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/附件1:?动物细胞融合与单克隆抗体?课前预习提纲一、问答1.植物体细胞杂交包括哪些步骤?原生质体融合前应如何处理?促进融合的方法有哪些?融合的原理是什么?2.抗体由什么细胞产生?其化学本质是什么?主要作用?与抗原作用的特点?主要分布在哪里?3.动物细胞工程常用技术有哪些?单克隆抗体制备过程中用到哪些?技术原理是什么?4.仔细阅读书上单克隆抗体制备过程示意图,答复以下问题①注射抗原的目的是什么?②诱导细胞融合的手段有哪些?③假设细胞两两融合,有几种融合情况?④进行专一抗体检测和筛选的目的是什么?⑤筛选最少要进行几次?二、填空1、动物细胞融合的原理,诱导其融合的手段,最主要用途。2、杂交瘤细胞的特点、。3、单克隆抗体的优点。4、单克隆抗体主要用途。三、请写出预习中你自己不能解决的疑难问题〔2个以上〕附件2:?动物细胞融合与单克隆抗体?课后检测题1.中科院上海植物生理生态研究所在“神舟四号〞飞船进入太空后为一对“新人〞——黄花烟草原生质体和革新一号烟草原生质体举办了特殊的“婚礼〞。将两个“新人〞放入融合器中,当充满液体的融合器加上直流电场,两个原本相互游离的细胞一下子贴到一起,开始了“窃窃私语〞。紧接着,在瞬间高压脉冲的作用下,细胞膜被击出了一个小孔,透过这微小的空间,两股细胞质展开了“心灵沟通〞。渐渐地,它们俩已是你中有我,我中有你,一个新生命就这样诞生了。地面实验结果显示:用于融合的两个“新人〞,一个开的是粉花〔标记为“一号〞〕,一个开的是黄花〔标记为“二号〞〕融合后的细胞再生植株开的是黄花,但形状却和一号相同〔称“一号形状〞,另一个称“二号形状〞〕。这种“太空烟草〞比普通烟草个子矮,株秆粗,烟叶多,是我国太空育种试验的一项重大成果。据此答复以下问题:〔1〕由于细胞的密度不同,因此在地面上进行细胞融合非常困难。从理论上讲,在太空中细胞更容易融合,可能的原因是。在显微镜下观察,“新人〞的细胞膜融合在一起,使细胞呈圆球状,这是因为膜具有特性。“细胞婚礼〞中用到的诱导融合技术是。〔2〕两种烟草原生质体融合时,类型是要被淘汰的。类型是我们需要的,这样的细胞经组织培养后,再生的植株属倍体。〔3〕植物体细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优点是。〔4〕“太空烟草〞能稳定遗传吗?为什么?2.以下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。〔1〕技术是单克隆抗体技术的根底。〔2〕在图中HAT培养上,未有融合的_________________和融合的_________________都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长。〔3〕单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最主要的优点是_________。〔4〕选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速特点,又具备淋巴细胞的_________特点,经过选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行______________和___________,经屡次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或小鼠腹腔内增殖,从________________或________________中,就可以提取出大量的单克隆抗体了。〔5〕淋巴细胞是由动物体中的细胞分化、发育而来。3.细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请答复:〔1〕试管中除融合的杂种细胞外,还有种融合细胞。〔2〕设计一方法〔不考虑机械方法〕,从培养液中别离出杂种细胞,并说原理。方法:。原理:细胞株人染色体编号细胞株人染色体编号12345678A株++++----B株++--++--C株+-+-+-+-养,获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如有表〔“+〞有,“—〞无〕测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。结果是:①B株有a酶活性;②A、B、C株均有b酶活性:③A、B株有c酶活性;④C株有d酶活性;⑤A、B、C株均无e酶活性。假设人基因的作用不受鼠基因影响,那么支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的、、、和号染色体上。答案1.〔1〕重力作用很弱一定的流动性电刺激诱导融合〔2〕自身融合黄花烟草——某新一号烟草多〔或四〕〔3〕克服了远缘杂交不亲和的障碍 〔4〕如果“太空烟草〞为纯合子,无性繁殖和有性繁殖都能稳定遗传;如果为杂合子,无性繁殖能稳定遗传,有性繁殖会出现性状别离。培养过程中也可能会发生基因突变。2.(1)动物细胞培养(2)亲本细胞具有同种核的细胞(3)特异性强,灵敏度高,并可能大量制备(4)大量增殖分泌专一抗体克隆化培养抗体检测细胞培养液小鼠腹水(5)骨髓造血干3.〔1〕2〔2〕培养液中参加氨基嘌呤,收集增殖的细胞参加氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖〔3〕61278附件3:教学反思本节教学设计贯彻“用教材教,而不是教教材〞的思想,采用“情境-探究〞导学,努力拓宽学生科技视野,引导学生学习现代生物技术。由“太空婚礼〞——植物原生质体融合、动物细胞融合实验创设情境,在复习植物体细胞杂交技术的同时,导出动物细胞融合技术及其应用的学习,以任务驱动让学生主持太空航天动物科研工程“设计单克隆抗体制备方案〞,在真实情境、挑战性的任务驱动下,激发学生探究性学习的热情,借助单克隆抗体制备流程图解读,引导学生既关注宏观步骤,又重视对一些重要方法细节的理解,抓住技术流程、方法和筛选主线,以问题导向,启迪学生思维,帮助学生理解单克隆抗体制备原理与应用,培养学生综合运用知识能力,取得较好的教学效果。“情境—探究〞导学课堂教学模式一、模式目标以学生为主体,激发学生学习热情,使其处于愿学、乐学、会学的状态,教师成为学生学习的引导者、帮助者、促进者。二、模式流程主要包括“自主整理—情境导入—问题探究—解释迁移—归纳整合—训练提升〞六个环节。1、准备阶段〔课前预习〕课前给学生自主预习提纲〔以问答或填充等形式〕,进行本节内容学习预备知识和根底知识的整理。可以到达课前就调动其学习的积极性,同时节省课堂时间用于重点知识的讨论与分析,提高课堂效率。让学生写出预习中发现的疑难问题〔2个以上〕,带着问题进课堂。2、导学阶段〔课堂完成〕〔1〕情境导入一个好的情境,是教学成功的一半。它能吸引学生的注意力,激发学生学习兴趣,让学生的思维处于活泼状态,为探究环节提供情感动力。情境创设最好具有真实性、外乡性、时代感,要联系学生生活实际,吸引学生眼球。〔2〕问题探究情境起什么作用?问题情境,情境创设是为提出与学习内容相关的问题,围绕相关主线设计问题串〔如现代生物技术的过程或方法,科学探究思维过程等〕,在符合学生认知规律的情况下展开,要围绕学生的最近开展区提问,让他“跳一跳,够得到〞,提出的问题要有针对性,是重点、关键点、学生学习的难点、疑点、兴奋点,问题要具体、明确,任务性强。启发学生通过看书、实验、观察、思考、查阅资料、讨论、动手操作等活动进行探究性学习。〔4〕解释迁移学生探究性学习后,做出问题解答,教师评价或生生互评、自评。不要害怕学生暴露出来的错误,错误是好的教学资源。〔教学生学会、教学生学、教学生会学〕教师要有针对性地聚焦重点、突破难点、厘清疑点,对问题进行精要的解释,以此纠正一局部学生模糊的知识,帮助学生形成正确概念。进行变式训练,促进知识迁移。〔3〕归纳整合对知识进行归纳、整理,使形成系统明晰的知识结构。教师要努力总结揭示知识背后的规律、方法。3、应用评价阶段训练提升〔课堂或课后完成〕呈现表达本节内容的典型练习题,最好是新情境下的信息题,以检测学习效果〔是否真正理解和掌握〕,稳固内化新知识,形成运用知识解决实际问题的能力。以试卷、作业的形式检查
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