poc在临床疾病诊断中的应用

poc在临床疾病诊断中的应用

作为临床检验领域的一种新的检验方法，poct（poct）越来越受到重视。最近美国国家临床生化科学院(NACB)在其制定的“POCT循证文件”草案中,将POCT定义为:“在接近病人治疗处,由未接受临床实验室学科训练的临床人员或者病人(自我检测)进行的临床检验,是在传统、核心或中心实验室以外进行的一切检验”。由于POCT可在多种场合进行,有大型仪器不具备的时间优势,满足在医疗、危重病抢救时间上的要求,可使病人尽早得到诊断治疗,因此,在临床疾病诊断应用中得到了迅猛的发展。1现代分析技术的应用近年来POCT的进展主要体现在便携式分析仪器的大量使用,酶免疫、传感器、生物芯片等现代分析技术的进入和POCT检验应用范围的拓宽,具体体现如下:1.1poct的应用大量操作简便、报告及时、准确的小型化实验仪器得到开发应用。如小巧的手持血糖仪、测定多项生化指标的手持STAT生化仪等POCT仪器,逐渐受到处理危重病人的相关临床科室的青睐。因此,小型POCT测定仪器的发展对POCT技术进步起到了巨大的推动作用。1.2poct的检测方法化学、光学、生物传感器技术,电化学、酶免疫、免疫层析、免疫荧光等免疫分析技术,分子生物学等分析技术的应用,使得以往POCT检测方法中普遍存在的很多问题得到解决或有不同程度改进,从而使POCT方法成为更为快速、方便、高灵敏度、高特异性、高通量的检验方法。特别是近几年,POCT检测被广泛应用在免疫学试验,为很多临床疾病的快速诊断提供了有效的辅助手段。就目前的发展趋势来看,在不远的将来,POCT方法有可能覆盖整个一般小型实验室的所有检测项目。1.3容易被医院医疗扩大到医院医学模式的转变导致医院功能任务发生变化,由单纯的治疗转向预防、保健、治疗和康复等多项功能,随之为社会提供全方位的优质服务。医院工作从院内医疗扩大到院外社区,这就需要简易快速的实验诊断体系。随着老龄化社会的到来,患慢性疾病(如糖尿病、冠心病、慢性肾病和肝病等)的人愈来愈多,患者不仅希望得到医师的系统诊治,还需要积极进行自我观察和干预,而仅为了一个单项指标需要至少半天的时间到医院挂号、开化验单、交费、抽血,所带来的不便可想而知。上述情况大大促进了POCT市场的快速发展。2tat的检验POCT实际上是缩短标本周转时间(turnaroundtime,TAT)的现场检验。因此,简便快速的检验方法和便携式的小型仪器是其实施的必要条件。如今,临床化学、免疫测定、血液学和微生物学等检验领域均有适用于检测单份标本的仪器和试剂,根据不同的测定原理可归类如下:2.1免疫试验2.1.1胶体金的状态氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。免疫金标记技术,主要有斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和斑点免疫层析法(DICA),二者都是用胶体金标记单克隆抗体,可用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原,如激素、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、血清白蛋白、高敏C反应蛋白(hs-CRP)及一些病毒,如乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、艾滋病病毒(HIV)抗原和抗体测定。2.1.2荧光热量检测系统新一代POCT仪器不少使用了免疫荧光技术,通过检测板条上激光激发的荧光,可同时定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。检测系统由一个荧光读数仪和检测板组成。检测板使用的是层析法,分析物在移动的过程中形成免疫复合物的形式,通过检测区域/质控区域的值与分析物不同的浓度获得的定标曲线,可检测未知样本中分析物的浓度。2.2载体上的反应反应将一种或多种反应试剂,干燥固定在固体载体上(纸片、胶片等),用被测样品中所存在的液体作反应介质,被测成分直接与固化于载体上的干试剂进行呈色反应。2.2.2干片检测方法是从感光胶片制作技术移植而来,将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片。采用多层涂膜技术制成的干片,比干化学纸片平整均匀,用仪器检测,可以准确定量。如目前临床使用的干化学分析系统,可用于大多数血液化学成分,如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、尿素氮及一些血药浓度的测定。由于其操作简便、快速,常用于急诊检验,也相应推出了一些小型仪器,可在床边检验,但干片成本较湿化学法高。2.3电化学和计算机技术一个生物传感器偶联一个特定的生物检测器(如酶、抗体或核酸探针)到一个换能器,用于靶分析物的直接测定,而无需从基质中分离,它体现了酶化学、免疫化学、电化学与计算机技术的结合。应用它可以对生物体液中的分析物进行超微量的分析,成为检验医学的最佳框架,例如电解质的检测。商业的POCT仪器用电化学技术(如微型离子选择电极)和光学生物传感器测定葡萄糖、电解质和动脉血气。随着抗体固定技术和特异DNA序列的应用,生物传感器探针将很快用于检测激素、药物、难于培养的细菌、病毒,如衣原体、结核菌、人类免疫缺陷病毒等。2.4缩微实验室技术生物芯片是指通过微加工技术和微电子技术在固相载体芯片表面构建的微型生物化学分析系统,以实现其对核酸、蛋白质、细胞、组织以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测。其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。目前它可分为基因芯片、蛋白质芯片和细胞芯片,它们具有高灵敏度、分析时间短、同时分析项目多等优点,它是将生命科学研究中所涉及的许多分析步骤,利用微电子、微机械、物理技术、传感器技术、计算机技术,使样品检测、分析过程连续化、集成化、微型化,而且它还可促进缩微实验室的构建。而缩微实验室具有体积小、携带方便、能同时检验多种生物分子的特点,在军事医学领域中有巨大应用价值。由于生物芯片能够在短时间内分析大量的生物分子,快速准确地获取样品中的生物信息,效率是传统检测手段的百倍甚至千倍,因此,将成为POCT技术的发展方向。由于生物芯片技术在疾病筛查和早期诊断上的优势,已经成为检验医学发展的热点之一。目前,通过基因多态性芯片,对不同个体药物代谢能力分析,从而实现临床的个体化用药;通过基因芯片进行细菌检测和细菌耐药性分析;通过生物芯片对肿瘤、糖尿病、高血压、传染性疾病的进行筛查和监测等方面的检验产品越来越多。2.5血液标本检测常用于制作经皮检测仪器,用于检测血液血红蛋白、胆红素、葡萄糖等多种成分。这类床边检验仪器可连续监测病人血液中的目的成分,无需抽血,可避免抽血可能引起的交叉感染和血液标本的污染,降低每次检验的成本和缩短报告时间。但这类经皮检测仪器检测结果的准确性有待提高。3pot的临床应用3.1poct血糖监测仪器的研究与评价随着人们生活水平的提高、饮食结构与生活习惯的改变、环境等因素的影响,糖尿病的发病率持续上升,由于糖尿病病人需要经常监测血糖变化,以调整治疗用药和饮食控制,从而极大的刺激了POCT血糖监测仪器的研制与技术发展。针对不同品牌的血糖检测仪,很多人做了POCT血糖仪性能评价。孙云等对罗氏公司Glucotrend血糖仪和Advantage血糖仪的实验性能作评估认为,POCT血糖仪可作血糖检测筛选,但不能替代检验科葡萄糖定量检测。胡勤辛等对20台血糖仪的对照实验及结果统计发现,POCT血糖仪的结果总误差均小于NCCLS对葡萄糖POCT的管理要求所规定的<±20%,但每台POCT仪的结果都有统计学上的差异,因此认为,POCT只适合作糖尿病的随机监测,不能进行治疗性评价。3.2高校尿常规分析尿液的干化学分析试纸的检测项目基本包含了尿液常规分析的内容,如pH、比重、尿蛋白、尿糖、酮体、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、白细胞、红细胞等。3.3防止血液中凝血指标一些病人因各种原因需要较长时间使用抗凝剂以防止血栓形成,而在使用抗凝剂过程中,必须经常监测血液中某些凝血指标,以防止其抗凝剂使用不足或者使用过度带来的危险。Curtis等经过试验认为,在家庭中应用POCT仪器检测凝血指标,对于监测INR的变化情况,以调整抗凝治疗有重要作用,并且因为POCT仪器的便携性和操作简单而易于完成。3.4心肌梗死amicTnI是早期反映心肌损伤敏感的血清标志物,随着血清中cTnI增加,心脏事件(顽固型心绞痛、急性心肌梗死、心源性猝死)发生率亦增高。肌红蛋白(MYO)是早期诊断急性心肌梗死(AMI)最重要的指标,肌酸激酶同工酶(CK-MB)是临床医师诊断AMI最信赖的心肌标志物,B型钠尿肽(BNP)是全新的充血性心力衰竭诊断的标志物。目前上述指标都已可以用POCT方法测定,这对于心肌损伤性疾病特别是心梗的早期诊断、及时采取有效的治疗措施具有非常重要的意义。3.5血液免疫生化指标可应用于血气分析、肿瘤标志物、感染性疾病的