铁皮石斛多糖对易卒中型自发性高血压大鼠生存期作用的研究

铁皮石斛多糖对易卒中型自发性高血压大鼠生存期作用的研究

随着疾病的发展，高血压经常会破坏大脑、心脏和肾脏等重要的生命器官。脑中风是高血压器官损伤之一。临床上脑血管严重继发病变-中风,已成为高血压继发病变致残及死亡中的首位。随着生活节奏的加快,膳食结构的改变,运动不足,其发病年龄逐年提前,发病率正在进一步上升。因此,开展能够有效改善高血压患者的器官功能,延缓高血压性脑血管损害进展,防止高血压病致残致死的抗高血压抗中风药物研究具有重要意义。铁皮石斛为珍稀濒危植物保护品种,为养阴生津传统中药材。本课题所用药材来源于已有数千亩人工栽培基地并已通过“国家铁皮枫斗高技术产业化示范工程”验收的合作研究单位,为开展规范化研究和产品开发打下了良好基础。本课题在多次实验证明铁皮石斛提取物对易卒中型自发性高血压大鼠(SHR-sp)具有降低血压、降低中风发生率、延长生存期作用取得良好效果的基础上,进一步观察铁皮石斛多糖的作用,以明确其作用部位。1材料和方法1.1铁皮石斛多糖和非多糖铁皮石斛多糖和铁皮石斛非多糖:均由浙江天皇药业有限公司提供,铁皮石斛多糖和非多糖均由铁皮石斛水提取物分离得到。铁皮石斛水提取物为同批铁皮石斛多糖和非多糖分离前的提取物。1.2实验动物及其兼用4周龄易卒中型自发性高血压大鼠(SHR-sp):由中科院上海动物中心提供。各组动物10周龄开始实验,雌雄兼用。清洁级(SPF)动物房饲养Wistar大鼠。1.3对小鼠多糖的分离和测定实验设铁皮石斛多糖大、中、小剂量组(分别为1.0g生药/kg、0.5g生药/kg、0.25g生药/kg中所分离得到的多糖);西药尼莫地平组(20mg/kg);铁皮石斛水提取物组(0.5g生药/kg);铁皮石斛非多糖组(0.5g生药/kg中所分离得到的非多糖);SHR-Sp模型对照组、正常(Wistar)对照组(等容量生理盐水),共8组。以上各组均每日灌胃1次,连续给药12周。治疗结束后停药,继续观察9周。1.4观察指标和测量主要观察治疗过程(1～12周)和停药后9周时各组大鼠血压、生活情况、中风发生情况(存活比例)、心脏、脑、肾脏重量/体重比。1.4.1动物血压检测系统测定采用上海奥尔科特生物科技有限公司生产的ALC-NIBP无创尾动脉血压测定分析系统。实验前和实验中,每周测量血压1次,每次测量前和测量中进行大鼠尾动脉保温(37℃)。每只动物每次测量血压时,均测量3次,取平均值。测量血压时间:各组治疗用药后(90±10)分钟测量血压。1.4.2生存率、生存期和中风观察各组大鼠生存死亡(中风)的时间和数量。1.4.3心、脑、肾器官的重量和体重动物死亡或处死时观察并记录体重和心、脑、肾脏器重量,计算其脏器/体重比。1.5统计方法计量资料进行t检验,计数资料进行χ2检验。治疗12周、停药后9周血压和生存天数的多组比较采用F检验。2高血压大鼠大风反应及死亡情况各组高血压模型大鼠的生活情况与正常对照组未见明显差异,高血压模型大鼠在捕捉时、测量血压时比正常对照组大鼠易激怒。各组高血压模型大鼠在病情较重时或发生中风前多出现少活动、精神萎靡、易激怒、攻击性强、站立不稳、行动迟缓、抖动等表现,中风后有的立即死亡,有的出现下肢瘫痪或偏瘫、活动困难、爬行转圈、易激怒、攻击性强等类似人类的中风症状。各组高血压模型大鼠中风后存活的,全都在存活一段时间后再次发生中风死亡。中风后存活期间的动物单独喂养,饮食有困难的进行人工辅助喂养。见表1。见表2。见表3。见表4。3铁皮石斛对shr-sp大鼠的作用高血压病是以体循环压力增高为主要表现的临床综合征,是最常见的心血管疾病。脑卒中是世界上发病率和死亡率都很高的疾病之一,高血压是脑卒中最重要的危险因素。临床试验已经证明降低血压可减少脑卒中的发生,血压处于正常偏高值(17.3～18.3/10.7～11.3kPa)者的脑卒中的发生率也很高。研究证明,抗高血压制剂,包括钙通道阻滞剂(CCBs)、血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂和血管紧张素-Ⅱ受体拮抗剂(ARBs),可有效降低血压,而且可减少高风险患者的脑卒中。但中药在这方面研究很少。高血压的动物模型,目前已通过遗传学的方法制造出遗传性高血压(SHR)及易中风(SHR-sp)的模型,引起了学术界的高度重视。SHR-sp的脑出血部位、病理改变和脑血管症状与人类脑卒中相似。研究结果能较可靠地反应药物在人类原发性高血压病治疗中的抗中风作用,故本实验采用此模型。铁皮石斛为养阴的代表药物,具有补而不腻,清而不伤胃及健胃的特点,历代文献对石斛早有记载,早在中药经典著作《神农本草经》中有其药性、功能、主治范围等的描述:“石斛,一名林兰。味甘,无毒。主伤中,除痹,下气,补五脏虚劳羸瘦,强阴。久服厚肠胃,轻身延年。”《别录》:“益精,补内绝不足,平胃气……”。《本草纲目拾遗》:“清胃除虚热,生津,已劳损,以之代茶,开胃健脾,定惊疗风,能镇涎痰,解暑,甘芳降气。”《本草再新》:“理胃气,清胃火,除心中烦热,疗肾经虚热,安神定志,解盗汗,能散暑”。历代医药书籍中有很多关于石斛的记载,证明石斛具有良好的补益功能和清虚热、降虚火作用,同时其作用范围非常广泛。高血压属中医学“眩晕”、“头痛”等范畴,中医理论认为由于阴虚或阴虚阳亢引起,根据高血压的病机特点,养阴为高血压中医药治疗的基本法则;中风多由于肝肾阴虚、阳亢化风引起,肝肾阴亏为“本”,肝风上扰为“标”。铁皮石斛滋养肝肾阴津,为一平补之品,能较长期应用,或配合降压药应用,可谓釜底抽薪的“治本”之法。其降压效果虽然没有西药快,但具有多靶点、全身兼顾的特点。本研究结果证明铁皮石斛多糖对SHR-sp大鼠具有缓和持久的降低血压作用,对SHR-sp大鼠具有延长生存时间、提高生存率、预防中风的作用。铁皮石斛非多糖对SHR-sp大鼠在治疗12周中有一定作用,但作用较多糖