益智麻痹方对血管性痴呆患者细胞亚群及血浆超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

益智麻痹方对血管性痴呆患者细胞亚群及血浆超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

为了进一步探索智力聪明治疗血管性迷宫的功能机制，作者在2002年6月至2007年10月对103名符合标准的血管性迷宫患者进行了双盲双模拟研究。随机分为智慧解放方组（治疗组）和脑康复组（对照组），治疗周期为3个月。主要观察了VD患者的T细胞亚群、SOD、MDA的含量变化,现报道如下。1般资料处理全部病例遵照美国精神病协会制定的精神障碍诊断和统计手册第4版(DSM-IV)及《中药新药治疗痴呆的临床研究指导原则》中有关VD的诊断和疗效标准执行。根据初次就诊先后,按区组随机化原则分为益智聪明方组(以下称治疗组)和脑复康组(以下称对照组)。治疗组51例,其中男28例,女23例;年龄最小41岁,最大72岁,平均(62.15±11.38)岁;病程最短5个月,最长5年,平均(3.58±0.79)年;病情程度:轻度25例,中度26例;其中有中风病史者31例,合并高血压者42例,冠心病者16例;CT或MRI证实有多发性脑梗死33例,合并有脑萎缩14例,皮质下动脉硬化性脑病11例;文化程度:文盲3例,小学17例,中学22例,大专以上9例。对照组52例,其中男30例,女22例;年龄最小40岁,最大71岁,平均(61.98±11.33)岁;病程最短6个月,最长6年,平均(3.21±0.78)年;病情程度:轻度26例,中度27例;其中有中风病史者32例,合并高血压者40例,冠心病者17例;CT或MRI证实有多发性脑梗死31例,合并有脑萎缩10例,皮质下动脉硬化性脑病12例;文化程度:文盲4例,小学18例,中学21例,大专以上10例。所有患者在治疗前后均未服用对胆碱酯酶抑制剂等对智力有影响的药物。两组患者的一般资料经统计学处理,在年龄、性别、病程、合并症、文化程度等方面无显著性差异(P>0.05)。15例正常人标本来自本院正常体检者,其中男8例,女7例;年龄最小40岁,最大70岁,平均(61.68±11.45)岁。2治疗和观察方法2.1基础治疗及加服两组患者均嘱其注意调整饮食结构并给予基础治疗。调整饮食结构包括:减少脂肪餐、忌烟限酒,给予低脂肪、富含营养易消化食物,少食多餐等;基础治疗包括:控制血压、抗血小板聚集、营养神经等对症治疗。治疗组加服益智聪明方(制首乌20g,天麻10g,胆南星10g,益母草15g,丹参15g,菖蒲10g,郁金10g,益智仁12g,枸杞15g,水蛭10g,地龙10g)水煎服,每日1剂,分2次服。对照组加服脑复康片(南京第二制药厂生产,批号:20030107),0.8g/次,每日3次。两组均以1个月为1个疗程,共3个疗程。2.2观察指标和方法2.2.1cd、cd、mda、cd、da、sod、mda的变化主要观察外周血T细胞亚群(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)、SOD、MDA的含量变化。并与15例健康人群作比较,以了解VD患者的SOD、MDA水平及T细胞亚群变化。2.2.2采集实验样本血液所有患者均于试验前1日及用药后第30天、60天、90天隔夜空腹采血8mL,进行测定。血样在相同实验条件下由同一实验人员操作完成。2.2.3细胞活性测定采用四色流式细胞仪测定T淋巴细胞总数及其亚群变化(单克隆抗体和流式细胞仪均购自美国BectonDickinson公司);采用羟胺氧化法测定SOD活性、硫代巴比妥酸法测定MDA含量(所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所)。操作由同一实验人员完成,严格按说明书进行。2.3统计学处理方法,统计学组间比较采用2检验计量资料所有数据以均数±标准差(x¯±s)(x¯±s)表示,自身前后比较采用配对t检验,组间比较采用t检验或方差分析,计数资料采用χ2检验。所有资料均采用SPSS11.0统计软件进行统计分析。3治疗效果3.1两组临床疗效比较治疗组基本控制6例,显效20例,有效18例,无效7例,总有效率为86.27%。对照组基本控制4例,显效13例,有效27例,无效8例,总有效率为84.62%,两组总有效率比较无统计学意义(P>0.05)。但治疗组基本控制和显效数26例(50.98%),优于对照组的17例(32.69%),两组比较有统计学意义(P<0.05),见表1。3.2两组患者免疫应答指标比较,者表1VD患者T细胞总数(CD+3)、抑制性T细胞(CD+8)、辅助性T细胞(CD+4)轻度下降,CD+4/CD+8比例下降。与健康人群比较有显著性差异(P<0.05)。治疗组治疗后CD+3、CD+4细胞明显增加、CD+4/CD+8比值上升,与治疗前比较均有显著性差异(P<0.05),CD+8细胞略有升高(P>0.05);对照组治疗后各项指标似乎有优于治疗前之趋势,但经统计分析,无显著性差异(P>0.05);治疗组与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。说明VD患者免疫调节功能低下,出现异常的免疫应答。服用益智聪明方后,患者的免疫调节功能得到明显改善,见表2。3.3常显著性差异p>0.0VD患者血液MDA水平明显升高,SOD水平明显降低,SOD/MDA比值降低,与健康人群比较有非常显著性差异(P<0.01)。两组患者治疗后血液MDA水平均有下降,SOD水平均有上升,SOD/MDA比值上升,与本组治疗前比较有显著性差异(P<0.05及P<0.01);治疗后治疗组与对照组比较,治疗组血浆SOD、MDA及SOD/MDA比值改善优于对照组(P<0.05),见表3。4抗氧化能力的变化机体维持正常的免疫功能状态赖于各种免疫细胞(特别是T细胞亚群)之间相互协作和相互制约,以产生适度的免疫应答,使之既能清除异物抗原,又不损伤机体组织。正常情况下CD+4和CD+8之间始终保持一个恒定比例,构成宿主细胞免疫调节的重要环节。任何一方过低或过高,调控网络失去平衡均可引起免疫紊乱,出现针对自身抗原的自身抗体和(或)自身反应性T细胞,补体水平低下,不能有效清除免疫复合物(immunecomplex,IC),形成IC沉积,干扰相应器官的正常生理功能,并激活补体,促进炎性介质如IL-6、TNF-α等的释放,造成血管内皮细胞损伤,从而引起动脉硬化。脑损伤可影响免疫功能,以损伤部位在丘脑影响最明显,表现为免疫应答受到抑制,其他部位如脑皮层、隔区、海马或杏仁核等的损伤也可抑制免疫功能。本研究结果显示:VD患者与健康人相比,CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8比例轻度下降。提示VD患者T细胞亚群比例及亚群间相互作用失调,机体免疫功能下降。用药后CD+3、CD+4、CD+8数目增加,CD+4/CD+8比值上升渐趋于正常。表明益智聪明方可以纠正机体的免疫调节功能,诱导机体免疫系统进行正常的免疫应答,减少炎性介质IL-6、TNF-α等的释放,从而发挥临床疗效。自由基是一个或多个不配对的原子或分子的总称。人体生理代谢即可产生自由基,但体内存在相应的自由基清除酶如SOD,通常情况下,机体自由基的生成与清除之间保持着动态平衡,不发生自由基连锁反应和组织损伤。但在组织损伤如脑缺血等病理情况下,自由基生成增多,且自由基清除酶活性降低,动态平衡破坏,启动自由基连锁反应,造成组织缺血损伤进一步恶化,导致神经元死亡,相应智能缺损。MDA是脂质过氧化物反应的主要降解产物,是体内自由基水平及其影响的反映;SOD是体内重要的自由基清除酶,能促使超氧阴离子氧化为过氧化氢和氧离子,其活性高低与体内过氧化物含量密切相关,且该酶作为一种诱导酶,在细胞受到过氧化损伤时可诱导产生,使机体细胞和组织免受损害,基本代表了组织清除氧自由基的能力。许多研究资料认为老年期痴呆与自由基关系密切,血管性痴呆患者因脑缺血缺氧,引起细胞膜及细胞器发生脂质过氧化,释放大量的自由基,导致SOD降低,产生大量的MDA,而针灸及中药治疗可使SOD活性增高,LPO减少,从而增加机体清除自由基的能力,阻止其对机体的进一步损伤。本研究资料结果显示,VD患者血浆MDA含量显著升高,SOD含量显著下降,SOD/MDA比值下降,与健康人群比较有非常显著性差异(P<0.01)。而治疗后治疗组则能显著升高SOD活性,降低MDA的水平,且上调SOD/MDA比值,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。研究认为单纯根据SOD或MDA的单项指标的变化不足以反映机体的抗氧化能力,必须两者综合考虑,即SOD/MDA