抗酸杆菌检验的检测方法及结果分析

抗酸杆菌检验的检测方法及结果分析

尽管采取了巨大努力，但世界范围内审查的严峻形势尚未得到根本控制。结核病是威胁人类健康的重要疾病,成为全球的负担。我国现有450万结核病人,每年新增130万结核病人,死亡人数达13万。在2/3的活动性病人中,有近3/5的痰结核菌阳性病人在流行病学调查前未能被发现,而继续活动于社会公共场所,给人群造成巨大威胁。对结核病及时准确的诊断和治疗,是消除传染源、控制结核病流行的重要环节。随着分子生物学及免疫学技术的开展,多种结核病的诊断技术如聚合酶链反应(PCR)、血/痰或脑脊液中结核抗体、免疫胶体金技术、结核杆菌感染T细胞斑点试验(TBELISPOT)技术等已经逐步或即将进入临床。但是,在常用肺结核诊断技术中,主要方法仍是痰涂片染色镜检结合X线胸片检查,继以结核分枝杆菌培养确认。痰结核分枝杆菌培养阳性是诊断肺结核病的金标准,也是确定结核病患者化疗方案及疗效考核的的重要依据。加强痰标本检查的质量控制,提高结核杆菌检出率,是做好结核病防治工作的重要保证。1细菌检查法结核杆菌属分枝杆菌,涂片染色具有抗酸性,也称抗酸杆菌。抗酸杆菌检查方法有厚涂片、薄涂片、24h沉淀或漂浮法集菌涂片和培养法。痰涂片抗酸染色镜检因其快速、简便、费用低,而成为临床上常用的病原菌检查法。直接厚涂片阳性率优于薄涂片,为目前普遍采用的方法。24h沉淀或漂浮法集菌涂片也具有简易、阳性率高的优点,但时间较长,对及时诊断及治疗有一定影响。2影响粘液试验阳性率的因素抗酸杆菌检出率受多种因素影响,认识把握好检查过程的各个环节是提高抗酸杆菌检出率可靠保证。2.1职业人群抗酸杆菌阳性检出率变化情况周开真和胡玉霞分别对667份和768份送检检测抗酸杆菌的痰标本阳性率进行分析,发现抗酸杆菌阳性检出率在不同职业人群中差异无统计学意义,与性别和年龄也无关系。2.2抗酸杆菌的痰标本来源肺结核病人体内抗酸杆菌主要存在于肺部病灶坏死组织中,病人以排痰的方式把抗酸杆菌排出体外,因此,供抗酸杆菌检验的痰标本应是来自于下呼吸道的分泌物或病灶及空洞内的痰液,抗酸杆菌检出率才会较高。如标本留取的不合格,来自于上呼吸道的痰液,主要是口腔分泌物即唾液,故痰菌检出率就会较低。2.3痰标本留取不合格痰标本质量的优劣,直接影响痰菌检出率,阳性率的高低又决定着临床诊治等一系列问题。在日常工作中,经常可遇到痰标本留取不合格而被退回的情况。发生在标本留取后不及时送检,送到化验室后因为要统一处理,中间又需耽搁一定时间,从而影响检查结果。2.4两组病员所总痰量及阳性痰标本检测结果周建华等对3090份痰标本不同咳痰时间的阳性率和全部阳性痰标本按不同咳痰时间的菌量分布进行了回顾性分析,结果发现在570份阳性痰标本中,即时痰、夜间痰、清晨痰,其菌量分布差异有统计学意义。分析显示夜间痰的阳性检出率高于即时痰,二者差异有统计学意义;清晨痰的阳性检出率较即时痰更高,二者差异有统计学意义。阳性痰标本的菌量分布以1+比例最大,随着菌量增加,阳性痰标本数呈递减趋势。但最大菌量(4+)的痰标本中,以清晨痰所占比例数大,说明肺结核病人清晨痰的含菌量是最多的,因而检出率最高。这为临床强调清晨痰的送检提供了依据。此外,睡眠过程中机体反射性降低,咳嗽减少,早晨醒来后意识恢复,咳嗽较多,此时将一夜中留在呼吸道的痰咳出,可以说是采取了整夜的痰,所以清晨痰含菌量多,检出率较高。2.5痰液标本类型的影响抗酸杆菌的检出率与痰标本的性质存在密切关系。不同性状痰标本抗酸杆菌有一定差异。虞吉寅等通过对339份阳性标本按痰菌密度进行分类,结果显示不同性状的痰液标本对痰检出率有影响,分析发现脓痰、干酪样痰与血痰、泡沫痰之间的阳性率差异有统计学意义。脓痰、干酪样痰的痰检阳性率要远远高于血痰、泡沫痰,痰菌密度也要明显高于血痰、泡沫痰。说明痰液标本的性状是影响痰检阳性率的重要因素,在指导病人留痰时务必要留取脓痰、干酪样痰。2.6肺结核病痰标本的查痰次数肺结核的诊断要求对初诊疑似病例送检3份痰标本(夜间痰、清晨痰和即时痰),如无夜间痰,在清晨痰后二三小时再留取1份痰标本,或在送痰时,留取2份即时痰。治疗中或复诊随访病人按期每次送痰2份(清晨痰和夜间痰)。刘梅枝回顾性地对320例肺结核病人1284份痰标本的查痰次数与痰抗酸杆菌阳性率的实验室观察进行分析,将查痰次数分为1、2、3及多次,发现随着查痰次数的增多,痰抗酸杆菌检出率也随之升高,查痰1次与诸次之间差异有统计学意义,查痰2次以上各检出率差异无统计学意义。所以,认为应鼓励多次查痰,在实际工作中以查痰二三次较合适。3采取各种干预措施，提高抗酸菌阳性检出率3.1冠心病留痰的作用医务人员可利用各种结核宣传资料和手段使患者充分理解结核病留痰在拟定化疗方案、考核疗效及预防传播方面的重要作用。能正确接受痰检查,确保留痰质量,减少排菌患者漏诊。3.2注意事项及技巧重视痰液的收集工作,把好痰标本的质量的关。在发送痰标本盒时,向病人讲解在留取痰标本时的注意事项及正确的留取方法和技巧:①容器采用新蜡盒,用后可焚烧处理;②取深部咳出的晨痰,量约二三口,或3～5ml,仔细选择可疑部分;③为避免痰液液化分解导致漏检,痰标本采集后应及时送检,保证痰液标本的新鲜。以提高痰标本质量,确保抗酸杆菌检出的阳性率。3.3吸痰清痰法告诉患者正确的留痰时间。一般在清晨起床后漱口,先深吸一口气,再用力咳嗽,咳痰二三口入痰标本盒内,并强调避免鼻腔分泌物和唾液,要连续查痰二三次。对于间断排菌者,每月至少查痰2次,甚至更多。3.4红重色、采取的不良反应由于痰液标本的性状是影响痰检阳性率的重要因素,在临床工作中要对病人特别是初诊病人进行指导,尽量留取红棕色、脓性的和干酪样痰。这些部分痰含菌量多,阳性率也就会高。3.5痰样的送痰、送痰对初诊疑似肺结核病人应送3份痰标本(夜间痰、清晨痰和即时痰)。如无夜间痰,在清晨痰后二三小时再留取1份痰标本,在送痰时留取2份即时痰。治疗中或复诊随访病人按期每次送痰2份(清晨痰和夜间痰)。要告知病人不能因为学习、工作繁忙,社会应酬多,而对连续3天留取晨痰不耐烦或认为是多此一举。3.6诱痰法获得痰标本的意义对无痰和不能自然排痰的结核病病人或疑似病人采用诱痰法获得痰标本,对快速诊断早期肺结核有一定意义。诱痰方法操作简单、经济、方便、安全,病人耐受性好,能有效引出痰液。3.6.1肺深部痰液的配置超声雾化诱痰是指将4.5%盐水或浓盐水超声雾化吸入,盐水微粒吸入末稍支气管及肺泡,对气道和肺泡壁既有湿润也有刺激作用,能将肺深部的痰液引出,提高痰检质量。普贵德等对111例无痰的肺结核患者用4.5%的盐水超声雾化吸入,结果有效排痰率为83.0%,其中阳性检出率为21.7%。提示无痰肺结核病人可采用4.5%盐水超声雾化吸入来获得适量痰标本,此方法简单、可靠、操作费用低廉,可广泛用于不能自动排痰的疑似肺结核病例诊断。也可在门诊开展,有助于提高痰菌阳性检出率。3.6.2成分配未固定术检测检出率戚超群等将196例明确诊断的肺结核病人随机分为体位引流组和自由体位组,每组98例,2组病人病情无明显差异。留取标本前1天给病人送痰液盛放容器(涂蜡纸盒),并嘱病人睡前漱口清洁口腔。自由体位组清晨深咳留取痰标本。体位引流组若病变在左肺中、下叶,嘱病人取头低位右侧卧,若在上叶,嘱病人上半夜头高位右侧卧,下半夜头低位右侧卧;反之,若病变在右侧,取相应左侧卧位,清晨深咳留取痰液标本。若两侧肺都有病变,可以第1天引流一侧、第2天引流另一侧,留取2次标本。结果,在体位引流组98例中有40例检查出抗酸杆菌,阳性率为41%;自由体位组98例中只有18例检查出抗酸杆菌,阳性率为18%,2组比较,差异有统计学意义。说明,通过体位引流,痰检阳性率明显高于自由体位者。3.6.3民间有关机固定压,并注意做小昏迷病员、无力咳漱的患者以及小儿的痰标本采集往往比较困难。罗淑元等应用低负压(13～18kPa)电动吸痰采集小儿气管内的痰液,快速、简便、准确、不良反应小、成功率高,推广至成人,只要调整插管长度及负压。但值得注意的是气管内吸痰必须严格执行无菌操作;选择适宜的吸痰管,管外径不超过气管插管内径的1/2;吸引负压不可过大,每次吸痰不超过15s;吸痰的同时注意观察患者的面色、反应等,并及时予以对症处理。综上所述,抗酸杆菌痰涂片检查是发现传染源、确定化疗方案、考核治疗效果以及在评价控制措施等的重要依据。有效的健康教育,正确留取高质量的痰标本,选择最佳的留痰时间及方式是提高痰涂片抗酸杆菌检出率的关键。3.6.4超声雾化和venturi特性Venturi面罩雾化诱痰是指用4ml3%的高渗盐水通过带有氧气的Venturi面罩,以6L/min的流速雾化吸入。在诱痰即时和24、48h时收集所有的痰标本。Toubes等通过比较超声雾化和Venturi面罩雾化2种诱痰技术,对不能排痰的可疑活动性肺结核病人获取痰液的效果。结果:94名研究对象中有89人(95.6%)获得1个以上痰标本。其中超声雾化诱痰法获得86份(93.4%)合格样本,Venturi面罩雾化诱痰法获得66份(71%)样本。在诊断的43例活动性肺结核病人中,有39例通过诱痰获得的标本确诊但直接抗酸杆菌涂片检查只有有8例(19%)阳性。相比之下超声雾化诱痰比Venturi面罩雾化诱痰效果更好。3.6.5影响深部结核菌的因素支气管镜用于肺结