4%嘧肽霉素水剂的毒性试验

4%嘧肽霉素水剂的毒性试验

0植物病毒病防治新技术病毒病是番茄、青椒、卷烟和其他作物的主要病害。它每年给当地蔬菜、水果和烟草的生产带来严重的损失。在植物病毒病的药剂防治上,国内外已历经了多年的研究,虽然一些抗病毒药剂如病毒A、植病灵等已开始进入实用化阶段,但化学合成药剂的开发具有周期长、成本高、毒性大、污染环境等缺点,远远不能满足农业可持续发展的需要。经过几年的室内外试验,我们研制出了防治植物病毒病的新型生物农药—4%嘧肽霉素水剂,现已通过国家农药临时登记。现将该药的毒性测定和田间药效试验结果报告如下。1材料和方法1.1材料表面4%嘧肽霉素水剂由沈阳农业大学植物保护学院提供。病毒A(20%盐酸吗啉胍铜可湿性粉剂)、植病灵为市售。1.2方法1.2.1急性毒性试验本试验在国家化学工业农药安全评价质量监督检测中心完成。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》对4%嘧肽霉素水剂进行急性经口毒性试验、急性经皮毒性试验、急性皮肤刺激试验、急性眼刺激试验。1.2.1.灌胃方式设置选取健康的体重一致的Wistar品系大白鼠雌雄各20只进行急性经口毒性试验,各设置464、1000、2150、4640mg/kg共4个剂量组,按设置量将嘧肽霉素配成不同剂量的液体供试。采取灌胃方式给药,给药前动物绝食16小时,一次灌胃给足设计量,灌胃体积1mL/100g。给药后,连续观察30min,而后在1、2、3、4、6小时进行观察,第二天以后每天上下午各观察一次至第14天试验结束,记录中毒症状和动物死亡率。1.2.1.不同剂量的拟合液对药物的乳化选取健康的体重一致的Wistar品系大白鼠雌雄各5只,各设置215、464、1000、2150mg/kg共4个剂量组,按设置量将嘧肽霉素配成不同剂量的液体供试。在动物背部制造一个脱毛区,面积约4×5cm,观察24小时,选用无损伤者进行试验。将所设剂量的药液均匀涂于脱毛区内,覆以4层纱布,外面再覆盖1层聚乙烯薄膜,胶布固定。4小时后,去掉所有覆盖物,以温水洗净药物。动物放回笼内,自由进食水,观察并记录结果至第14天。1.2.1.无损伤部位试药试验选取健康的体重一致的大耳白兔雌雄各2只,在动物背部两侧各制造一个脱毛区,面积约2×3cm,观察24小时,选用无损伤部位进行试验。将0.5mL药液均匀涂于左侧脱毛区内,以右侧脱毛区作为对照。其余处理同1.2.1.2。于染毒后4小时开始观察至第14天。1.2.1.外眼效果及眼底结构选取健康的体重一致的大耳白兔雌雄各2只,轻拉其左侧眼睑,将0.1mL药液滴入其结膜囊内,轻轻闭合眼脸约1min,以自身右眼作为对照。于染毒后1小时开始观察直到第14天。1.2.2试验城市防雨试验1.2.2.水剂对番茄的毒力本试验在沈阳市东陵区金家村试验基地温室番茄田进行。采用感病番茄品种抚顺柿子王906F′,在番茄病毒病发病初期开始喷药。供试药剂稀释倍数为4%嘧肽霉素水剂200倍、250倍、300倍液,对照药剂为病毒A600倍液、植病灵800倍液,以喷清水的处理作为空白对照。采用随机区组排列,共6个处理,4次重复,每小区面积18平方米,约60株番茄。用“MATABI”背负式手动喷雾器在7月22日开始第一次喷药后每隔7天喷一次,共喷3次。分别于第二次喷药后7天和第三次喷药后10天调查病情指数。根据病情指数计算防治效果。1.2.2.2.青椒病毒防治试验本试验在辽宁省法库县绿色食品基地辣椒田进行。采用感病品种青椒赤峰1号。其余处理及田间试验设计等同1.2.2.1。1.2.2.3.卷烟病的防治本试验在辽宁省西丰烟草试验基地进行。采用感病品种NC89,其余处理同1.2.2.1。2结果与分析2.1毒性试验2.1.1致死量4%嘧肽霉素水剂大鼠急性经口毒性试验结果表明,给药后各剂量组动物均无明显的中毒症状,根据死亡结果求得该药对Wistar品系雌雄大白鼠的半数致死量LD50均大于4640mg/kg。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中急性毒性评价标准,低毒农药的经口毒性半数致死量LD50>500mg/kg,因此该药剂的大鼠急性经口毒性属于低毒级。2.1.2经皮毒性试验急性经皮毒性试验结果表明,大鼠染毒后4小时内,部分雄性大鼠出现伏卧状态,为轻度不适反应,24小时后恢复常态,雌雄大鼠染毒14d均无死亡,该药剂对雌雄大鼠的经皮毒性LD50均大于2150mg/kg。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中急性毒性评价标准,低毒农药的经皮毒性半数致死量LD50>1000mg/kg,因此该药剂的大鼠急性经皮毒性属于低毒级。2.1.3不良反应积分急性皮肤刺激试验结果表明,大耳白兔的左侧脱毛区同右侧脱毛区相比,均无红斑、水肿等不良反应,该项的积分记录均为零。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中急性毒性评价标准,该药剂对皮肤的刺激强度为无刺激性。2.1.4家兔眼不良反应试验结果急性眼刺激试验结果表明(表2),大耳白兔的左眼同右眼相比,角膜没有发生混浊、受损的不良反应,结膜没有出现充血、水肿、分泌物等不良反应,表明该药剂对兔眼的角膜、虹膜、结膜均无损害,损害的各项积分记录均为零。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中急性毒性评价标准,该药剂对兔眼的刺激强度为无刺激性。2.2试验城市防雨试验2.2.1茄病毒病的防治效果试验结果表明(表3),4%嘧肽霉素水剂对番茄病毒病有良好的防治效果,防效最高可达82.23%,显著高于对照药剂病毒A和植病灵,但该药剂各施用浓度之间的防效没有显著差异。2.2.2病防治效果试验结果表明(表4),4%嘧肽霉素水剂对辣椒病毒病有良好的防治效果。第2次施药后7天防效调查结果表明,4%嘧肽霉素水剂的防效明显优于对照药剂病毒A和植病灵,并且随药剂施用浓度的增高,防效也随之增高。2.2.3防治效果试验结果表明(表5),4%嘧肽霉素水剂对烟草花叶病毒病有良好的防治效果。方差分析的结果表明:4%嘧肽霉素水剂对烟草花叶病毒病的防效显著高于对照药剂病毒A和植病灵。在4%嘧肽霉素水剂的各施用浓度中稀释200倍液的防效最好,最高可达82.82%。3田间防治试验4%嘧肽霉素水剂大鼠急性经口毒性LD50>4640mg/kg,大鼠急性经皮毒性LD50>2150mg/kg,对大白兔的皮肤和眼均无刺激性。根据国家标准GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中毒性评价标准,4%嘧肽霉素水剂属于低毒生物农药。田间试验结果表明,该药剂对番茄、辣椒和烟草等多种植物的病毒病具有良好的防治效果,