考点49基因工程的工具及操作程序（讲义）（原卷版）

考点49基因工程的工具及操作程序基因工程的基本工具限制性内切核酸酶（简称）——分子手术刀存在：主要存在于中。作用：识别DNA分子的特定，并且使每一条链中特定部位的断开。特点：具有。结果：形成或。原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵。限制酶作为一种防御工具，可切割外源DNA，使之失效，进行保证原核生物的安全。原核生物中不存在相应限制酶的识别序列或识别序列已被修饰，故限制酶不切割自身的DNA。DNA连接酶——分子缝合针（1）作用：连接两个DNA片段。（2）主要种类：①：从大肠杆菌中分离得到，只能连接具有互补的DNA片段。②：从T4噬菌体中分离出来，可以“缝合”双链DNA片段互补的和双链DNA片段的。T4DNA连接酶虽然两种末端均能连接，但连接平末端的效率相对较低。（3）DNA连接酶和限制酶的区别与联系项目类型限制酶DNA连接酶作用使特定部位的磷酸二酯键在DNA片段之间重新磷酸二酯键应用用于目的基因和载体用于目的基因片段与载体的联系基因进入受体细胞的载体——分子运输车（1）质粒：一种、结构简单、独立于真核细胞或原核细胞之外，并具有能力的双链DNA分子。（2）其他载体：和等。（3）载体必需的条件（以质粒为例）①有一个至多个切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。②能在受体细胞中进行，或整合到上，随受体DNA同步复制。③有特殊的，便于重组DNA分子的筛选。易错提醒：工具包括3种：限制酶（限制性内切核酸酶）、DNA连接酶、载体；工具酶包括2种：限制酶（限制性内切核酸酶）、DNA连接酶。真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。基因工程的基本操作程序目的基因的筛选与获取（1）筛选合适的目的基因①目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。主要指的基因，如Bt抗虫蛋白基因。②筛选方法：和清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。如培育转基因抗虫棉中用到的苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白基因。b.通过构建基因文库来获取目的基因。（2）利用PCR获取和扩增目的基因①PCR：即聚合酶链式反应，是一项根据的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。②条件缓冲溶液维持溶液的pHDNA母链提供DNA复制的模板2种引物使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸耐高温的DNA聚合酶催化合成DNA子链4种脱氧核苷酸合成DNA子链的原料耐高温的DNA聚合酶——TaqDNA聚合酶。③步骤过程说明图解变性当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链复性温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合延伸72℃左右时，在耐高温的DNA聚合酶的作用下，可使DNA新链有5’端向3’端延伸每次循环一般可以分为三步。目的基因的数量：目的基因的数量呈指数形式增长，扩增循环n次，DNA的数量约为2n。仪器：PCR扩增仪PCR产物鉴定：常用琼脂糖凝胶电泳。基因表达载体的构建（1）目的：使目的基因在受体细胞中存在，并且给下一代，同时使其能够和作用。（2）基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子、复制原点以及标记基因等。组成功能启动子一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，紧挨转录的起始位点，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。终止子一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的下游，使转录在所需要的地方停下来。标记基因一般是抗生素抗性基因，还有发光基因、产生特定颜色的表达产物的基因等，用来筛选、鉴别受体细胞是否含有目的基因。（3）基因表达载体的构建模式图将目的基因导入受体细胞（1）导入植物细胞常用的方法①法②法a.转化：进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持和的过程。b.农杆菌的特点：农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的上。c.原理：将目的基因插入的中，通过的转化作用，使目的基因进入细胞。（2）导入动物细胞的方法①受体细胞：②常用方法：③程序将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→获得受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成具有新性状的动物（3）导入原核细胞的方法①方法：②程序【微点拨】【微点拨】Ca2+处理细胞，使细胞膜的通透性发生改变。目的基因的检测与鉴定（1）分子水平的检测①检测目的基因是否插入或是转录出mRNA：等技术。②检测目的基因是否翻译成相应的蛋白质：提取受体中的蛋白质，用相应的抗体进行。（2）个体生物学水平的鉴定对目标性状进行鉴定，如进行。如通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性以及抗性的程度。DNA的粗提取与鉴定实验原理DNA不溶于，但某些蛋白质溶于，利用这一原理，可初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中不同，它能溶于的NaCl溶液。DNA+蓝色。实验步骤【微点拨】【微点拨】研磨液中的部分成分及功能SDS（十二烷基硫酸钠）：可使细胞核内的蛋白质变性与DNA分离。EDTA（乙二胺四乙酸）：一种DNA酶抑制剂，防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。Tris（三羟甲基氨基甲烷）：提供使DNA呈稳定状态的缓冲体系。提取DNA：玻璃棒上卷着的丝状物是用冷却的酒精析出的DNA。实验注意事项破碎细胞应彻底、充分。酒精必须经过充分后才能使用。实验过程中，搅拌时玻璃棒直插烧杯底部，并且搅拌要，并沿搅拌以便获得较完整的DNA分子。将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中时，需要不断搅拌以增加溶解的DNA的量。二苯胺试剂要，否则会影响鉴定的效果。考法1基因工程及基本操作程序对基因工程概念的理解基因工程的别名重组DNA技术操作对象基因操作水平分子水平原理基因重组优点能克服远缘杂交不亲和的障碍，能定向改造生物性状几组概念的辨析黏性末端和平末端（2）限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切开DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶或耐高温的DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸将单个脱氧核苷酸依次连接到DNA单链3’末端DNA（水解）酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA将双链DNA分子局部解旋为单链RNA聚合酶磷酸二酯键和氢键核糖核苷酸将单个核糖核苷酸依次连接到单链RNA3’端关于限制酶的分析切割目的基因和载体时用同种限制酶的原因：产生相同的黏性末端。也可用不同的限制酶切割，但产生的黏性末端必须互补。作为载体必须具有多个限制酶切位点，而且每种酶的切点最好只有一个，原因是一种限制酶一般只能识别单一酶切位点，若载体上有一个以上的同种酶切位点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制原点，则基因表达载体进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有限制酶的一个酶切位点，则酶切后既能把环打开以接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。要获取一个目的基因，需用限制酶剪切目的基因的两端，共产生4个黏性末端或平末端。限制酶的选择依据①根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，以便将目的基因“切出”，可选择图中的PstI。不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，以防破坏目的基因，故不能选择图中的SmaI。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因及质粒，如图中的PstI和EcoRI。②根据质粒的特点确定限制酶的种类③根据Ti质粒的TDNA片段确定限制酶的种类（设切割目的基因的限制酶为XbaI和SacI）图中甲、乙、丁Ti质粒均不宜选取，而丙Ti质粒宜选取。（2023•云南二模）下列有关重组DNA技术的基本工具的叙述，正确的是（）A．限制酶能够识别RNA分子的特定核苷酸序列 B．携带外源DNA片段的质粒可在受体细胞中进行复制 C．DNA连接酶不能连接双链DNA片段的平末端 D．DNA连接酶能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键（2023•古冶区校级一模）载体是基因工程中携带外源DNA片段（目的基因）进入受体细胞的重要运载工具，常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。如图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程示意图，下列相关叙述正确的是（）A．重组载体A、重组载体B分别是基因表达载体和基因克隆载体 B．载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因 C．必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间 D．培养细菌A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异（2023•厦门模拟）如表为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置（箭头所指），下列叙述正确的是（）限制酶种类序列及切点限制酶种类序列及切点①：EcoRⅠ5′﹣G↓AATTC﹣3′3′﹣CTTAA↑G﹣5′③：BglⅡ5′﹣A↓GATCT﹣3′3′﹣TCTAG↑A﹣5′②：BamHⅠ5′﹣G↓GATCC﹣3′3′﹣CCTAG↑G﹣5′④：NotⅠ5′﹣GC↓GGCCGC﹣3′3′﹣CGCCGG↑CG﹣3′A．①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端 B．① C．②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割 D．构建基因表达载体时，用②、③进行双酶切，可防止目的基因与载体的反向连接（2023•杭州模拟）研究人员用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，图1为EcoRⅠ切割该DNA分子后的结果；图2是酶切后的凝胶电泳图谱，其中1号泳道是DNAMarker，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（）A．据图1可知EcoRⅠ的识别序列为﹣GAATTC﹣，切割位点在G和A之间 B．据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在B端，且连着电泳槽的负极 C．据图2可知该DNA分子最可能是含1000个碱基对的环状DNA D．据图2可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个（2023•福建模拟）2022年1月7日，马兰里医学中心成功将猪心脏移植到一名57岁的心脏病患者身上，虽然这颗心脏仅仅存活了2个月，但仍然为异种器官移植的可行性提供了可观的数据。为了降低免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。下列说法错误的是（）A．若要对一个基因进行编辑，则通常至少需要设计两个序列不同的sgRNA B．sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键 C．有时sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低D．为降低免疫排斥反应，可通过CRISPR/Cas9技术敲除相关抗原蛋白基因（2023•南充模拟）大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程、细胞工程等现代生物技术，培育出了铁含量比普通水稻高60%的转基因水稻，改良了大米的营养品质。如图为培育转基因水稻过程示意图，其中①～⑥为过程，EcoRⅠ，HindⅢ，BamHⅠ为限制酶。（1）完成图中①过程需选用限制酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA。（2）②过程中用处理农杆菌，使其成为感受态细胞。农杆菌转化法的原理是：在农杆菌的Ti质粒上存在片段，它具有可以整合到受体细胞上的特点，使目的基因进入植物细胞并稳定存在和表达。为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要加入。（3）图中过程，属于植物组织培养技术，该技术依据的基本原理（理论基础）是。（2023•平度市模拟）北极比目鱼体内有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图。下列有关叙述错误的是（）A．过程①获取的目的基因含有启动子和终止子 B．过程②涉及磷酸二酯键的断裂与形成 C．农杆菌Ti质粒中T﹣DNA可将抗冻基因导入番茄细胞 D．抗冻番茄植株中抗冻基因与比目鱼体内抗冻基因碱基序列可能不同（2023•辽宁二模）为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb＝1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点如表，phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。转化后的大肠杆菌提取质粒，再用选中的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2。下列叙述错误的是（）相关限制酶的识别序列及切割位点（注：箭头表示切割位点）名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRⅠG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstⅠGA↑CGTCGA↑CGTCKpnⅠG↓GATCCCCATG↑GBamHⅠG↓GATCCCCTAG↑GA．需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因 B．为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列 C．经过两种限制酶酶切的phb2基因与载体进行连接时，可选用T4DNA连接酶 D．图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒31．（2023•广东二模）二倍体马铃薯受核糖核酸酶基因（S﹣RNase）影响，普遍存在自交不亲和的现象一一自交不产生种子，我国科研人员通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除了马铃薯的S﹣RNase基因，获得自交亲和的二倍体马铃薯如图示该技术的原理：由一条单链向导RNA引导内切核酸酶Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割。下列叙述错误的是（）A．向导RNA和S﹣RNase基因识别结合的碱基互补配对方式与目标DNA双链中的碱基互补配对方式相同 B．Cas9蛋白可催化磷酸二酯键水解，剪切特定DNA片段 C．可让马铃薯自交看能否产生种子，从个体水平上检测该基因编辑技术是否成功 D．向导RNA的序列越短，该基因编辑技术在编辑对象时出错的概率就越高33．（2023•通许县三模）研究表明，服用α﹣干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。人参是一种名贵药材，具有较好的滋补作用。限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的识别序列及切割位点分别为↓GATC、G↓AATTC、C↓GATCC。含干扰素基因的DNA片段如图1所示，图2为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程图，①～④表示相关的操作。请回答下列问题：（1）结合上图，在构建基因表达载体时，为克服目的基因和农杆菌Ti质粒的自身环化以及目的基因与质粒的任意连接等，应选择用限制酶处理含某目的基因的DNA和质粒。（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是。（3）图2操作①常利用PCR技术获取和扩增干扰素基因，除含有干扰素基因的DNA片段之外，该过程需要提供以及与干扰素基因两端两条模板链结合的两种引物。设计引物时，为了保证目的基因与质粒顺利连接，防止出现自身环化连接，需要在两种引物的一端分别加上EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列。（4）图2步骤②除EcoRⅠ、BamHⅠ两种酶外，还需要用酶。构建的基因表达载体除含有目的基因片段以外，还必须有，以保证干扰素基因能在人参愈伤组织细胞中稳定存在和表达。同时，还应含有标记基因以便于。（5）图2操作④常用技术检测干扰素基因是否成功表达出干扰素。考法2（实验）DNA的粗提取与鉴定（2023•上虞区模拟）关于“DNA的粗提取和鉴定”实验，下列说法正确的是（）A．研磨时倒入的研磨液，是为了破坏细胞壁 B．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀 C．在DNA提取物中加入二苯胺，迅速呈现蓝色 D．提取DNA时要用玻璃棒沿一个方向缓缓搅动（2023•山东模拟）下列与DNA粗提取和鉴定有关的叙述，错误的是（）A．预冷的酒精容易使DNA析出 B．DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液中 C．若提取出白色丝状物，说明DNA中杂质少 D．可用碱性染料甲紫鉴定提取出来的DNA考法3PCR的基本操作和应用物质条件引物：PCR所用的引物是一小段单链RNA或单链DNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。DNA复制之所以需要引物，是因为DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3’端延伸DNA链。PCR的引物通常由20~30个核苷酸聚合而成，引物的量需保证满足几十次循环反应的需要。DNA聚合酶：PCR中所用的酶是一种从嗜热菌中分离得到的耐高温的DNA聚合酶，高温条件下不会失活。反应体系中加入Mg2+，可以使酶催化的活化能更加降低，使得反应能够进行得更加容易。PCR扩增与DNA复制的比较PCR扩增DNA复制不同点场所在体外的反应缓冲液中进行在体内的活细胞内进行解旋方式高温变性解聚解旋酶解旋扩增过程完全解聚再复制，分为变性、复性（或退火）和延伸三个步骤边解旋边复制引物DNA或RNARNA结果短时间内形成大量的DNA片段形成的是整个DNA分子相同点①都需要DNA模板、DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸等成分；②都遵循碱基互补配对原则，有解聚和延伸过程，子链延伸的方向都是从5’端到3’端；③都属于半保留复制；④结果都使DNA数量呈2n的指数式扩增PCR的应用分析人的血液，对细菌、病毒感染情况进行早期诊断。用于遗传病的基因诊断与基因治疗。用于鉴别犯罪嫌疑人、亲子鉴定。分析生物化石样品，追溯其生存年代或迁徙踪迹。检测目的基因是否已经插入目标生物染色体DNA和目的基因是否转录出mRNA。PCR产物的电泳鉴定：一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。①电泳概念：DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷，在电场作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动。②电泳原理：在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。（2023•沧县校级模拟）基于聚合酶制造的PCR仪实际上是一个温控设备，能在变性温度、复性温度、延伸温度之间很好地进行切换，主要过程如图所示。下列有关叙述错误的是（）A．实施上述过程的前提是已知目的基因的一段核苷酸序列 B．图中a、b、c过程控制的温度由高到低依次是过程a、c、b C．耐高温的DNA聚合酶沿着5'→3'的方向合成互补子链 D．c延伸过程中需要缓冲溶液、ATP和四种核糖核苷酸（2023•肥城市模拟）通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是（）A．在PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸、解旋酶、Taq酶等B．第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因C．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入运载体 D．第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占（2023•湖北模拟）乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质，由乳酸脱氢酶催化产生，影响白酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因（PD）替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因（L﹣PG），可获得乳酸乙酯高产菌株，该过程如图所示。下列说法不正确的是（）A．可借助序列数据库（GenBank）等查询L﹣PG基因的序列和功能 B．可以利用PCR技术筛选导入了L﹣PG基因的受体细胞 C．酵母菌PD基因被替换为L﹣PG基因的过程中发生了基因重组 D．电泳鉴定L﹣PG基因时，当观察到核酸染料迁移至凝胶边缘时，停止电泳（2023•博白县模拟）细菌病的防治一直是困扰人类的难题之一，特别是长期使用抗生素，许多细菌产生了明显的耐药性。通过基因工程和胚胎工程生产抗菌肽，是研制新型抗菌药物的有效途径。回答下列问题：（1）生产抗菌肽所需的抗菌肽基因，可用技术大量扩增。扩增过程中需要将温度冷却至55～60℃，这步叫复性，目的是。获得大量抗菌肽基因后，为了使其和质粒能正确地成功拼接，一般操作方法是用切割含抗菌肽基因的DNA片段和质粒。（2）抗菌肽基因导入受体细胞后，可利用放射性同位素标记的目的基因的DNA片段作为，目的是检测。（3）一般科学家将抗菌肽基因导入受精卵，以培育出能产生抗菌肽的转基因动物，请分析选择受精卵作为受体细胞的原因是。（4）受精卵在体外培养到早期胚胎过程中，需用培养液培养。早期胚胎发育到适宜的时期再将胚胎移植到代孕母体的子宫里，用这种方法得到的动物称为（填“克隆动物”或“试管动物”）。（2023•厦门模拟）如图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是（）A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板 B．PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制 C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③ D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经2次循环才可获得该序列的双链产物（2023•滨州二模）巢式PCR是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为：先以比目的基因大的DNA片段为模板，用外引物（F1，R1）进行扩增，获得大量含目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，用内引物（F2，R2）扩增目的基因，如图所示。下列说法错误的是（）A．PCR反应缓冲液中Mg2+的作用是激活DNA聚合酶 B．与传统PCR相比，巢式PCR能有效提高产物中目的基因的比例 C．由于和两套引物都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性 D．如果两套引物一起加入反应体系中，外引物的复性温度应显著低于内引物（2023•大东区校级四模）单分子荧光测序技术原理如图所示。某种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）提供一个相应的脱氧核苷酸连接到DNA子链上的同时，会产生一分子的焦磷酸（PPi），一分子的PPi可以通过一系列反应使荧光素发出一次荧光，通过检测荧光的有无可推测模板链上相应位点的碱基种类。下列说法错误的是（）A．