钩藤中总碱提取分离工艺的研究

钩藤中总碱提取分离工艺的研究

钩藤是钩藤科植物的一种常见中药。实验表明，钩藤制剂具有明显的降压作用，其主要有效成分是钩藤碱科，主要是钩藤碱科，是多个植物的钩藤根和树枝。钩藤碱的毒性低，副作用小。这是一种理想的抗高血压药物。目前，中国现有制造商正在生产这些制剂，但应用范围不大。用钩藤碱合成制剂是很复杂的。虽然成本低，但效果低，不太明显。为了扩大钩藤的应用范围，提高钩藤制剂的质量，根据目前单独使用的趋势，提高了钩藤碱的提取和分离，采用了相对分析和分离的方法，然后分离了总碱，用碱提分离，处理后提取了高纯度的钩藤碱，为钩藤的应用提供了一种新的方法。1实验部分钩藤(段)购于吉林市药材公司,产地不详.所用试剂除提取用苯为工业用外,其余均为分析试剂.钩藤碱标准品,由北京中国药品检验所提供.1.1钩藤碱提取分离1928年近藤平三郎等首次从钩藤中分离出钩藤碱,1937年又分离出异钩藤碱,在80年代初,我国天津药物研究所等单位也就钩藤碱、异钩藤碱等成分的提取分离做了大量工作,取得一定成果.通过分析研究,我们设计了如下几种方案:①乙醇提取法;②碱化醚提法;③碱化苯提法;④碱化醇提法.1.1.1总碱的提取取钩藤药材粗粉,用70%乙醇回流提取3次,减压回收乙醇至无醇味,析出棕红色沉淀,滤出沉淀,滤液中加入10%的氯化钠,溶解后,用氨水调pH为9～10,放置过夜,滤出沉淀,两次沉淀合并,干燥后即得总碱.总碱经氯仿回流提取后,用0.5%硫酸萃取2次,两次萃取液分别用浓氨水调pH为9～10,放置后,析出沉淀,过滤,沉淀自然干燥后,用乙醚、乙酸乙酯等重结晶,得少量粒状结晶.1.1.2总碱及硫酸萃取取钩藤粗粉,用10%碳酸氢钠溶液润湿后,乙醚回流提取2次,过滤,合并乙醚液,浓缩至1/3体积,放置冰水浴中,析出无色结晶.滤出结晶,干燥后,经乙醚、丙酮、乙酸乙酯等重结晶,得无色针状结晶.其余乙醚液用少量0.5%硫酸萃取2次,萃取液分别用浓氨水调pH为9～10,放置后,第1次萃取液析出白色沉淀,滤出沉淀,自然干燥后即为总碱.第2次萃取液碱化后未见沉淀析出,与第1次母液合并.所得总碱按方案①法用氯仿提取,硫酸萃取,碱化后析出沉淀.沉淀自然干燥后经乙醇-水溶液重结晶,得到少量无色棱状结晶,再经乙醚、乙酸乙酯等重结晶,得无色针状结晶.1.1.3不同ph的硫酸萃取液取钩藤粗粉,用10%碳酸氢钠溶液润湿后,用苯回流提取2次,过滤,合并苯液,浓缩至1/2体积,用0.5%硫酸萃取2次,萃取液分别用浓氨水调pH为9～10,第1次萃取液中析出大量白色沉淀,第2次萃取液中几乎无沉淀析出.放置1h后,滤出沉淀,沉淀经自然干燥后即为总碱.总碱经乙醚重结晶,得无色粒状结晶,再经乙醚、丙酮、乙酸乙酯等重结晶,得到无色针状结晶.1.1.4总碱的提取取钩藤粗粉,用10%碳酸氢钠溶液润湿后,用95%乙醇回流提取2次,回收乙醇至无醇味,析出棕红色沉淀,滤出沉淀,干燥后即得总碱.总碱经氯仿回流提取后,用0.5%硫酸萃取2次,2次萃取液分别用浓氨水调pH为9～10,放置后,析出沉淀,过滤,沉淀自然干燥后,用乙醚、乙酸乙酯等重结晶,得少量粒状结晶.1.2分离产物的理化检验从表1中可以看出,方案①、②总碱(粗品)产率高,而精制后钩藤碱产率很低,方案②、③钩藤碱产率高,均在0.1%以上.以上各种方法所得产物的化学检识反应,外观性状,熔点等均与钩藤碱一致,薄层检查与钩藤碱标准品一致,经北京中国药品检验所鉴定为钩藤碱,高效液相色谱检查结果,本品钩藤碱和异钩藤碱总含量在93%以上,其中钩藤碱占绝大多数,另含少量异钩藤碱.理化检验结果如下:(1)外观性状:无色针状结晶.(2)熔点:214～216℃(显微熔点测定仪测定,温度计未校正).(3)化学检识:与Drahendroff试剂反应产生橙黄色沉淀;与Mayer试剂反应产生白色沉淀;与重铬酸钾-浓硫酸试剂反应由橙色转为黄绿色.(4)薄层层析:薄层板用自制硅胶G-CMC板(未活化);点样用无色针晶的MeOH溶液、标准品的MeOH溶液;展开剂用V(CHCl3)∶V((CH3)2CO)=5∶4;V(Ben.)∶V(EtOAc)=4∶1;V(CHCl3)∶V(MeOH)=5∶1;显色剂用Drahendroff试剂,喷雾显色.(5)结果:样品斑点的Rf值及Drahendroff显色与标准品完全一致,大剂量点样后,经紫外观察,Dragendroff试剂及浓硫酸显色(用浓硫酸显色时,需110℃加热3min),样品斑点前后未见其它斑点.2提取工艺的选择通过对几种典型提取方法比较,认为原料经碱化后用乙醚或苯提取效率高,用乙醇提取的方法不甚可取.另据文献记载,钩藤碱在极性溶液中易转化为异钩藤碱(转化率在60%以上),通过实验研究也证实了上述观点