紫外可见分光光度法-紫外可见分光光度计（仪器分析课件）

Contents目1紫外-可见分光光度仪2分光光度计类型、特点3分光光度计的使用4定量分析法录仪器分析紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法（二）紫外可见分光光度仪构成:光源→单色器→吸收池→检测器→输出设备注意:仪器设备的光路图,应该使用”→”“─”是没有方向性的,不能用于光路图仪器分析紫外-可见分光光度法各分光光度计类型、特点单光束分光光度计：分析成本低，双光束分光光度计：检测速度加快

，误差减少，

成本变高

仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。可见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。吸收池又称为比色皿，作为溶液的容器，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面，为减少光的反射损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。根据材质可分为玻璃池和石英池两种，前者用于可见光光区测定，后者用于紫外光区。紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。信号显示系统：是将检测器输出的信号放大，并显示出来的装置

仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法Contents目1紫外-可见分光光度仪2分光光度计类型、特点3分光光度计的使用4定量分析法录仪器分析紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法（二）紫外可见分光光度仪构成:光源→单色器→吸收池→检测器→输出设备注意:仪器设备的光路图,应该使用”→”“─”是没有方向性的,不能用于光路图仪器分析紫外-可见分光光度法各分光光度计类型、特点单光束分光光度计：分析成本低，双光束分光光度计：检测速度加快

，误差减少，

成本变高

仪器分析紫外-可见分光光度法

仪器分析紫外-可见分光光度法

仪器分析紫外-可见分光光度法

仪器分析紫外-可见分光光度法

仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）3.根据所需波长转动波长选择钮。4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。定量分析1、工作曲线法A∈（0.2,0.8mol/L）Y=a+bx相关系数r=b×＞0.999仪器分析紫外-可见分光光度法2、比较法方法的运用要注意适用范围仪器分析紫外-可见分光光度法Contents目1紫外-可见分光光度仪2分光光度计类型、特点3分光光度计的使用4定量分析法录仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）3.根据所需波长转动波长选择钮。4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。定量分析1、工作曲线法A∈（0.2,0.8mol/L）Y=a+bx相关系数r=b×＞0.999仪器分析紫外-可见分光光度法2、比较法方法的运用要注意适用范围仪器分析紫外-可见分光光度法Contents目1特点2方法原理3紫外分光光度法的分析应用录仪器分析紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法由于分子中的价电子能级跃迁产生紫外吸收光谱，其特点如下：1、与其它光谱分析方法相比，紫外可见分光光度法事物仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。仪器分析紫外-可见分光光度法二、方法原理:单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系可以用朗伯-比尔定律定量表示。对于有机物轨道:电子围绕分子或原子运动的几率仪器分析紫外-可见分光光度法三、常用术语轨道:电子围绕分子或原子运动的几率仪器分析紫外-可见分光光度法１、价电子种类σ电子（单电子）、π电子（成双电子）、n电子（未成键孤电子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｐ等）

O∶←n电子

‖

←π电子C—H

|

←σ电子H

仪器分析紫外-可见分光光度法２、分子轨道

σ（成键轨道）

σ＊（反键轨道）

π（成键轨道）

π＊（反键轨道）

n非键轨道轨道能级（能量）：σ＜π＜n＜π＊＜σ＊

仪器分析紫外-可见分光光度法跃迁所需能量大小σ→σ＊＞n→σ*＞π→π*＞n→π*仪器分析紫外-可见分光光度法３、紫外吸收光谱的相关概念生色团：具有一个或多个不饱和键和未共用电子对的基团。在200-1000nm产生特征吸收峰的基团。助色团：含有未共用电子对的氧原子、氮原子或卤素原子的基团。

-OH,-I,-NHR、-OR,-NH2仪器分析紫外-可见分光光度法红移：共轭作用或引入助色团使吸收峰向长波长方向移动。蓝移：失去助色团或共轭作用减弱，可使吸收峰向短波方向移动。仪器分析紫外-可见分光光度法吸收带类型吸收带，指吸收峰在紫外光谱中的谱带的位置。Ｒ吸收带、Ｋ吸收带、Ｂ吸收带、Ｅ吸收带仪器分析紫外-可见分光光度法溶剂极性的影响仪器分析紫外-可见分光光度法影响紫外吸收光谱的因素共轭效应助色效应

超共轭效应

溶剂效应

仪器分析紫外-可见分光光度法影响因素共轭效应超共轭效应溶剂效应助色效应影响紫外吸收光谱的因素共轭效应：（红移）助色效应：助色团的n电子与发色团的π电子共轭，λ红移。超共轭效应：烷基σ键与共轭体系的π键共轭，λ红移。溶剂效应：溶剂产生吸收的光的波长极限，当大于此波长时溶剂不产生吸收，小于此波长时溶剂会产生明显吸收。实际操作中要注意避免溶剂效应对测定造成的影响。了解常见有机物的紫外吸收光谱。仪器分析紫外-可见分光光度法三、紫外分光光度法的分析应用定性分析λmax,吸收曲线峰形（峰位置），峰数目结合红外分光光度法，更全面。定量分析标准曲线法（工作曲线法）仪器分析紫外-可见分光光度法Contents目1紫外-可见分光光度仪2分光光度计类型、特点3分光光度计的使用4定量分析法录仪器分析紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法（二）紫外可见分光光度仪构成:光源→单色器→吸收池→检测器→输出设备注意:仪器设备的光路图,应该使用”→”“─”是没有方向性的,不能用于光路图仪器分析紫外-可见分光光度法各分光光度计类型、特点单光束分光光度计：分析成本低，双光束分光光度计：检测速度加快

，误差减少，

成本变高

仪器分析紫外-可见分光光度法

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仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）3.根据所需波长转动波长选择钮。4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

仪器分析紫外-可见分光光度法分光光度计的使用5.在暗箱盖开启