我院产esbls肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药性分析

我院产esbls肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及耐药性分析

目前，影响革兰氏阳性细菌的主要问题之一是细菌超广谱——内酰胺酶（esb）。ESBLs最常见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,这两种细菌是医院内常见的条件致病菌,他们的ESBLs发生率逐年增加,在中国重症监护病房产ESBLs肺炎克雷伯菌和产ESBLs大肠埃希菌从1994年的12%和10%分别增到2000年的30%和25%,同时在产ESBL菌的质粒上往往还携带着对其他抗菌药物耐药的基因,给临床治疗带来困难。笔者对1999年1月至2003年12月我院分离的126株产ESBLs肺炎克雷伯菌和322株产ESBLs大肠埃希菌的分布及对抗菌药物的耐药情况进行研究,现报道如下。1数据和方法1.1产esbls肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的筛选来自我院1999年1月~2003年12月临床送检标本(每个患者只选第1株)中,分离的产ESBLs大肠埃希菌322株和产ESBLs肺炎克雷伯菌126株,大肠埃希菌ATCC25722和ATCC35218及肺炎克雷伯菌ATCC700603作为质控菌。1.2用抗生素纸和培养基17种抗菌药物的纸片为Oxoid公司(英国)产品或购自北京天坛生物制品检定所,培养基为Oxoid公司(英国)产品。1.3iewell鉴定使用常规方法或VITEK系统(法国Bio-Merieux)进行鉴定。ESBLs确认根据NCCLS推荐的双纸片协同试验,或用头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸,确认试验确认。1.4抗癫痫药物的敏感试验和结果分析采用K-B法,操作及结果判断参考NCCLS2003年标准,应用WHONET5.3和EXCEL软件分析结果。2结果2.1超谱-内酰胺酶1999~2003年产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分离率,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生超广谱β-内酰胺酶的问题日益严重,我院自从1999年以来,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌已从14.0%上升为30.1%,肺炎克雷伯菌从15.0%上升为34.5%。2.2希菌和产esbls肺炎克雷伯菌的耐药情况产ESBLs肺炎克雷伯菌和产ESBLs大肠埃希菌在不同标本中的分布,产ESBLs大肠埃希菌和产ESBLs肺炎克雷伯菌在血中分别为30.2%和30.4%。尿中产ESBLs的肺炎克雷伯菌(28.4%)明显高于产ESBLs的大肠埃希菌(16.6%),痰中产ESBLs的肺炎克雷伯菌(21.3%)明显低于产ESBLs的大肠埃希菌(34.1%)。见表1。2.3不同年龄组肺炎克雷伯菌发生esbls的情况产ESBLs肺炎克雷伯菌和产ESBLs大肠埃希菌在不同年龄组的分布,在21~30岁年龄组中肺炎克雷伯菌发生ESBLs最高为34.8%,产ESBLs大肠埃希菌在81~90岁年龄组中分离率最高为36.7%。见表2。2.4esbls的耐药基因产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌在不同病区的的分离率,门诊患者产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为19.8%和14.0%;住院患者产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为26.6%和31.6%,在住院患者中ICU的ESBLs发生率最高为43.5%和52.4%。见表3。2.5尿标本中耐药情况不同标本中产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,对17种抗菌药物的耐药率,血液标本中大肠埃希菌一旦产生ESBLs与呼吸道标本和尿标本中产生的ESBLs大肠埃希菌,对17种抗菌药物的耐药性无明显差别,耐药率相似。尿标本中的ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌除对头孢哌酮/舒巴坦(85.0%,65.2%)和哌拉西林/他唑巴坦(66.6%,29.4%)耐药性不同外,对其他抗菌药物的耐药率差别不大,且尿中的产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物环丙沙星(87.5%,91.3%)和左氧氟沙星(82.4%,87.9%)耐药率一样高。在呼吸道标本中的ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦(42.9%,25.9%)、环丙沙星(39.7%,87.9%)、左氧氟沙星(45.5%,91.5%)、庆大霉素(46.8%,73.0%)、阿米卡星(20.9%,13.8%)和复方新诺明(52.4%,85.4%)的耐药率各不相同。见表4。3耐药耐药基因ESBLs1983年首先在德国发现,是丝氨酸蛋白酶的衍生物,是存在于细菌中的酶,是细菌染色体外的蛋白质,它水解β-内酰胺环,尤其是头孢他啶、头孢噻肟和氨曲南等广谱头孢菌素,可通过质粒形式在细菌之间传播。ESBLs目前是革兰阴性菌耐药的主要原因之一。我院1999~2003年的5年间,在血中产ESBLs肺炎克雷伯菌和产ESBLs大肠埃希菌分别为30.4%和30.2%。门诊患者中产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为19.8%和14.0%,21~30岁年龄组中ESBLs肺炎克雷伯菌的发生率最高为34.8%,81~90岁年龄组产ESBLs大肠埃希菌分离率最高为36.7%。这同门诊患者在医院就诊前就已使用过抗生素有关,另外是否与Weinstein研究中发现的芝加哥老人疗养院内,半数老人的胃肠道可分离到具有ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的研究结果相同有待证实。不同类型的ESBLs对不同的三代头孢有着不同的活性。如TEM-3可使头孢噻肟及头孢他啶都失活。TEM-10对头孢噻肟敏感,对头孢他啶耐药。CTX-M型的ESBLs都对头孢他啶敏感,头孢噻肟耐药。目前我国已报道在不同地区出现了大量的(CTX-M型)酶,它是水解头孢噻肟、头孢曲松、头孢地尼、头孢克尼、头孢波肟等,但对头孢他啶稳定。该结果显示,不同标本中产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对头孢他啶的体外敏感性为30%~50%不等,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感性约为3%,说明在这些菌中是以CTX-M型酶为主,以往认为CTX-M酶与头孢噻肟使用大幅度增加有关,但在我院头孢噻肟的使用量明显少于头孢他啶的使用量,而头孢曲松使用多于头孢他啶,1999~2002年4年中,头孢噻肟和头孢曲松的总使用量是头孢他啶的1.38倍,而头孢曲松和头孢噻肟的化学结构类似的同一类药物。产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌目前没有对亚胺培南产生耐药,对阿米卡星的耐药性均<20%;在不同标本的ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中对头霉素中的头孢西丁约有13%~47%的耐药,说明这些菌的耐药质粒不但携带对ESBLs的耐药基因,还同时产生了质粒型头孢菌素酶(AmpC酶),例如DHA型酶和CMY型酶,在其他相关性研究中已得到证实(文章待发表)。由于产生ESBLs的菌株对酶抑制剂及所有三代以上头孢类抗菌药物不敏感,且