阳桃根多糖对糖尿病小鼠血清胰岛素及胸腺、脾脏指数的影响

阳桃根多糖对糖尿病小鼠血清胰岛素及胸腺、脾脏指数的影响

糖尿病是一种代谢性疾病，与胰岛素的产生和作用异常有关，主要表现为糖皮质激素。由于植物多糖在自然界分布广泛,资源丰富,具有多种生物活性,毒副作用小,已成为天然降糖药物开发的热点之一。大量研究已表明许多植物多糖具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤及免疫调节活性。本文主要探讨了阳桃根多糖(AverrhoacarambolaL.rootpolysaccharide,ACLRP)对链脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖、胰岛素及胸、脾指数的影响。1材料和方法1.1材料表面1.1.1阳桃根多糖的制备链脲佐菌素(STZ):深圳晶美公司进口分装,ProductID:380-010-G001;格列本脲:浙江南洋药业有限公司,规格2.5mg/片,批号:20060302;阳桃根多糖由本实验组制备;血糖检测试剂盒:四川省迈克科技有限责任公司,生产批号:0507031;胰岛素放射免疫分析试剂盒:北京北方生物技术研究所,批号0710201。1.1.2动物昆明种小鼠,SPF级,体重(22±2)g,由广西医科大学实验动物中心提供,试验动物生产许可证:SCXK(桂)2003-0003。1.1.3微波真空干燥机722S可见分光光度计(上海精密科学仪器有限责任公司);微波真空干燥机(WBZ-2,贵阳新奇微波工业有限责任公司);GC-1200γ放射免疫计数盒(中国科学技术大学科技实业总公司中佳光电仪器分公司)。1.2方法1.2.1阳桃根多糖的提取阳桃根碎片500g用70%乙醇提取后的残渣,晾干,分别加5,4,3L水,回流提取3次,每次2h、1.5h、1h,滤过,合并滤液,离心,取上清液于真空微波干燥器中浓缩后加3倍体积的95%乙醇进行醇沉,搅拌混匀,4℃冰箱保存,静置24h,重复2次,去上清液,沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤5次,真空干燥得阳桃根多糖。1.2.2模型的确定和分组采用链脲佐菌素(150mg·kg-1)一次性腹腔注射禁食12h后的实验小鼠,3d后,小鼠禁食12h,眼内眦取血,采用葡萄糖氧化酶法测空腹血糖,选择空腹血糖高于11.1mmol·L-1者确定为糖尿病模型。将造模成功的40只小鼠随机分为模型对照组(Modelgroup)、格列本脲组(Glibenclamidegroup)、阳桃根多糖高、低剂量组(ACLRP-H,ACLRP-L);另随机选择10只健康小鼠做正常对照组(Normalgroup)。格列本脲组以25mg·kg-1.d-1灌胃,阳桃根多糖以高剂量249mg·kg-1.d-1、低剂量124.5mg·kg-1·d-1灌胃,正常对照组、模型对照组每天给予生理盐水灌胃,各组均按10ml·kg-1给药,每天1次,连续14d。1.2.3小鼠胰岛素活性测定①空腹血糖(fastingbloodglucose,FBG)分别于灌胃给药后第0,7,14天将小鼠禁食12h,眼内眦取血,测定小鼠空腹血糖;②空腹血清胰岛素(fastingbloodseruminsulin,FBSI)小鼠灌胃给药d14,禁食12h,拔眼球取血,用竞争放射免疫法测定小鼠空腹血清胰岛素水平,并计算出小鼠胰岛素敏感指数(Insulinsensitivityindex,ISI)。③胸腺、脾指数(IndexofThymus、Spleen)给药14d后,处死小鼠,解剖取胸腺和脾脏,用生理盐水洗净,滤纸擦干,称重,分别计算胸腺、脾指数。采用统计软件SPSS15.0对实验数据进行分析,结果以表示,统计学处理用方差分析和t检验,P<0.05有统计学意义。2结果2.1降血糖作用比较与模型组比较,阳桃根多糖高、低剂量组有明显的降血糖作用(P<0.01)。其血糖下降百分率分别达到35.35%和33.39%。结果见表1。2.2各组小鼠输注后胰岛素敏感指数的比较阳桃根多糖高、低剂量组小鼠的空腹血清胰岛素明显低于糖尿病模型组小鼠(P<0.01),而阳桃根多糖高、低剂量组小鼠的胰岛素敏感指数明显高于糖尿病模型组小鼠(P<0.01)。结果见表2。2.3小鼠脏器重量、尾腺指数、脏器指数变化的比较阳桃根多糖高、低剂量组小鼠的胸腺、脾脏重量明显高于模型组小鼠的重量(P<0.01);其胸腺指数及脾脏指数也明显高于模型组(P<0.01)。结果见表3。3阳桃根多糖对糖尿病小鼠血糖状态的影响随着人们生活水平的提高,人口老龄化以及肥胖发生率的增加,糖尿病的发病率呈逐年上升趋势。糖尿病可能引发多种并发症,对人体的危害仅次于肿瘤和心血管疾病。国外发病高峰年龄是65岁以上,而在我国提早到45岁发病,呈低龄化趋势。糖尿病的病因是复杂的,但归根到底是由于胰岛素绝对缺乏,或胰岛素抵抗导致的相对缺乏而引起的。本研究利用STZ选择性破坏小鼠胰岛β细胞,导致机体内胰岛素分泌不足,使血糖值持续稳定升高而建立糖尿病模型,探讨阳桃根多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用及其对胰岛素、胸腺、脾脏的影响。结果表明糖尿病模型小鼠经阳桃根多糖治疗14d后,阳桃根多糖高、低剂量组对改善糖尿病小鼠的高血糖状态有良好的作用;阳桃根多糖在一定程度上降低血清胰岛素水平,提高机体胰岛素敏感指数,说明该药具有降血糖作用,其机制可能为增强机体对胰岛素的敏感性以及改善胰岛β细胞的分泌。免疫力下降是糖尿病的显著特征,在高血糖状态下,机体对胰岛多种抗原成分失去耐受,主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ类分子与其处理的β细胞抗原共同激活辅助性T淋巴细胞中的Th1亚群,抑制Th2亚群,导致细胞因子不平衡,进而激活细胞毒性T细胞(CTL)、巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK),从而产生氧自由基、一氧化氮等,对胰岛β细胞产生直接毒性,最终加速糖尿病及其并发症的发生、发展。胸腺是T淋巴细胞分化成熟的中枢免疫器官,而脾脏是体内最大的淋巴器官,也是具有免疫活性的T、B细胞移居和接受抗原刺激后产生免疫应答的重要场所,因此胸腺指数和脾指数是衡量免疫功能的重要指标。大量的研究已证明多糖具有肯定的抗肿瘤、激活免疫细胞、调节机体免疫功能的作用。本研究结果也证实了,经阳桃根多糖治疗后的糖尿病小鼠胸腺指数及脾指数均有明显提高,说明阳桃根多糖对糖尿病小鼠的