板蓝根颗粒中板蓝根成分群的测定

板蓝根颗粒中板蓝根成分群的测定

板蓝根是通过浸泡板蓝根提取物、辅助甘蔗和糊精混合而成的。主要疗效为清热解毒,用于病毒性感冒,咽喉肿痛。可用作为板蓝根药材的有菘蓝(IsatistinctoriaL.)、草大青(IsatisindigoticaFort.)、马蓝(BaphicacanthuscusiaBrem.)的根。我们从药店里购买了三家药厂生产的板蓝根颗粒。这些由不同厂家生产的板蓝根颗粒是否具有共同的能够快速、简便检测的UV指纹图谱,这些图谱是否包括有板蓝根成分群信息的存在,并能通过这些信息,了解它们的内在质量,这是我们的目的所在,对此我们进行了实验研究。1板蓝根颗粒及板蓝根药材的选择UV-1600型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司)。由三家不同药厂生产的板蓝根颗粒A、板蓝根颗粒B、板蓝根颗粒C和板蓝根药材Ⅰ(安徽产)、板蓝根药材Ⅱ(河北产):分别购自广州德瑞药店和广州同仁堂药店。氯仿AR级。2实验方法2.1板蓝根的uv-cu-l-ms分析将板蓝根药材粉碎,水煮醇沉,取上清液浓缩至干,于60℃干燥,研细,取干膏细粉少许,加水溶解,过滤,滤液用氯仿萃取,萃取液于紫外可见分光光度计245～800nm间隔1nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂。取板蓝根颗粒A、B、C各1份,每份数克,分别加水溶解,过滤,滤液用氯仿萃取,萃取液分别于紫外可见分光光度计245～800nm间隔1nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂。板蓝根药材与板蓝根颗粒在紫外共有一段相同的吸收图谱,见图1。板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ在(249±2)nm,(282±2)nm有最大吸收峰。板蓝根颗粒A和B在(282±2)nm有最大吸收峰。板蓝根颗粒C在(249±2)nm,(279±1)nm,有最大吸收峰。按上述方法制备不同浓度梯度的板蓝根药材Ⅰ样品液,在紫外245～400nm间隔1nm扫描,结果见图2。从图2中可以确定板蓝根药材Ⅰ最小浓度时,UV图谱末端吸收A≤0时的波长为310nm,从而确定板蓝根UV特征图谱的波长范围为245～310nm。读取每1nm吸光度A,根据相关系数计算公式:相关系数=∑i=1n(xi−x¯i)(yi−y¯i)∑i=1n(xi−x¯i)2(yi−y¯i)2√∑i=1n(xi-x¯i)(yi-y¯i)∑i=1n(xi-x¯i)2(yi-y¯i)2用Excel中的CORREL计算图1中板蓝根药材Ⅰ、Ⅱ与板蓝根颗粒A、B、C吸收曲线245～310nm图谱的相关系数,结果见表1。2.2样本检测方法按2.1项中板蓝根药材样品液的制备方法,制备不同浓度的板蓝根药材Ⅰ、板蓝根药材Ⅱ样品液各5份,分别于245～310nm间隔1nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂,得板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ在245～310nm吸收曲线各5条,按2.1项中吸收曲线相关系数计算方法,计算板蓝根药材Ⅰ和板蓝根药材Ⅱ共10个图谱的相关系数,得相关系数25个,平均相关系数为0.995858,样本标准偏差STDEV(n=25)为0.002441。板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ的UV特征图谱相关分析说明在245～310nm板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ有相似的成分群。2.3特征图谱分析板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ在245～310nm有相似的成分群,用板蓝根药材Ⅰ作为板蓝根标准品与板蓝根颗粒A、B、C紫外特征图谱进行相关分析。按2.1项中板蓝根颗粒样品液的制备方法,制备不同浓度的板蓝根颗粒A、B、C样品液各5份,分别于245～310nm间隔1nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂,得板蓝根颗粒A、B、C在245～310nm吸收曲线各5条,按2.1项中吸收曲线相关系数计算方法,分别计算板蓝根颗粒A、B、C图谱与板蓝根药材Ⅰ图谱的相关系数,结果见表2。2.4板蓝根的紫外分光光度法为了证实上述实验所得到的板蓝根颗粒的UV图谱,就是含有板蓝根药材的UV指纹图谱,通过在板蓝根颗粒的样品液中加入板蓝根药材的样品液,板蓝根颗粒的图谱与板蓝根药材的图谱的相关系数将更接近于1。取上述实验中板蓝根颗粒A、B、C氯仿萃取液各5份,加入不同浓度的板蓝根药材Ⅰ的氯仿萃取液,使板蓝根药材Ⅰ与板蓝根颗粒浓度(g·mL-1)比约为1∶1～1∶5,分别于紫外可见分光光度计245～310nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂。得板蓝根颗粒A、B、C加板蓝根药材Ⅰ在245～310nm吸收曲线各5条,按2.1项中吸收曲线相关系数计算方法,分别计算板蓝根颗粒A、B、C加板蓝根药材Ⅰ图谱与板蓝根药材Ⅰ图谱的相关系数,结果见表3。2.5平均吸光度和stdev将10包板蓝根颗粒A,研细混匀,取约2g,精密称定,加水溶解,过滤,滤液用氯仿数毫升分次萃取,合并滤液,定溶至10mL,于紫外可见分光光度计245～310nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂,平行实验3份。板蓝根颗粒B和C样品液的制备和图谱扫描与板蓝根颗粒A相同。板蓝根颗A、B、C在UV图谱282nm处的平均吸光度和STDEV见表4。精密移取板蓝根颗粒A氯仿萃取液3mL,共5份,分别精密加入0～4mL经水萃取的氯仿试剂,于紫外可见分光光度计245～330nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂。板蓝根颗粒B和C样品液的制备和图谱扫描与板蓝根颗粒A相同。取板蓝根药材Ⅰ干膏粉约0.4g,精密称定,加水溶解,过滤,滤液用氯仿数毫升分次萃取,合并滤液,定溶至25mL,精密移取氯仿萃取液3mL,共5份,分别精密加入0～4mL经水萃取的氯仿试剂,于紫外可见分光光度计245～310nm扫描,参比液为经水萃取的氯仿试剂。板蓝根药材Ⅰ和板蓝根颗粒A、B、C各自不同浓度UV图谱的平均相关系数及STDEV见表5。板蓝根药材Ⅰ与板蓝根颗粒A、B、C浓度呈梯度递减,UV图谱随之下移,将它们放在同一张图谱中,就可比较出单位浓度中它们各自所含UV图谱中的板蓝根成分群的量是不同的,见图3。图3中板蓝根颗粒A、B、C和板蓝根药材Ⅰ的相关系数见表6。3板蓝根颗粒的测定板蓝根药材Ⅰ与板蓝根药材Ⅱ具有相同的UV图谱,说明它们含有这部分图谱中相同的成分群。有一定的代表性。可作为鉴别板蓝根颗粒中是否含有板蓝根的一个依据。板蓝根颗粒A、B、C中均存在有板蓝