白僵菌油剂与溴氰菊酯混合防治马毛松毛虫的效果研究

白僵菌油剂与溴氰菊酯混合防治马毛松毛虫的效果研究

氨基白僵尸菌（以下简称白僵尸菌）是一种重要的昆虫群落，广泛用于海防、农林害虫的防治和海防。Prior等通过对白僵菌的研究首次提出了将昆虫病原真菌的分生孢子悬浮于油中增强其致病力并用于蝗虫防治的想法。与水剂相比,油剂在低的相对湿度下更有利于孢子的萌发,同时在高温下也更能延长孢子的寿命。油剂还有利于孢子对疏水基质的吸附,如昆虫体壁或植物表面。但在实际应用中,真菌杀虫剂的防治效果受环境因子的影响较大,防治效果不大稳定,且杀虫速度相对较慢,影响使用的积极性。在白僵菌油剂中加入适量的化学农药来提高杀虫效果和杀虫速率是一项有益的尝试。在我国,马尾松毛虫Dendrolimuspunctatus(以下简称松毛虫)是一种重要的森林害虫,每年都造成巨大的经济和生态损失,自20世纪70年代以来就应用白僵菌防治松毛虫。本研究的目的是在球孢白僵菌油剂中加入适量的溴氰菊酯,超低量喷雾防治松毛虫,以确定适合的菌药配比浓度及混合防治效果。1材料和方法1.1白陷菌纯孢粉泰山牌背负式WFB-18BC型喷雾机(山东临沂农药厂);白僵菌纯孢粉(由安徽农业大学虫生菌研究中心提供的Bb202菌株在棉布上生产而得);2.5%溴氰菊酯(Decis,法国产)。1.2平均虫口密度安徽桐城市林场一片高约4m的幼林,林内松毛虫虫株率100%,平均虫口密度每株180头以上,松毛虫4龄。在林内设置6块667m2的试验小区,对各小区进行白僵菌油剂和溴氰菊酯混合超低量喷雾处理,各处理见表1。1.3混合制剂的制备1.3.1复配液、制剂参照李农昌油剂制备方法。配方:50%纯孢粉、5%抗氧化剂、0.01%紫外吸收剂,加溶剂油至100%;油剂含孢量470×108孢子/g。1.3.2白陷菌和溴氰菊酯5%的稀释剂、标准溶液、白与非清乳酸酯、溴氰菊酯配比的筛选将制备好的油剂在使用前按1∶30的比例加稀释剂进行稀释,稀释时油剂过80目筛,然后根据白僵菌和溴氰菊酯不同配比加入溴氰菊酯,混匀,待用。1.4根据测定了最小雾和雾滴数根据表1施用量,对各小区进行超低量喷雾。每小区设置2棵标准树,在标准树的不同部位放置氧化镁载玻片以统计雾滴数并计算雾滴大小。1.54松毛虫死亡数测定将各标准树下的杂草清除,并铺上塑料薄膜,分别在用药24h和48h后统计松毛虫死亡数;并从死亡的虫子当中随机选取40头,保湿培养以确定白僵菌的侵染情况。1.6定期饲养,自然饲养在各小区未死的松毛虫中,除Ⅳ区仅选取17头和对照40头外,均各随机选取80头(每株标准树40头,编号保持对应关系),在室内饲养,前6d每天保持RH90%8h(在野外实测时夜间林间相对湿度可达90%),后置于室内自然饲养。每天更换松针并记录死亡情况,直至化蛹,并对死虫进行保湿培养,确定白僵菌侵染情况。1.7统计与分析利用DPS和EXCEL软件对数据进行统计分析。2结果与分析2.14溴氰菊酯用量对松毛虫死亡率的影响溴氰菊酯是一种高效、低毒、低残留的菊酯类农药,具触杀和胃毒作用。由于白僵菌油剂中加入了溴氰菊酯,极大地加快了杀虫速度,头2d均有大量死亡(表2)。由于白僵菌杀虫速率较慢,小区Ⅴ前2d的死亡率很低,因此小区Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ前2d松毛虫的死亡均是溴氰菊酯作用的结果。松毛虫死亡率随溴氰菊酯的添加量不同而不同,从28.1%～94.4%不等,与溴氰菊酯的量呈正相关。由邓肯氏新复极差分析表明,除Ⅰ区和Ⅱ区外,溴氰菊酯不同处理区的死亡率差异均达到显著水平。而造成Ⅰ区和Ⅱ区死亡率差异不显著的原因在于在实际防治过程中,不可能每棵树的受药量是均匀的,这点将由后面表4中各处理的雾滴数显示出来。由于不能直接将死亡率与溴氰菊酯用量拟合成可靠的直线方程,因此首先将松毛虫的死亡率转化为死亡机率值,再进行拟合,得到了一个经t检验和F检验均可靠的直线回归方程:Y=0.0033X+3.9739,R2=0.9906,其中X为溴氰菊酯每667m2用量(μL),Y为松毛虫死亡率机率值。该方程拟合值与实际值也相当接近(表2)。在实际应用中,可根据对松毛虫快速击倒率要求,按此方程计算所需溴氰菊酯的用量。通过对头2d死虫的保湿培养,仅少数虫尸出现白僵菌生长。除CK外,各处理区的白僵率从2.8%～6.3%不等,差异不显著。造成这种现象的原因可能与溴氰菊酯在毒杀过程中改变了松毛虫体内组织以及细菌的腐生有关。在溴氰菊酯毒杀的松毛虫中,绝大多数均出现脱肛现象,内脏翻出体外,很容易受到细菌的污染,使白僵菌难以侵染与腐生。2.2溴氰菊酯对松毛虫的影响在室内饲养时,第1天除Ⅳ区有虫死亡外,其他各区均无松毛虫死亡,这说明溴氰菊酯的快速击倒作用基本结束。饲养到松毛虫结茧化蛹,各处理区松毛虫的死亡率及白僵率见表3。在加入溴氰菊酯的各处理区中,松毛虫的死亡率均差异显著,校正死亡率最低是Ⅰ区29.7%,最高为Ⅳ区94.6%;在未加溴氰菊酯的Ⅴ区,其死亡率为27%。尽管各区白僵率并不高,但显示出与白僵菌油剂用量的相关性,其相关系数0.99。在松毛虫的死亡率与白僵率之间存在着较大的差距,造成这种现象的原因可能在于:由于溴氰菊酯已经造成了对松毛虫生理的一些伤害,加上白僵菌侵入的影响,从而导致松毛虫生理衰竭死亡而不表现出白僵;另一方面是由于溴氰菊酯本身或溴氰菊酯造成的松毛虫体液的改变影响了白僵菌在松毛虫体内的继续生长。但从表中的数据可以看出,白僵菌油剂与溴氰菊酯之间有相互增效作用。表3中根据各区抽样松毛虫的死亡情况推算出各区松毛虫的累积死亡率,其校正累积死亡率在27.5%～99.6%之间变动,其中Ⅲ区和Ⅳ区的死亡率差异不显著,而这两个区在喷药后48h内松毛虫的死亡率差异是极显著的,这说明在实际应用中,每667m2加溴氰菊酯400μL便可获得与800μL相近的防治效果。而只用白僵菌油剂防治的Ⅴ区,由于每667m2用量只有200mL,对于松毛虫的快速击倒来说,可能用量太低,从而造成只有27.5%的总死亡率。白僵菌的用量偏低还可能直接影响到其他各区松毛虫的白僵率。2.3油剂施用量对雾滴数的影响为衡量药剂超低量喷雾的雾化及林间受药情况,对各区标准树上放置的氧化镁载玻片上的雾滴数及雾滴大小进行了测定,结果见表4。表4显示各区的雾滴数均有较大的标准差,这表明树木不同部位的受药量不一样,不同部位的雾滴数有较大的差异,但总体来说,雾滴数的多少与油剂的施用量呈正相关,这由表中的方差分析可以看出。尽管喷100mL白僵菌油剂的Ⅰ区与喷200mL油剂的Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ区雾滴数均差异不显著,但它们与施用400mL油剂的Ⅳ区的雾滴数相比仍表现出了它们之间的差异。Ⅰ区与Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ区雾滴数差异不显著的原因是由于较大的标准差所造成的。直径测量结果显示了雾滴具有较好的均匀度与大小。各区直径大小在55.4～69.5μm之间,且差异不显著。雾化均匀度(DR值)计算结果为0.92,而DR值达到0.67即为雾化良好,说明应用该机械进行白僵菌油剂的超低量喷雾具有很好的效果。3真菌药剂与化学农药的联用为了提高真菌杀虫剂的杀虫速率与杀虫效果,早在20世纪70年代Ferron就研究了有机磷和有机氯杀虫剂对布氏白僵菌B.brongniartii防治金龟子Melolonthamelolontha效果的影响。化学农药与真菌杀虫剂的相容性是植物保护过程中必须考虑的一个基本问题。对于真菌杀虫剂与化学农药混用有两种观点;一种认为,混用有助于提高防治效果与虫生真菌对害虫的侵染;另一种认为,化学农药会阻碍虫生真菌对害虫的侵染。也有研究表明化学农药与真菌杀虫剂相容与否可能决定于化学杀虫剂的类型与虫生真菌的种类。将化学农药与真菌杀虫剂混用,一方面在于快速击倒害虫,另一方面希望增加虫生真菌的侵染率,通过增加林间的带菌量达到持续控制害虫的目的。本研究中,白