表面展示亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌构建及其高效合成共轭亚油酸的开题报告

表面展示亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌构建及其高效合成共轭亚油酸的开题报告开题报告一、研究背景亚油酸是人体必需脂肪酸之一，除了具有细胞健康和能量代谢的功能外，还可以调节免疫系统、维持心脏健康等多种生理作用。近年来，共轭亚油酸（CLA）备受研究者关注，因其可以帮助减少体脂肪、增加肌肉质量等保健作用。目前，CLA主要通过在动物脂肪中人工合成获得。然而，动物来源的CLA受到成本高、工艺复杂、制备质量不稳定等问题的限制。因此，构建高效的CLA合成系统，是实现CLA大规模工业化生产的一个重要瓶颈。二、研究内容本次研究旨在构建表面展示亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌，通过该菌株表面展示的亚油酸异构酶，实现高效合成CLA的目的。具体研究内容如下：1.构建表达亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌。2.筛选出高表达亚油酸异构酶的植物乳杆菌株。3.优化CLA发酵过程，探究最适合亚油酸异构酶生物合成CLA的条件。4.对合成得到的CLA进行纯化和鉴定。三、研究意义通过构建表面展示亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌，可以实现CLA的大规模工业化生产，降低CLA生产成本，提高CLA的制备质量。同时，该研究还有助于探索新型植物生物工程菌株在生物医药和健康保健领域的应用前景。四、研究计划1.文献综述和理论分析（2周）2.构建表达亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌（2个月）（1）设计合成亚油酸异构酶基因、植物乳杆菌表面展示载体。（2）构建原核表达体系、表达亚油酸异构酶基因。（3）质粒转化到植物乳杆菌中。3.优化CLA发酵过程（2个月）根据亚油酸异构酶生物学性质和酶活性，优化CLA发酵过程，控制良好的条件参数，实现高效生产。4.对合成得到的CLA进行纯化和鉴定（1个月）（1）表征亚油酸异构酶的酶活力（2）对合成得到的CLA进行纯化和鉴定5.论文撰写和答辩（2个月）五、预期成果1.构建表达亚油酸异构酶的重组植物乳杆菌。2.筛选出高表达亚油酸异构酶的植物乳杆菌株。3.优化CLA发酵过程，探究最适合亚油酸异构酶生物合成CLA的条件。4.对合成得到的CLA进行纯化和鉴定。5.发表一篇SCI论文。六、参考文献1.Calder,P.C.(2013).Omega-3fattyacidsandinflammatoryprocesses:frommoleculestoman.BiochemicalSocietyTransactions,45(5),1105-1115.2.Corl,B.A.,Baumgard,L.H.,Griinari,J.M.,Delmonte,P.,Morehouse,M.A.,Yurawecz,M.P.,...&Vesper,H.W.(2001).Trans-7,cis-9conjugatedlinoleicacidissynthesizedendogenouslyinlactatingdairycowsbyΔ9-desaturase.TheJournalofnutrition,131(10),2775-2780.3.Szymczyk,B.,Pisulewski,P.M.,&Szczurek,W.(2011).Conjugatedlinoleicacidsasfunctionalfood:aninsightintotheirhealthbe