egcg对营养性肥胖大鼠脂肪分布和代谢异常的预防作用

egcg对营养性肥胖大鼠脂肪分布和代谢异常的预防作用

香茶素素（ecgg）是茶叶的一种独特的儿茶素。作为茶多酚的主体部分，儿茶素赋予了茶叶独特的口感和保健功能。EGCG占茶多酚制品的40%～50%,被纳入新兴的医药食品应用领域。多年来的研究发现,EGCG对癌症、肥胖、糖尿病、心血管疾病都具有预防功效,其中有关其抗肿瘤作用机制的研究较多,如EGCG抑制促癌剂作用,诱导p21表达抑制癌细胞的增殖,抑制拓扑异构酶Ⅰ、拓扑异构酶Ⅱ等肿瘤相关酶活性,诱导癌细胞的凋亡,影响凋亡相关基因bc1-2表达等,关于EGCG对肥胖的影响目前国内报道较少。为探讨EGCG对肥胖的影响,本实验对肥胖高脂血症模型大鼠给予EGCG,观察其对动物体重、体内脂肪重量(睾丸及肾周围脂肪垫)及血清和下丘脑瘦素水平的影响,探索EGCG更广泛的功效作用,为其开发利用提供理论依据。1材料和方法1.1实验对象EGCG由上海诺德生物科技有限公司提供。1.2动物饲料的制备基础饲料由南京安立默科技有限公司提供,高脂饲料由80%基础饲料、10%猪油和10%蛋黄粉组成。1.3模型动物分组、模型设计及模型人工雄性健康成年SD清洁级大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司提供)40只,体重180～210g,基础饲料适应喂养1周后,取8只动物作为基础饲料对照组,其余均给予高脂饲料。1个月后,高脂饲料大鼠按体重随机分为模型对照组,EGCG低、中、高剂量组(分别给予EGCG50、100、300mg·kg-1)4个组。基础饲料对照组继续进食基础饲料,其余各组继续进食高脂饲料。基础饲料对照组和模型对照组给予蒸馏水灌胃,EGCG各组给予相应剂量的EGCG灌胃,均连续灌胃30d,灌胃容量为10mg·kg-1。各组动物分笼饲养,室温控制在(22±2)℃,自然光照,自由进食进水,每周测体重和体长1次,并计算Lee′s指数,计算公式为:Lee′s指数=体重(g)×103体长(cm)−−−−−−√3=体重(g)×103体长(cm)330d后,大鼠股动脉取血,分离血清,测定血清游离脂肪酸和血清瘦素。处死动物,取肾和睾丸周围脂肪垫组织,称重。钝性剥离大鼠颅骨,使大鼠脑部全部露出,用眼科剪轻轻取出下丘脑组织,-20℃冷冻,备测瘦素。1.4试剂盒和试剂盒血清游离脂肪酸测定采用比色法,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。血清和下丘脑瘦素测定采用RIA法,试剂盒购自中国原子能科学研究院。1.5统计处理本次实验所收集的数据采用SAS软件包进行方差分析,各组间的比较分析采用Dunnett′st检验,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1大鼠肥模型模型成功的检验见表1。由表1可见,实验结束时,模型对照组动物体重、睾丸周围脂肪垫重量、睾丸周围脂肪垫重量/体重值、肾周围脂肪垫重量、肾周围脂肪垫重量/体重值和Lee′s指数均高于基础饲料对照组,差异有统计学意义(P<0.05),说明大鼠肥胖模型造模成功。同时EGCG低剂量组仅肾周围脂肪垫重量、肾周围脂肪垫重量/体重值低于模型对照组(P<0.05),而随着剂量增加,睾丸周围脂肪垫重量、睾丸周围脂肪垫重量/体重值、肾周脂肪垫重量、肾周围脂肪重量/体重值和Lee′s指数均较模型对照组进一步降低(P<0.05),说明EGCG对肥胖大鼠具有减肥的作用,且有剂量依赖性。2.2各组大鼠血清游离脂肪酸和脑氧生物活性比较见表2。由表2可见,模型对照组动物血清中游离脂肪酸和血清瘦素水平均高于基础饲料对照组,且下丘脑瘦素水平低于基础饲料对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。EGCG中、高剂量组血清游离脂肪酸和下丘脑瘦素水平与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),EGCG高剂量组血清瘦素与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。说明高脂饲料可以导致大鼠血清游离脂肪酸增高,EGCG可以降低继续喂养高脂饲料肥胖大鼠的血清游离脂肪酸水平,同时可降低血清中瘦素水平,提高下丘脑瘦素的水平。3ecgg对肥肥大鼠血清肥素的影响国内长期以来对EGCG的研究多集中于抗肿瘤、抗氧化、抗紫外辐射、抑菌除臭等方面,本实验研究弥补了国内在EGCG对肥胖影响作用方面的空白。国外有实验研究发现,EGCG可以减少实验动物食物的摄入量和脂肪的吸收量,有效地降低动物体重及血脂、血清甘油三酯、胆固醇和血清瘦素水平,并能促进能量消耗,加速脂肪氧化,提高高密度脂蛋白(HDL)水平,增加脂肪排泄,从而起到减肥的作用。本次研究参照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》的有关实验方法,利用自行配制的高脂饲料喂养SD大鼠,成功建立了肥胖模型。在我们的实验中也发现,EGCG可以降低肥胖大鼠血清瘦素的水平,但是过去的研究并未探讨EGCG通过下丘脑神经等对动物减肥发挥作用的情况。在本次实验中我们观察到EGCG对肥胖大鼠下丘脑瘦素具有干预作用。EGCG的减肥机制目前尚不清楚。有分子实验和细胞实验研究结果提示,EGCG通过以下途径发挥减肥作用:(1)降低消化酶活力,减少食物摄入和能量的吸收;(2)增加脂肪分解、氧化和燃烧;(3)调节脂蛋白的表达;(4)减少前脂肪细胞和脂肪细胞的数量,使得体重下降。本实验结果表明,各EGCG剂量组大鼠的体重、脂肪重量/体重值、Lee′s指数均低于模型对照组,差异有统计学意义。瘦素是肥胖基因(ob)的编码产物,它是由脂肪细胞分泌的一种循环激素,可以通过多种途径发挥生物学效应。瘦素主要通过瘦素受体激活JAK-STAT信号转导途径来发挥作用,瘦素受体主要位于下丘脑,瘦素与下丘脑的瘦素受体结合后调节下丘脑的体重调节中枢,可引起食欲降低,能量消耗增加,促进脂肪代谢,降低血清游离脂肪酸水平等。我们还发现,各EGCG组下丘脑瘦素水平明显高于模型对照组,表明EGCG在降低肥胖大鼠体重的同时,提高了下丘脑瘦素受体结合瘦素的水平,从而提高了下丘脑中瘦素的水平,发挥其控制体重、减肥的作用,这可能是EGCG减肥作用的机制之一,但具体作用途径有待于进一步研究。茶在饮用食品中占据相当重要的地位,尤其在我国拥有悠久的饮茶历史,饮茶已成为人们心目中修身养性的佳品。随着科技进步,茶的功能和作用机制的研究日趋深入和完善。EGCG作为茶中重要的功