百合产地加工技术研究

百合产地加工技术研究

中药百合来自百合科植物卷丹的rifolium。叶子是丽叶酒。海拔l。g8if。e.布朗非正式尔。细腻的叶子。性味甘寒,具有养阴润肺、清心安神之功效。用于阴虚久咳,痰中带血,虚烦惊悸,失眠多梦,精神恍惚等症。中药材都要经过产地加工和炮制才能入药,长期以来,百合的产地加工没有统一的标准操作规程和质量标准,都是百合产地的药农凭经验加工,不同的加工操作者之间差异较大。许多地区的药农为了使加工的百合药材外形颜色美观,加工时经常对百合进行熏硫处理。然而,产地加工又对百合有效成分影响较大。只有科学的规范化的产地加工方法,才能保障药材的外观质量优良和内在质量稳定,达到《中药材生产质量管理规范(试行)》中要求的“保持药材质量稳定”,实现百合生产的“安全、有效、稳定、可控”。笔者在湖南省湘西自治州龙山县开展百合规范种植研究课题时,设计了百合不同取材部位、不同烫片时间、不同干燥方法等产地加工试验研究内容,对商品中药材百合的主流药材品种卷丹LiliumlancifoliumThunb.进行研究,探讨百合产地加工方法对百合主要成分多糖、总磷脂成分的影响,以期确定百合的最佳产地加工方法,制定百合产地加工的标准操作规程,从而确保百合产品的质量稳定和可控。1材料、药品和机器1.1村百合种植基地的种植成就药材来源于湖南省湘西苗族自治州龙山县洗洛村百合规范化种植基地的种源相同、栽培时间、施肥管理和其他田间管理一致的同一块试验田。2003年8月1日采收,去除茎叶和须根。1.2中片、混片、百合混片制备取同一块试验田的新鲜鳞茎,分别剥取外片(上年种茎的鳞叶)、心片(鳞茎中央抱合紧密的5～6枚鳞叶)、中片(去除外片,心片部分后的鳞叶)、混片(鳞茎上所有的鳞叶),洗净,沸水中烫煮11min,涝出冷水漂净,晒干。另取百合混片分别烫煮7、9、11、13、15min,捞出冷水漂净,晒干。熏硫干燥法取鲜百合混片在烫煮11min后,捞出冷水漂净,熏硫24h,然后晒干。烘干干燥法取鲜百合混片在60℃直接烘干。1.3fa/ja电仪器:UV-1600紫外可见分光光度计(北京瑞利公司);TP3000超声波提取器(天鹏电子新科技有限公司);FA/JA电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司);TD4台式自动平衡离心机(长沙平凡仪表有限公司);DK-600型电热恒温水浴槽(上海精宏实验设备有限公司)。药品:葡萄糖对照品由美国Sigma公司提供,硫酸、苯酚、钼酸铵、抗坏血酸等均为分析纯。2实验方法2.1百合多糖的提取(1)标准曲线的制备:精密称取葡萄糖对照品(105℃烘干至恒重)60mg,溶解并定容至100ml,为葡萄糖对照储备液、含有葡萄糖0.6mg/ml。再精密吸取葡萄糖对照储备液0、0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、3.5ml,分别置于25ml容量瓶中定容摇匀,精密吸取2ml各浓度溶液,加入1ml4%苯酚混匀,迅速加入7ml浓硫酸,混匀,40℃水浴30min,冰水浴5min,以第1份为空白,490nm处测其吸光度,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,计算得出回归方程为Y=0.0128+0.5001x,r=0.9996。线性范围为0.012～0.084mg/ml。(2)多糖的提取:精密称取60℃烘干4h的百合粉(过40目)1.000g,精密加水100ml,称重,超声波提取40min,称重,水补足减失重量,棉花过滤,取滤液2ml,小心加入95%乙醇10ml搅拌,3000r/min,离心10min,水溶解沉淀并转移至50ml容量瓶中,定容摇匀,为样品制备液。(3)样品的含量测定:从样品液中精密吸取2ml,加入1ml4%苯酚混匀,同标准曲线项下操作,测定百合样品的吸光度值,计算百合样品液浓度。多糖含量(%,以葡萄糖计)=(百合样品液浓度×50×25×10-3/样品重)×100%2.2磷酸盐磷酸检测(1)标准曲线的制备:将磷酸二氢钾105℃烘干至恒重,干燥器内冷却至室温,精密称取,配置成含磷0.01mg/ml的磷标准液,备用。精密吸取磷标准液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml于不同试管中,加入0.25ml消化液,电炉上消化至颜色由棕黑变为无色透明,冷却,转移至25ml容量瓶中,磷显色剂(3mol/L硫酸-水-2.5%钼酸铵-10%抗坏血酸=1:5:1:1,按序配置当天使用)定容,摇匀,65℃水浴10min,冷却至室温,以标0为空白,700nm处测定磷脂磷酸的吸光度。以磷浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,自由度为6,p<0.05,有相关性,用最小二乘法求出回归方程,即Y=-2.24×10-3x+0.3276r=0.9986,x为含磷浓度,Y为吸光度,线性范围为0.04～0.32×10-3mg/ml。(2)样品的提取:精密称取百合粉5.000g,精密加入Folch试剂(氯仿:甲醇=2:1)50ml,盖塞称重,超声波提取40min,补足减少溶剂,迅速过滤,密闭,冰箱保存,为样品制备液。(3)样品的含量测定(采用钼蓝比色法):精密吸取百合样品液2.5ml,水浴挥干,加入0.5ml消化液,同标准曲线项下操作测定百合样品的磷脂磷酸浓度。百合样品的总磷脂含量(mg/100g)=(mg/ml×25ml×40×25×10)/5.000,其中25为磷脂转化系数。3结果与分析3.1结果经过计算,百合各药材样品中有效成分百合多糖和总磷脂含量见表1。3.2百合干燥和烫片时间的确定(1)从表1中的样品编号1、2、3、8可以看出,在百合剥片处理时,不同取材部位的百合鳞叶,其有效成分百合多糖和总磷脂含量存在差异,其中百合多糖含量为中片>外片>混片>心片,以中片含量最高,心片含量最低;百合总磷脂含量为心片>混片>中片>外片,以心片含量最高,外片含量最低。因此百合产地加工时,应将外片、中片、心片分开盛放,便于烫片加工时能准确地把握烫片的时间,也便于临床处方用药时的准确定量和制药企业的准确投料。(2)熏硫干燥法在中药材百合传统加工时经常使用,熏硫后的百合容易干燥,折干率高,药材的外观颜色洁白如玉,晶莹透明,同时熏硫可以杀菌、防霉,便于百合药材的贮藏。从表1中的样品编号4和8反映出产地加工时熏硫与否虽然对百合多糖的含量没有太大影响,但是对百合总磷脂的含量影响较大,熏硫后百合总磷脂含量明显降低。另外,熏硫后的百合药材中残留有大量的硫化物,使药材的毒性增大,且熏硫加工过程中对环境造成一定程度的污染。因此为了确保百合药材的内在品质和临床用药的安全,百合产地加工时应彻底改变传统的熏硫干燥法,生产“绿色”百合药材产品。(3)药材样品5采用烘箱烘烤百合新鲜鳞片,此法对百合多糖和总磷脂含量没有多大影响,百合多糖和总磷脂含量和晒干法相当,同时该方法具有干燥时间短,省时省力和不受采收季节天气阴雨的影响等优点,但由于烘烤过程发生梅拉德反应,百合干燥后颜色变成深褐色,外观性状较差,而且烘干干燥法设备投资大,加工成本高。故百合药材干燥时不宜采用此方法进行干燥。(4)百合产地加工过程中,如何把握好烫片时间的长短,是百合产地加工过程中的一项关键技术。烫片时间过短,百合颜色呈现褐色,外观颜色较差;烫片时间过长,百合的鳞片易破碎,不成片形,外观性状较差。同时,表1中的样品编号6、7、8、9和10反映出烫片时间的长短对百合多