阿司匹林原料药的质量检测-阿司匹林原料药杂质检查

任务二：阿司匹林杂质检查子任务一药物中杂质来源及限量检查子任务二药物的杂质检查法

子任务三特殊杂质的检查方法基本要求

一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。三、熟悉药物中杂质的来源。子任务一药物中杂质来源及限量检查

基本要求了解药物中杂质来源掌握杂质限量检查方法一、药物的纯度

指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药品质量的主要因素。

药物的纯度与化学试剂的纯度药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。二、杂质定义是指药物中存在的：①无治疗作用②影响药物的稳定性和疗效,③甚至对人体健康有害的微量物质

具体是指：

1.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质

2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质

3.有毒副作用的物质三、药物中杂质的来源1.生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物

（2）试剂、溶剂、催化剂类

（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质2.贮藏过程中产生

水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等

易发生水解反应的结构：

酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：

醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等四、杂质的分类

药物中的杂质按来源分为

1.一般杂质：如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。

2.特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。按结构可分为1.无机杂质

Cl-、S2-、CN-、As、重金属2.有机杂质中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂按性质可分为1.信号杂质

—指本身一般无害,但其含量多少可反映药物纯度水平,指示生产工艺是否合理.

如：氯化物、硫酸盐等.2.有害杂质

—对人体有毒害的杂质.在质量标准中严加控制,以保证用药安全.

如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等.五、杂质的限量检查（一）杂质限量

在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下,药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几或百万分之几来表示杂质量≤杂质限量＜杂质量药品合格药品不合格子任务二药物的杂质检查法

1.对照法限量检查法（LimitTest）特点：不需知道杂质的准确含量

2.灵敏度法

系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。特点：不需对照品

3.比较法

含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度(吸光度)、pH值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品三、杂质限量的计算例题检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1

g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为

A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10g已知：c＝1

g/ml＝1×10

6g/mlV＝2mlL＝0.0001%例题检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD.1mlE.20ml

例．磷酸可待因中吗啡的检查：已知：V=5.0ml；C=0.02mg/ml；S=0.1g

求：L=？解：L=C×V/S=5.0×0.02/0.1×1000×100%=0.1%

注意点①单位一致②稀释倍数③表示方法（%）一、氯化物检查法氯化物广泛存在于自然界中，在药物的生产过程中，常常要用到盐酸或原料、中间体呈盐酸盐等，氯化物因此极易被引入到药物中。Cl-对人体虽然无害，但它的量可以反映出药物的纯净程度及生产过程、贮藏过程是否正常，如通过对氯化物控制，可同时控制与氯化物结合的一些阳离子以及某些同时生成的副产物。氯化物作为信号杂质1.原理中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判定供试品中所含氯化物是否符合限量规定。

Ag++Cl-=AgCl2.方法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较。例如中国药典对无水葡萄糖中氯化物的检查方法：取本品0.60g，依法检查(附录VIA)，与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.010％)。3.讨论（1）氯化物的检测灵敏度为1µg/ml。所用的标准氯化钠溶液每1ml相当于10µg的Cl-。在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50µg～80µg的Cl-(相当于标准氯化钠溶液5.0ml～8.0ml)所显浑浊梯度明显，便于比较。应以此设计氯化物的检查方法，根据其限量，取用适宜的供试品量，使氯化物的浓度处在适宜比浊的范围内。（2）氯化物检查宜在硝酸酸性溶液中进行，加入硝酸可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊，可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成而干扰检查。（3）为了避免光线使单质银析出，在观察前应在暗处放置5min。由于氯化银为白色沉淀，比较时应将比色管置黑色背景上，从上向下观察，使得比较液层厚，背景对比度强，利于判断。讨论（4）供试液稀释后，再加硝酸银试液，避免在较大氯化物浓度下产生沉淀影响比浊。（5）温度对产生氯化银的浑浊有影响，以30～40℃产生浊度最大，结果也稳定。但作为限量检查，供试管与对照管在平行条件下操作，故可在室温下进行。讨论4．供试品处理有的药物在上述试验条件下对检查有干扰，应排除干扰后再检查。（1）供试品溶液如不澄清，可用含硝酸的水洗净滤纸中的氯化物后滤过。（2）供试品溶液如带颜色，可按中国药典附录所规定的内消色方法处理。即取两份供试品溶液，于其中一份中先加入硝酸银试液1.0ml，摇匀，放置10min，如显浑浊，可反复滤过，至滤液澄清，即得无氯化物杂质又具有相同颜色的澄清溶液，再在其中加入规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml，作为对照溶液；另一份中加入硝酸银试液1.0ml与水适量使成50ml，作为供试品溶液。将两液在暗处放置5min后比较，即可消除颜色的干扰。如枸椽酸铁铵中氯化物检查就采用此法。（3）某些有颜色的药物也可根据其化学性质，设计其他的排除干扰的方法。如高锰酸钾中的氯化物检查，可先加乙醇适量使高锰酸钾还原褪色后，再依法检查。（4）检查碘化物(如碘化钠)中氯化物，I-也能与硝酸银形成沉淀，干扰检查。可在供试品中加入一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使将I-氧化成产物I2并挥发、溶液澄明无色后，再依法检查。也可以利用碘化银沉淀稳定，在氨液中不溶解，而氯化银、溴化银沉淀在氨溶液中溶解的性质，除去碘化物的干扰。如检查碘中氯化物和溴化物，是将供试品加水研磨、滤过，于滤液中加锌粉使碘还原为无色的碘化物，再在氨碱性条件下滴加硝酸银试液使生成碘化银沉淀而滤除。向滤液中加入硝酸，破坏络离子后，AgBr和AgCl沉淀复析出，与一定量标准氯化钠溶液生成的沉淀比较，即可确定氯化物和溴化物是否符合要求。（5）溶于水的有机药物，可按中国药典附录规定的方法直接检查氯化物;不溶于水的有机药物，多数采用加水振摇，使所含氯化物溶解，滤除不溶物；或加热溶解供试品，放冷后析出沉淀，滤过，取滤液依法检查。如药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，也可加这些溶液溶解后依法检查。三氯叔丁醇中氯化物的检查即如此。

（6）检查有机氯杂质，可根据有机药物的杂质结构，选择适宜的有机破坏方法如氧瓶燃烧法，将有机氯转变为离子状态，再依法检查。若杂质中氯原子连接于环上，则需先对其进行有机破坏，使分解后再检查。二、硫酸盐检查法药物中存在的微量硫酸盐杂质，也是一种信号杂质。药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。Ba2++SO42-=BaSO4其它略三、铁盐检查法药物中微量铁盐的存在可能会加速药物的氧化和降解，因此需要控制其存在量，常用以下两种方法检查。(一)硫氰酸盐法

检查药品中的铁盐杂质，中国药典和美国药典均采用硫氰酸盐法。铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较，颜色不得更深。其它略Fe3+

+

6SCN-

[Fe(SCN)6]3-

（二）巯基醋酸法英国药典采用巯基醋酸(mercaptoracetic

acid)法检查药物中铁盐。巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性溶液中进一步与Fe2+作用生成红色配位离子，与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色进行比较，以限制铁的量。2Fe3++2HSCH2COOH

2Fe2+

+SCH2COOH+2H+四、重金属检查重金属系指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锑、锡、铋等。由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅为代表。中国药典对重金属的检查一共收载有四种方法。

示例：阿司匹林原料药检查项重金属取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得过百万分之十。（一）硫代乙酰胺法

此法最为常用，适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物1．原理硫代乙酰胺在弱酸性(pH3.5醋酸盐缓冲液)条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，颜色不得更深。CH3CSNH2+H2O

CH3CONH2+H2SpH3.5H2S

+

Pb2+

PbS↓+2H+其它略原理重金属可与药物的芳环、杂环形成较牢固的价键，所以将供试品炽灼破坏后，加硝酸加热处理，使有机物分解、破坏完全后，使重金属游离，再按第一法进行检查。其它略(二)适用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或能与重金属离子形成配位化合物的有机药物

（三）适用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物。如磺胺类、巴比妥类药物等。在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使pb2+生成PbS微粒的混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，不得更深。硫化钠试液对玻璃有一定的腐蚀性，且久置后会产生絮状物，应临用新制。其它略

（四）微孔滤膜法适用于重金属限量低的药物此法适用于含2～5µg重金属杂质及有色供试液的检查。使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量的标准铅溶液同法处理后产生的色斑深浅，确定重金属是否超过限量。2．试验装置所用滤器由具有螺纹丝扣并能密封的上下两部分，以及垫圈、滤膜和辅助滤板所组成（其它略）五、砷盐检查法

砷盐是有毒的物质，多由药物生产过程所使用的无机试剂引入。常用下列三种方法:古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸银法白田道夫法中国药典采用前两种方法检查药物中微量的砷盐。

(一)古蔡(Gutzeit)氏法中国药典（2000年版）主要采用此法检查药物中微量砷盐。金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，颜色不得更深，判断砷盐的限量。

仪器装置如图所示（其它略）(二)二乙基二硫代氨基甲酸银法

[简称Ag(DDC)法]本法为中国药典和USP(24)收载的方法。不仅可用于砷盐的限量检查，也可用作微量砷盐的含量测定。金属锌与酸作用，产生新生态的氢，与微量砷盐反应，生成具有挥发性的砷化氢；砷化氢遇二乙基二硫代氨基甲酸银，使其还原产生红色的胶态银，用目视比色法或在510nm波长处测定吸收度，再与一定量标准砷溶液用同法处理后得到的有色溶液进行比较。装置同古蔡(Gutzeit)氏法其它略六、硫化物检查法硫化物为有毒物质供试品中的硫化物与稀盐酸在80～90℃作用产生硫化氢气体，遇醋酸铅试纸产生棕色的硫化铅，称为“硫斑”，与一定量的标准硫化钠溶液在相同条件下生成的硫斑比较，判断供试品中硫化物是否符合限量规定。

装置同古蔡氏法其它略七、氟化物检查氟检查法用于检查有机氟化物中氟的含量。有机氟化物经氧瓶燃烧分解产生氟化氢，用水吸收；在PH4.3时茜素氟蓝与硝酸亚铈以1:1结合成红色配位化合物，当有F－存在时，三者以1:1:1结合成蓝紫色配位化合物，在暗处放置1小时，置2cm吸收池中，于610nm波长处测定吸收度，并用空白试验进行校正。

其它略八、溶液颜色检查法该方法是控制药品在生产过程或贮存过程中产生的有色杂质的限量方法。《中国药典》（2000年版）采用三种检查方法。(一)目视比色法取各药品项下规定量的供试品，加水溶解，置于25ml纳氏比色管中，加水稀释至10ml。另取规定色调和色号的标准比色液10ml，置于纳氏比色管中，两管同置白色背景上，自上向下透视或平视观察，供试品管呈现的颜色与对照管比较，不得更深。其它略(二)分光光度法方法除另有规定外，取规定量的供试品，加水溶解使成10ml，必要时滤过(除去不溶性杂质对吸收度测定的干扰)，滤液于规定波长处测定，吸收度不得超过规定值。其它略九、澄清度检查法

澄清度可检查药物溶液中的微量不溶性杂质的存在情况，在一定程度上可反映药品的质量和生产的工艺水平，对于供制备注射液用原料药物的纯度检查，尤为重要。

示例：阿司匹林检查项之一【检查】溶液的澄清度与颜色取本品0.5g，加氢氧化钠试液10ml溶解后，溶液应澄清无色，如显混浊，与一号浊度标准溶液（附录ⅨA第一法）比较，不得更深。1.阿司匹林中特殊杂质检查原理

合成工艺这些杂质是怎么产生的?还有其他杂质吗?溶液的澄清度

检查--酚、苯酯类杂质

原理——根据这些杂质与阿司匹林的酸性强弱，利用它们在氢氧化钠溶液中的溶解度差异，规定一定量样品在氢氧化钠溶液中应澄清。酚水杨酸苯酯乙酸苯酯乙酰水杨酸苯酯2.方法在室温条件下，将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管(内径15mm～16mm，平底，具塞，以无色、透明、中性硬质玻璃制成)中，装入的液面的高度为40mm。在浊度标准液制备后5min，同置黑色背景上，在漫射光下，从比浊管上方向下观察，比较；或在暗室内垂直同置于伞棚灯下，照度为1000lx，从水平方向观察、比较，以检查溶液的澄清度或其浑浊程度。除另有规定外，供试品溶解后应立即检视。浊度标准贮备液配制配制1.0％硫酸肼水溶液，放置4h～6h，待浊度稳定后，取此溶液和10.0％乌洛托品水溶液等容量混合，摇匀，于25℃避光静置24h，即得。浊度标准贮备液应置冷处避光保存，在2个月内使用，用前摇匀。浊度标准原液配制取浊度标准贮备液15.0ml，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。取适量，置1cm吸收池中，于550nm波长处测定，测得的吸收度应在0.12—0.15范围内。浊度标准原液应在48h内使用，用前摇匀。

浊度标准液配制临用时，取浊度标准原液与水按表3.1配制、充分摇匀，即得不同级号的浊度标准液。表3.1不同级号浊度标准液浊度标准原液(m1)级号0.5

1

2

3

4浊度标准原液（ml）

2.55.010.030.050.0水（ml）97.595.090.070.050.0中国药典规定：供试品溶液的澄清度与所用溶剂相同或未超过0.5号浊度标准液时，为澄清；供试品溶液的乳色比0.5号明显，而不及1级时，称为浊度0.5号；其余依此类推。BP(2000)用同样方法进行澄清度检查，其对照混悬液I、Ⅱ及Ⅲ分别与我国药典浊度标准液1，2，3及4号相当。浊度未超过I号对照混悬液即为澄清，限量较我国稍宽。3.注意事项（1）多数药物的澄清度检查以水为溶剂，但也有或同时有用酸、碱或有机溶剂(如乙醇、甲醇、丙酮)作溶剂的。如无水葡萄糖、山梨酸、苯巴比妥、葡萄糖、硼酸等药品检查乙醇溶液的澄清度，如安乃近、奋乃静等检查甲醇溶液的澄清度等。（2）有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”，因为水中若溶有二氧化碳，将影响溶液的澄清度；当检查后的溶液还需供“酸度”检查用时，也应强调用“新沸过的冷水”。（3）供制备注射用的原料药物往往既要检查溶液澄清度又要检查溶液颜色，如华法林钠的检查：取本品0.20g，加丙酮10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显混浊与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，置4cm吸收池中，采用分光光度法检查，在460nm波长处测定的吸收度，不得超过0.12。十、炭化物检查法炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质数结构未知，用硫酸呈色的方法可以简便地控制它们的总量。示例：阿司匹林检查项之一易炭化物取本品0.5g，依法检查，（附录ⅧO）与对照液（取比色用氯化钴液0.25ml、比色用重铬酸钾液0.25ml、比色用硫酸铜液0.40ml，加水使成5ml）比较，不得更深。1．方法取相同的比色管两支：甲管中加各品种项下规定的对照液5ml；乙管中加硫酸[含H2SO494.5％～95.5％(g／g)]5ml后，分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。除另有规定外，静置15min后，将甲乙两管同置白色背景前，平视观察，乙管中所显颜色不得较甲管更深。

供试品如为固体，应先研成细粉，如需加热才能溶解时，可取供试品与硫酸混合均匀，加热溶解后，放冷至室温，再移置比色管中。对照液主要有三类：①用“溶液颜色检查”项下的标准比色液作为对照液；②由比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液和比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；③高锰酸钾液。2．注意事项（1）比色时，应将甲、乙两管同置白色背景前，平视观察比较，判断结果。（2）供试品为固体时，应先研成细粉，以利于溶解、呈色和检出。（3）如需加热才能溶解时，可取供试品与硫酸混合均匀，加热溶解，放冷至室温，再移至比色管中。（4）硫酸的浓度、反应温度与时间均影响易炭化物所呈现的颜色，必须按规定严格控制。十一、炽灼残渣(residueonignition)有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，加硫酸湿润，高温炽灼（700～800℃），所产生的非挥发性无机杂质。英国药典称其为硫酸灰分(sulphatedash)。炽灼残渣检查用于控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质。示例：阿司匹林检查项之一炽灼残渣不得过0.1％（附录ⅧN）。1.方法取供试品1.0g～2.0g或各药品项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；除另有规定外，加硫酸0.5ml～1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700～800℃炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在700～800℃炽灼至恒重，即得。根据下式计算，判断炽灼残渣是否符合限量规定。2.注意事项

（1）供试品的取用量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。样品量过多，炭化和灰化时间太长；样品量过少，称量误差增大。一般应使炽灼残渣量为1mg～2mg，残渣限量一般为0.1％～0.2％。当限量为0.1％，取样量约1g；限量为0.05％，取样约2g；限量为1％以上者，取样可在1g以下。（2）供试品应缓缓加热，直至完全灰化。为了避免供试品炭化时骤然膨胀而逸出，可采用将坩埚斜置方式，(不产生烟雾)，放冷，加硫酸，低温加热。（3）坩埚在进行高温炉内炽灼操作前，务必蒸发除尽硫酸，以免硫酸蒸气腐蚀炉膛，造成漏电事故。除尽硫酸蒸气，应低温加热，以防由于温度过高，供试品飞溅，而影响测定的结果。（4）含氟的药品对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。（5）一些重金属(如铅)于高温下易挥发，故若需将炽灼残渣留作重金属检查时，炽灼温度必须控制在500～600℃。（6）可采用蓝墨水与FeCl3溶液的混合液涂写烘烤供瓷坩埚编号。十二、干燥失重测定法干燥失重系指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。干燥失重的量应恒重。示例：阿司匹林检查项之一干燥失重取本品，置五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重，减失重量不得过0.5（附录ⅧL）。

干燥失重的内容物主要指水分，也包括其它挥发性物质，如残留的挥发性有机溶剂等。干燥失重测定方法主要有下列四种:(一)常压恒温干燥法(二)干燥剂干燥法(三)减压干燥法(四)热分析法(一)常压恒温干燥法

本法适用于受热较稳定的药物，中国药典收载的药物有重酒石酸间羟胺、度米芬、洋地黄毒苷、盐酸乙胺丁醇、格列吡嗪、磺胺嘧啶银、磷酸二氢钠等40余种采用本法测定。1．方法将供试品置于相同条件下已干燥至恒重的扁形称量瓶中，在烘箱内于规定温度下干燥至恒重，由减失的重量和取样量即可计算供试品的干燥失重。2.注意事项（1）干燥温度一般为105℃。干燥时间，除另有规定外，根据含水量的多少，一般在达到指定温度±2℃干燥至2～4h恒重为止。（2）为了使水分及挥发性物质易于挥散，供试品应平铺于扁形称量瓶中，其厚度不超过5mm。如为疏松物质，厚度不超过10mm。大颗粒结晶药物，应先研细至粒度约2mm。（3）放入烘箱进行干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥。取出时，须先将瓶盖盖好，置干燥器中放冷至室温，然后称定重量。（4）有的药物含有较多结晶水，在105℃不易除去，可提高干燥温度。如磷酸氯喹在105℃下干燥时，失重缓慢，不易恒重。经试验，改用120℃干燥，数小时即恒重。（5）某些药物中含有较大量的水分，熔点又较低，如直接在105℃干燥，供试品易融化，表面结成一层薄膜，使水分不易继续挥发。例如硫代硫酸钠含5分子结晶水，理论含水量达36.3％，但其在48.2℃以上出现熔化现象，不便于直接高温加热。试验时采用先于40～50℃加热，使结晶水缓缓释去；然后逐渐升高温度，在105℃干燥至恒重的方式。（6）供试品为膏状物，应先取一含洗净粗砂粒及一小玻棒的称量瓶于规定条件下干燥至恒重，然后称入一定量的供试品，用玻棒搅匀、干燥，并在干燥过程中搅拌数次，促使水分挥发，直至恒重。

（7）某些易吸湿、或受热发生相变而达不到恒重的药物，可采用一定温度下、干燥一定时间所减失的重量代表干燥失重。右旋糖酐40极易吸湿，经多次干燥，仍不易恒重，空气湿度较大时，恒重更为困难。中国药典规定在105℃干燥6h后，减失重量不得超过5.0％。

(二)干燥剂干燥法本法适用于受热分解、或易于挥发的供试品。中国药典收载的药物如氯化铵、苯佐卡因、硝酸异山梨酯、马来酸麦角新碱等采用本法测定。1．方法将供试品置干燥器中，利用干燥器内的干燥剂吸收水分，干燥至恒重。2.注意事项药典中常用的干燥剂有硅胶、硫酸和五氧化二磷等。（1）五氧化二磷的吸水效率、吸水容量和吸水速度均较好。使用时需将干燥剂铺于培养皿中，置于干燥器内。若发现干燥剂表层结块、出现液滴，应将表层刮去，另加新的五氧化二磷再使用；弃去的五氧化二磷不可倒入下水道，应埋入土中。五氧化二磷价格较贵，且不能反复使用。（2）硫酸的吸水效率与吸水速度次于五氧化二磷，但吸水容量比五氧化二磷大，价格也较便宜；使用时，应将硫酸盛于培养皿或烧杯中，不能直接倾入干燥器；搬动干燥器时，应注意勿使硫酸溅出；用过的硫酸经加热除水后可再用。除水的方法是：将含水硫酸置烧杯中加热至冒白烟、保持在110℃左右约30min，即可除水。（3）硅胶的吸水效率仅次于五氧化二磷，大于硫酸。试验用硅胶为变色硅胶，其中加有氯化钴。无水氯化钴呈蓝色，吸水后含两分子结晶水时而呈淡红色，于140℃下干燥后又可恢复为无水物。变色硅胶具有使用方便、价廉、无腐蚀性且可重复使用的特点，为最常用的干燥剂。(三)减压干燥法适用于熔点低、受热不稳定或难驱除水分的药物。中国药典收载的药物有盐酸阿糖胞苷、盐酸去甲万古霉素、山梨醇、乙酰半胱氨酸、癸氟奋乃静等多种。1.原理

在减压条件下可降低干燥温度和缩短干燥时间。2.方法在一定温度下，采用减压干燥器或恒温减压干燥箱干燥，压力应控制在2.67kPa(20mmHg)以下。如盐酸去甲万古霉素引湿性强，中国药典将本品在干燥条件下研细后，经60℃减压干燥4h，以检查其失重。3.注意事项减压干燥器初次使用时，应用厚布包好再进行减压，以防炸裂伤人。开盖时，因器外压力大于内压，必须先将活塞缓缓旋开，使空气缓缓进入，勿使气流进入太快，将称量瓶中的供试品吹散；在供试品取出后应立即关闭活塞。

(四)热分析法在程序控制温度的情况下，测定物质的物理、化学变化与温度关系的一类仪器分析方法称为热分析法。优点：具有样品用量少，灵敏、快速等；应用：用于物质的熔点、多晶型、纯度、溶剂化物、水分及热解产物的测定。方法热重分析法差示热分析法差示扫描量热法具体的内容请自己学习并作为作业布置十三、有机溶剂残留量测定法

在药物的合成、精制以及提取过程中，常常要使用有机溶剂。不少有机溶剂对人体有害，残留在药物中势必影响用药的安全。因此，中国药典于1995年版起正式收载“有机溶剂残留量测定法”，用以检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂，包括苯、氯仿、1，4-二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷等。如果生产过程中还涉及其他有害的有机溶剂，则在该品种的质量标准中另作规定。定义:药物中的残留溶剂（ResidualSolvent）系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。研究的性质：杂质研究的范畴研究的目的:控制药物质量，保障病人用药安全。残留溶剂的基本特征:特指有机挥发性化合物在药品生产过程中使用过在药品生产过程中应当去除而未除尽种类相对固定，ICH规定了69种在具体样品中具有不确定性残留量相对较低，在痕量或微量范围同一样品中不同溶剂的残留量相差较大有机溶剂的分类类别毒性PDE（mg/天）第一类溶剂人体致癌物、疑为人体致癌物或环境危害物0.1以下(1,1,1)三氯乙烷除外第二类溶剂有非遗传致癌毒性或其他不可逆毒性、或其他严重的可逆毒性0.5-50第三类溶剂对人体低毒50以上第四类溶剂没有足够毒性资料有机溶剂的引入根据研究对象具体情况有机溶剂毒性分析有机溶剂的引入确定何种有机溶剂需要进行研究研究方法的建立及方法学验证研究结果的分析及质量标准的建立有机溶剂的引入原料药/辅料：合成过程中引入包括：作为合成原料或反应溶剂引入作为反应副产物引入由其他合成原料或其他溶剂带入制剂各种成份（原料药、辅料）带入制剂制备过程中引入有机溶剂的引入研究集中在：原料药的第一种情况（合成）影响因素：有机溶剂在合成过程中使用的步骤后续步骤中使用的有机溶剂对之前使用的溶剂的影响中间体的影响（中间体的纯化方法、干燥条件）终产品精制方法和条件等等有机溶剂的引入

制剂

控制原料药的残留溶剂，最终目的是控制制剂的残留溶剂，使之符合规定。有时候根据制剂的一些特点，可能对原料药残留溶剂的研究和限度要求进行特殊性的考虑。

有机溶剂的引入

制剂及其临床应用特点剂型、给药途径处方

工艺适应症剂量、用药周期《中国药典》采用气相色谱法检查残留有机溶剂。使用填充柱，内装直径为0.25～0.18mm的二乙烯苯—乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，以氮气为载气，氢火焰离子化检测器检测，柱温为80～170℃。气相色谱法（GC法）：为残留溶剂检测的首选方法，2010版中国药典推荐采用顶空毛细管气相色谱法。特点：分离效率高、速度快；检测灵敏度高，选择性好；样品用量少，基本可以满足所有残留溶剂测定的要求。

进样方法

直接进样：沸点高的溶剂或受热不易分解的样品优点：简便、无需专用设备，绝对进样量大，检测灵敏度较高缺点：污染进样口及柱子，溶剂峰响应大，样品分解产物或溶剂杂质峰可能影响测定，对溶剂的纯度要求高十四、水分测定法药品中的水分包括结晶水和吸附水。过多的水分可使药物的含量降低，还可导致药物的水解、霉变，从而直接影响其理化性状及生理作用。应对药品中的水分进行限量控制。《中国药典》(2005年版)采用费休氏法和甲苯法测定药物中的水分，尤以费休法为主。（一）费休水分测定法特点：操作简便、专属性强、准确度高，适用于受热易被破坏的药物，因而成为国际上通用的水分测定法。USP(25版)、BP(2000年版)、JP(14版)亦均采用此法测定水分。费休水分测定法为非水氧化还原滴定反应，采用的标准滴定液称费休试液，是由碘、二氧化硫、吡啶和甲醇按一定比例组成。其它课程已学

（二）甲苯法甲苯法常被用于测定颜色较深的药品或氧化剂、还原剂、皂类、油类等药品中的水分。子任务三特殊杂质的检查方法药物除检查一般杂质外，还需检查可能存在的特殊杂质，由于药物品种不同，所含的特殊杂质不同（与不同药物的生产、贮存有关）。检查方法也不同，一般按药物和杂质在物理、化学性质上的差异，采用物理、化学方法检查。一、利用药物和杂质在物理性质上的差异

（一）臭味及挥发性质的差异例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品2.0g,直火加热无辛味。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：10ml水浴蒸干残渣＜15mg

（二）颜色差异例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品2.0g，加NaOH试液10ml，加水25ml，与黄色3号比色液比，

不得更深。

（三）溶解行为的差异例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯（I）和（II）检查（四）旋光性质的差异例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4

（五）对光吸收性质的差异

1.紫外分光光度法：例如:地蒽酚中二羟基蒽醌的检查

再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度比来控制杂质;纯品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%时A247nm/A258nm=0.79;

因此规定供试品A247nm/A258nm

＜0.79;即所含苯丙酮＜

0.5%.

2.原子吸收分光光度法：是通过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的含量。限量检查时：对照品液=供试品+限量-----a

供试品液=------------------b

符合规定时b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。

3.红外分光光度法：

主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲苯咪唑中A晶型检查

A晶型C晶型在640cm-1有强吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有强吸收

662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1

供试品+10%A晶型D2D1

供试品D2D1＜10%R=D1/D2

＞R’=D’1/D’2

4.荧光分析法

3,4-二去氢利血平利血平中氧化产物检查：利血平(无荧光)(I)(黄绿色荧光)3,4,5,6-四去氢利血平

(II)(蓝色荧光)(六)吸附或分配性的差异

1.薄层色谱法(TLC)

(1)杂质对照品法例如:盐酸左旋咪唑中检查硅胶G2,3-二氢-6-苯基咪唑[2,1-b]噻唑盐苯:甲醇:冰HAC

样品

对招品。·····

(2)高低浓度对比品法例如:盐酸异丙嗪中有关物质的检查硅胶G

有多个杂质而且结构不清样品10mg/ml;对照品(1)0.15mg/ml己烷:丙酮:乙胺

(2)0.05mg/ml

样品液对(1)(2)

供试液杂质斑点不多于3个;杂质斑点与对照(2)的主斑点比较,不得更深;如有一点超过,应不深于对照液(2)的主斑点.......

....

...

2.纸层析法(PC)

常用于极性大的药物的分离、分析，如地高辛中的有关杂质的检查。3.高效液相色谱法(HPLC)①峰面积归一化法：②不加校正因子的主成分自身对照法(TLC中高低浓度对照法）：③加校正因子的主成分自身对照法④内标法测定样品中杂质的总量限度：⑤外标法测定供试品中某个杂质限量：4.GC已广泛用于药物的含量测定和杂质检查（同HPLC)

示例：阿司匹林原料药检查之一游离水杨酸取本品约0.1g,精密称定,置10ml量瓶中，加1%醋酸甲醇适量,振摇溶解,并稀释至刻度，摇匀，作为供试试品溶液(临用新配)；取水杨酸对照品约10mg,精密称定,置100ml量瓶中，加1%醋酸甲醇适量,振摇溶解,并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml,置50ml量瓶中,用1%醋酸甲醇适量,振摇溶解,并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录ⅤD）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）为流动相；检测波长为303nm。理论板数按水杨酸峰计算不低于5000，阿司匹林主峰与水杨酸主峰分离度应符合要求。立即精密量取供试品溶液、对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与水杨酸色谱峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算供试品中水杨酸含量，含水杨酸不得过0.1%。有关物质略二、利用药物和杂质在化学性上的差异（一）酸碱性的差异

1.规定消耗滴定液体积例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：(NaOH0.02mol/L)

取本品0.20g+中