鼻咽癌放疗中生物治疗的应用

鼻咽癌放疗中生物治疗的应用

癌症（iud）是中国常见的临床肿瘤之一。南北之间的发病差异很大。在南方的一些地区，它可以达到30.10万50万多万。放疗是鼻咽癌主要的治疗手段,5年生存率约50%~60%。近年来,随着分子生物学、免疫学及病毒癌基因学等领域的进展,鼻咽癌生物学研究的深入,鼻咽癌的生物治疗日渐引起肿瘤界的关注。本文从以下六大方面进行概述。1免疫抑制剂的应用体外研究证实:40个淋巴细胞杀伤一个癌细胞;鼻咽癌患者的淋巴细胞对NPC细胞株的细胞毒反应阳性率高达82%,且62%鼻咽癌患者的淋巴细胞对自身癌细胞表现出杀伤活性。Jayasurya等通过临床研究提示,淋巴细胞的浸润可抑制病灶向其邻近的淋巴结转移,使鼻咽癌患者获益。因而,应用非特异性免疫调节剂可能非特异地增强机体免疫,提高抗肿瘤能力。目前的研究提示香菇多糖等能增强患者的免疫功能、促进T淋巴细胞、NK细胞对癌细胞的杀伤作用。2rhtnf-细胞因子(cytokines)是目前生物治疗中应用最广泛的一类生物反应调节剂,与肿瘤生物治疗有关的细胞因子主要有白细胞介素(IL)、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)、集落刺激因子(CSF)和转化生长因子(TGF)五类。目前应用于临床取得较稳定疗效的主要有IL、IFN、TNF。有资料提示晚期鼻咽癌患者联合应用IL-2,病灶及颈淋巴结转移灶消退率明显高于对照组(P<0.05),且局部副反应发生率明显降低(P<0.05)。IFN是最早用于癌症治疗的细胞因子,主要由IFN-α、IFN-β、IFN-γ三类分子及其亚型组成,具有广泛的调节作用,其生物活性主要有诱导细胞抗病毒、调节免疫系统和细胞生长分化等。三种IFN中,以IFN-α使用最多,对鼻咽癌的有效率为20%。TNF是一种多功能蛋白,具有抗肿瘤、调节免疫效应细胞等多种生物活性,包括IFN-α、IFN-β两种,因其毒副反应严重,多用于局部给药或瘤体内直接注射。动物实验表明,rhTNF-α可诱导CNE3裸鼠移植瘤细胞的凋亡及下调PCNA、mtp53蛋白的表达,直至瘤细胞坏死,能较敏感地反映rhTNF-α对人CNE3细胞的增殖抑制作用。rhTNF-α与rhIL-2同时应用可减轻各自的使用剂量和毒副作用,增强抗瘤效应。3ebv特异性多克隆ctl过继免疫治疗(adoptiveimmunotherapy,AIT)是通过注射免疫活性细胞增强患者的免疫功能达到抗肿瘤效果的一种生物治疗方法。目前研究较多的免疫活性细胞有细胞毒T淋巴细胞(CTL)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。大多进展性的鼻咽癌与EB病毒的感染有关,因而,针对EBV特异性多克隆CTL研究成为目前的关注点。Chua发现鼻咽癌患者外周血中CTL比健康人少,当患者外周血中CTL小于150时,肿瘤细胞胞浆内的EBV负荷就增加,并且CTL会随着复发和转移而降低;自体CTL回输,可维持患者外周血中高数量的CTL,降低肿瘤细胞胞浆内病毒负荷。文献报道,应用被EBV感染的患者自体B淋巴细胞在体外激活细胞毒性T淋巴细胞回输到体内,可以明显地杀伤被EBV感染的B淋巴细胞,在鼻咽癌的治疗中具有一定前景。Straathof等用EBV特异性多克隆CTL治疗6例难治性鼻咽癌,2例完全缓解、2例部分缓解、1例稳定、1例进展,无疾病进展期达23个月。Comoli等通过EBV特异性CTL治疗10例难治性Ⅳ期鼻咽癌,2例部分缓解、4例稳定、3例临床受益,所有病例外周血均表达EBV特异性CTL,诱发LMP-2特异性免疫应答,且仅有2例患者出现1~2级局部炎症反应。4eucerb-2c基因产物的靶向治疗随着杂交瘤技术的发展,单克隆抗体(monoclonalantibody,McAB)的制备及在肿瘤诊断治疗中的应用取得了极大的进展。BAC5是抗鼻咽癌单克隆抗体,与鼻咽癌细胞具有较好的亲和力,目前在动物实验中常与放射性核素结合,行放射免疫导向治疗,取得一定的进展:BAC5经125I标记后注入荷瘤裸鼠体内2~3d后,肿瘤部位呈高度特异性浓集;在肿瘤多细胞微球的抑制实验中,188Re-BAC5对微球生长有强烈的抑制和破坏作用。此外,目前的研究已证明Her-2/neu(cerb-B2)基因产物Her-2蛋白在鼻咽癌患者中存在过度表达现象,此现象往往提示肿瘤的恶性程度高、进展迅速、化疗缓解期缩短,无病生存期和总生存期缩短。由于Her-2/neu蛋白位于细胞表面,易被抗体接近,故Her-2蛋白可作为抗肿瘤治疗的一个靶点。针对Her-2靶向性治疗的单克隆抗体Herceptin在鼻咽癌的动物实验证明,瘤内注射经188Re标记的Herceptin,能明显抑制过度表达Her-2/neu鼻咽癌瘤体生长,且毒副作用小。表皮生长因子受体(EGFR)在许多恶性肿瘤呈过度表达,在鼻咽癌的阳性率表达70.9%,且EGFR阳性患者的总生存期、疾病进展期显著低于阴性患者。因而针对EGFR的单克隆抗体C225在胃肠道恶性肿瘤的治疗中报道较多,同时在鼻咽癌的治疗中也逐渐展现其优势。Sung等通过体外实验证实,C225具有抑制鼻咽癌细胞株生长的作用。近年来,关于C225联合卡铂治疗复发或转移性鼻咽癌的多中心、Ⅱ期临床试验中,有60例在复发或转移后使用铂类为主化疗无效的患者(其中97%患者的肿瘤组织EGFR为阳性),应用C225联合卡铂后,部分缓解率为11.7%、稳定率48.3%、进展率38.3%,中位生存期233天,临床试验结果提示C225联合卡铂治疗复发性或转移性鼻咽癌是安全有效的。远处转移是大多数恶性肿瘤治疗失败的主要表现之一,而血管生成在肿瘤的转移中起到重要的作用。香港大学一项研究提示,通过裸鼠尾静脉注射内皮抑素可以明显地抑制鼻咽癌肝肺转移和控制病灶生长。Li等报道,通过瘤体内注射腺病毒转导的内皮抑素基因,可以有效控制瘤体内血管生成,从而抑制肿瘤的生长。5自体肿瘤细胞疫苗肿瘤疫苗(tumorvaccine)治疗是肿瘤特异性主动免疫治疗,主要有肿瘤细胞疫苗、肿瘤核酸疫苗、肿瘤多肽疫苗、抗独特型抗体肿瘤疫苗、肿瘤基因工程疫苗和树突状细胞(DC)疫苗,大多处于基础研究与临床实验阶段。由德国癌症中心研发的新城鸡瘟病毒(NDV)修饰的自体肿瘤细胞疫苗(NDV-ATV)在多中心、多肿瘤临床治疗中取得了良好效果。岳惠芬等以NDVLaSota株制备活疫苗,以喷雾吸入途径接种于家兔,得到了安全、有效的结果之后,再以相同途径接种于放射治疗后的鼻咽癌患者,结果发现治疗组3年复发率明显低于对照组(4.00%vs.26.0%)。DC是近年来抗肿瘤免疫治疗研究的热点,在多种肿瘤的基础研究和初步临床中均显示出了较好的治疗作用和良好的应用前景。Lin等以潜伏膜抗原2(LMP-2)的限制性表位多肽负载鼻咽癌患者的DC后回输到体内,在16例患者中,9例出现针对LMP-2多肽较强的CTLs活性,且有2例患者在3个月后肿瘤体积缩小。体外实验表明,DC负载LMP2A11多肽结合表位所激活的CTLs细胞能够有效抑制低分化鼻咽癌细胞株生长。6ad5cmv-p33与治疗肿瘤的发生是细胞凋亡和增殖平衡状态受到破坏的结果,从分子水平而言,其发生、发展涉及到癌基因的激活或抑癌基因的失活等多个过程。目前,基因治疗(genetherapy)在鼻咽癌的实验研究中取得了可喜的进展,有的已完成Ⅱ期临床试验。以重组腺病毒的野生型p53(Ad5CMV-p53)对两种鼻咽癌细胞系CNE-1和CNE-2Z进行干预,结果提示野生型p53的过表达能阻碍肿瘤细胞的生长,通过p53介导的信号传导途径促进肿瘤细胞的凋亡,结果显示以p53为平台的基因治疗具有明显的细胞毒性。进一步研究发现,Ad5CMV-p53对肿瘤细胞的抑制作用,不受电离辐射、化疗药物(如顺铂)和温度的影响,相反,Ad5CM-V-p53干扰电离辐射导致的双链断裂DNA进行修复,清除DNA损伤后仍不能修复的细胞,增加G2期细胞的比例,减少S期细胞,起放射增敏作用,Ad5CMV-p53与化疗有协同作用,对EB病毒阳性和EB病毒阴性的鼻咽癌都有效,并促进热诱导所致的鼻咽癌细胞的凋亡。临床试验也证实:采用rAd-p53注射液治疗4周后,两组肿瘤平均缩小率分别为71%±18%和49%±23%(P<0.001);治疗8周后,两组肿瘤平均缩小率分别为95%±10%和80%±17%(P<0.001)。治疗结束4周后,两组肿瘤完全消退率分别为75%和15%(P<0.01)。p16基因定位于人染色体9p21上,所编码的蛋白为细胞周期蛋白D/细胞周期蛋白依赖激酶4的抑制因子,起调节细胞周期作用。Li等研究表明,大部分鼻咽癌患者的p16表达为阴性,同时向EBV表达活跃的鼻咽癌细胞C666-1注射腺病毒转导的p16基因时,可明显提高其阳性表达率,并对癌细胞有较好的抑制作用,显示其潜在临床治疗优势。Bax基因是近年来发现的一种促凋亡基因,属bcl-2基因家族,具有促进肿瘤细胞凋亡的功能,可以和bcl-2蛋白形成异二聚体,从而抑制bcl-2的功能,是bc1-2的强力拮抗剂。以bax基因转导鼻咽癌细胞株HNE-1,并对鼻咽癌裸鼠种植瘤局部注射bax基因,结果:HNE-1细胞株的分裂过程明显受到抑制,细胞的代谢过程显著下降,动物实验结果:移植瘤的体积也相应缩小,提示转导bax基因有望成为治疗鼻咽癌的新方法。闵玲等通过建立裸鼠人鼻咽癌模型,接种肿瘤细胞后24h之内将bcl-xlASODN、序列对照寡核苷酸(ODN)皮下注射进行治疗,结果示bcl-xlASODN治疗组裸鼠鼻咽癌的生长受到明显抑制,抑瘤率为41.7%;其对应的bcl-2xlmRNA和蛋白水平明显降低,与对照组相比,差异有显著性(P<0.01),提示bcl-xlASODN对裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用。7最佳生物治疗的应用近年来,