与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，结果应无菌落生长。可接受标准:洁净级别动态沉降菌/皿A级4h<1B级4h≤5C级4h≤50D级4h≤1007.3.4气流方向测试和可视化检测方法：通过气流流型测试仪用纯化水喷射生成示踪粒子的方法将记录在视频里，可清晰的看出每个房间及走廊的气流方向。可接受标准：所有房间均为非单向流。7.3.5已安装过滤器系统检漏测试方法：通过检测高效过滤器的泄漏率，确认高效过滤器的完整性，确保不会因为高效过滤器泄漏影响洁净区空气质量。方法：采用气溶胶光度计扫描巡检法。拆下散流板，利用气溶胶发生器在过滤器上游引入气溶胶，使用气溶胶光度计扫描过滤器下游边框或下游风管取样。采样头距过滤器约2-4cm，扫描速度约在3-5cm/s,沿着过滤器滤材、内边框等来回扫描，扫描按直线来回往复地进行，线条间应重叠。如有泄露点，仪器会自动蜂鸣报警。在扫描时，发现任何大于等于设计泄漏限度的泄漏情况时菌应驻停探头在泄漏位置，并保持探头在气溶胶光度计稳定独读出最大数字的位置识别泄漏点。可接受标准：气溶胶光度计应无泄漏蜂鸣报警。7.3.6高效过滤器的风速、风量和房间换气次数测定开启所有的空调设备及与空调系统有关的工艺排风机。对整个空调系统进行风量平衡，调节各房间送回风的风量大小及各房间的风压，然后进行风速风量的检测，最终确认房间换气次数。7.3.6.1检测点位置设定：检测位置为每个高效过滤器出风口，检测点距过滤器表面15cm～30cm处。在高效过滤器出风口四角与中间处取5个检测点（见下图）。21235457.3.6.2检测计算方法：用风速测试仪测得5个检测点的风速（V1、V2、V3、V4、V5高度（H），通过检测和测量数据计算出房间的换气次数。VV1＋V2＋V3＋V4＋V5）/5(m/s)Qn＝3600×VS（m3/h）Q＝Q1＋Q2＋…＋Qn（m3/h）之和）N＝Q/LWH（次/h）7.3.7房间自净时间测定V—单一送风口平均风速Qn—单一送风口风量Q—房间总送风量（所有送风口风量N—换气次数房间自净时间为自空气净化系统开始运行至房间达到B级洁净度静态标准的时间。使用气溶胶发生器发烟，利用尘埃粒子计数器检测、读数，通过此项测定，确定自净时间20min是否可行、持续有效。（1）测试方法：空气净化系统20分钟自净后，检测系统最远端尘埃粒子数量。房间取两个采样点，每个采样点采样3次；每次采样30s（尘埃粒子计数器标准采样量：28.3L/min）。尘埃粒子数量需达到B级洁净度静态悬浮粒子浓度标准。（2）检测点设定：检测地点选取距空气净化系统送风距离最远且送风口分布最少的房间，按此标准。B级洁净度静态悬浮粒子浓度标准粒径（Фμm）浓度值（粒/m3）≤3,5207.3.8洁净区房间压差检测压差测量应在风量测定之后进行，检测前应将所有的门关闭，房间排风机全打开。测量时不允许有人员穿越房间。查明洁净室与相邻房间是否有合适的正压或负压差，从而确定空气的流向，确认与设计的压差是否一致。空调系统运行30分钟后压差计读数并记录。可接受标准：洁净区与非洁净区压差应≥10pa；不同级别洁净区的压差≥10pa；同级别洁净区压差应≥5pa7.3.9洁净区房间温度、相对湿度检测温湿度检测应在压差调整合格后进行，检测点设在洁净室有代表性的工作区或洁净室中心，距地面高度0.8m处，空气净化系统启动后于上午9:00～10:00；下午1:00～2:00各记录一次温湿度值。可接受标准：各房间相对温度范围应在18℃~26℃;各房间相对湿度范围在45%～65%7.3.10性能确认结论由设备部、生产部、质量部按照性能确认内容逐一检查，设备部负责设备的运行，生产部负责车间内的清洁，质量部检测各项技术参数和洁净区环境是否符合B级标准，做出性能确认结论。7.4异常情况处理程序空气净化系统验证过程中，应严格按照系统标准操作规程，维护保养规程，取样检测规程、检验标准操作规程和质量标准进行操