工业废水污染监测 氨基安替比林分光光度法测水中挥发酚

4-氨基安替比林分光光度法测挥发酚1.实验原理1.1水中的挥发酚（1）酚类化合物：是指羟基与芳环直接连接的一类有机化合物，分为挥发酚与不挥发酚。（2）挥发酚：指沸点在230℃以下，能随水蒸气一起蒸出的一类酚类化合物。（3）与4-氨基安替比林（4-AAP）显色的酚。41.24-AAP分光光度法测定挥发酚原理

酚类化合物于pH=10.0±0.2的介质中，在铁氰化钾的存在下，与4-氨基安替比林（4-AAP）反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，在510nm波长处有最大吸收，用比色法定量。反应式如下：51.24-AAP分光光度法测定挥发酚原理本法测定的酚类不是总酚，而仅是与4-氨基安替比林显色的酚，并以苯酚为标准，结果以苯酚计算含量。1.24-APP法适用情况4-氨基安替比林光度法(HJ503-2009)适用于酚浓度低于5mg/L的天然水或污废水。表1方法分类及适用情况方法类别适用范围适宜水样萃取分光光度法0.001~0.04mg/L地表水、地下水和饮用水直接分光光度法0.04~2.5mg/L工业废水、生活污水稀释分光光度法2.50~5.0mg/L。工业废水、生活污水71.4萃取4-氨基安替比林分光光度法显色后用三氯甲烷萃取，以三氯甲烷为参比，于460nm波长处测定吸光度。适用于0.001~0.04mg/L的含酚水样。2.仪器与试剂准备2.1仪器准备（1）紫外可见分光光度计；（2）30mm光程比色皿；（3）500mL全玻璃蒸馏器；（4）500mL锥形分液漏斗。

2.2试剂准备（1）无酚水：加氢氧化钠使水呈现强碱性，并加入高锰酸钾至溶液呈紫红色，移入全玻璃蒸馏器中加热蒸馏，集取馏出液备用。（2）酚标准储备液（1.00g/L）:称取1.00g精制苯酚，溶解于无酚水，移入1000mL中，用无酚水稀释至标线，并进行标定。置冰箱内冷藏，可稳定保存一个月。2.2试剂准备（3）酚标准中间液（10mg/L）：取适量酚标准贮备液用无酚水稀释至100mL容量瓶中，使用时当天配制。（4）酚标准使用液（1.00mg/L）：量取10.00mL酚标准中间溶液于100mL容量瓶中，用无酚水稀释至标线，配制后2h内使用。2.2试剂准备（5）0.1mol/LKBrO3-KI溶液：称取2.784gKBrO3溶于水，加入10gKI，溶解后移入100mL容量瓶中，用水稀释至标线。（6）0.0125mol/LNa2S2O3标准溶液：称取3.1gNa2S2O3，溶于煮沸放冷的水中，加入0.2gNa2CO3，溶解后移入1000mL容量瓶中，用水稀释至标线。临用前按照GB7489-87标定。（7）0.01g/mL淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，加沸水至100mL，冷却后移入试剂瓶中，冰箱内冷藏保存。3.萃取分光光度法步骤3.1水样采集与保存（1）按照《地表水和污水监测技术规范》（HJ/T91）的相关规定采集大于500mL体积的水样于硬质玻璃瓶中；（2）用玻璃棒蘸取水样于淀粉-碘化钾试纸上，观察其颜色；若试纸变蓝，说明有游离氯等氧化性物质存在，应加入过量硫酸亚铁去除；3.1水样采集与保存（3）用pH试纸测定水样pH值，如果pH>4.0，应及时加入磷酸酸化至pH约为4.0，并加入适量硫酸铜，使样品中硫酸铜浓度约为1g/L，以抑制微生物对酚类的生物氧化作用。（4）处理好的水样应在4℃下冷藏，24小时内测定。3.2蒸馏（1）取250mL样品移入500mL全玻璃蒸馏瓶中，加25mL水，加数粒玻珠以防止暴沸；（2）加数滴甲基橙，加磷酸溶液使溶液显橙红色（pH=4）；3.2蒸馏（3）加入5.0mL硫酸铜溶液，连接冷凝装置并开启，加热蒸馏，收集馏出液250mL于容量瓶中，备用。（4）以无酚水代替试样，按与水样测定相同步骤进行蒸馏，其馏出液作为空白样。（1）将馏出液250mL移入500ml分液漏斗中，加2.0mL缓冲溶液，混匀，pH值为10.0±0.2；（2）加1.5mL的4-氨基安替比林溶液，混匀；（3）再加1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀后密塞，放置10min。3.3显色3.4萃取（1）在上述显色分液漏斗中准确加入10.0mL三氯甲烷，密塞，剧烈振摇2min，倒置放气，静置分层。（2）用干脱脂棉或滤纸拭干分液漏斗颈管内壁，于颈管内塞一小团干脱脂棉或滤纸；3.4萃取（3）打开分液漏斗旋塞，使三氯甲烷层通过干脱脂棉团或滤纸流出，弃去最初滤出的数滴后，将三氯甲烷及萃取物直接放入光程为30mm的比色皿中。（4）空白样按照样品的萃取过程进行。3.5酚标准系列溶液配制于一组8个分液漏斗中，分别加入100ml无酚水，依次加入0.00、0.25、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00mL酚标准使用液，再分别加水至250mL，按照水样的方法进行显色和萃取操作。3.6吸光度测定（1）于460nm波长，以三氯甲烷为参比，测量三氯甲烷萃取液的吸光度；（2）记录数据：将测定结果记录入下表。3.6吸光度测定（2）数据记录。表2水中挥发酚测定数据记录表试样10mg/L酚标准中间液水样吸取体积（mL）0.000.501.003.005.007.0010.0012.5025.0025.00苯酚含量（mg）0.000.0050.010.030.050.070.100.125吸光度A3.7校准曲线法定量（1）以标准系列溶液测得的校正吸光度为纵坐标，以相应溶液的酚含量毫克数为横坐标绘制标准曲线。（2）根据水样的校正吸光度值查找对应的酚含量（mg数）；（3）计算水样挥发酚含量。Axmx（3）计算水样挥发酚含量：挥发酚浓度（以苯酚计，mg/L）=（mx-m0）/V

式中：mx——由水样测得的校正吸光度，以标准曲线上查得相应的挥发酚的含量，mg；

m0——由空白试验测得的校正吸光度，从标准曲线上查得相应的挥发酚的含量，mg；

V——显色时所取馏出液体积，50mL。4.干扰消除4.1氧化剂干扰及消除（1）主要氧化剂：游离氯等；（2）检测方法：采样后，立即滴几滴水样于淀粉-碘化钾试纸上，如出现蓝色，说明存在氧化剂；（3）消除方法：向水样中加入过量硫酸亚铁去除。4.2硫化物干扰及消除（1）检测方法：滴几滴水样于乙酸铅试纸上，如果试纸变黑色，说明有硫化物存在；（2）

消除方法：向水样中加磷酸酸化，直至生成的硫化氢完全逸出。（注意硫化氢有毒！）4.3还原性物质干扰及消除（1）还原性物质：甲醛、亚硫酸盐和油类等。（2）消除方法：①分取适量样品于分液漏斗中，加硫酸溶液使呈酸