一测多评法在中药质量控制中的研究进展

一测多评法在中药质量控制中的研究进展

中药的化学成分具有多样性和复杂性的特点，其有效成分通常有许多类型。由于中医药化学品分离困难、个别不稳定且难以供应且供应价格高的原因，导致对照产品的供应和使用不合理。王智民等提出了“一测多评”法,即利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系,只测定一个成分(对照品可得到者),来实现多个成分(对照品难以得到或难供应)的同步测定。近年来,有关这方面的研究报道逐渐增多,且在2010版中国药典一部中,已经收录利用该法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱等5个成分的含量。本文主要探讨“一测多评”法在中药质量控制中的研究进展,阐述该法在中药质量控制和评价研究中的应用,为中药质量控制模式的发展趋势提供参考。1测多评法w黄信等曾采用校正因子法,用牛蒡苷对照品,同时测定出牛蒡子中牛蒡苷、牛蒡苷元、拉帕酚C和拉帕酚H等4种成分的含量,但是需提供鉴别和定位用的对照品。“一测多评”法原理与校正因子法原理基本一致,并且提出利用相对保留时间(RT)差和峰形判断目标峰的位置。其原理如下:在一定的范围内(线性范围内)成分的量(质量或浓度)与检测器响应成正比,即:W=fA。在多指标质量评价时,以药材中某一典型组分(有对照品供应者)为内标,建立该组分与其他组分之间的相对校正因子,通过校正因子计算其他组分的含量。这种测定一个成分,实现对多个成分定量的方法命名为“一测多评”法。假设某样品中含有i个组分WiAi=fi(i=1‚2‚⋯‚k‚⋯‚m)WiAi=fi(i=1‚2‚⋯‚k‚⋯‚m)式中Ai为组分峰面积;Wi为组分浓度。选取其中一组分k为内标,建立组分k与其他组分m之间的相对校正因子。fkm=fkfm=Wk×AmWm×Akfkm=fkfm=Wk×AmWm×Ak由此可导出定量计算公式:Wm=Wk×AmWm×AkWm=Wk×AmWm×Ak式中Ak为内标物峰面积,Wk为内标物浓度。Am为其他组分m峰面积,Wm为其他组分m浓度。2紫外相对校正因子法到目前为止,“一测多评”法已在木通、大黄、黄连、黄芩、人参、三七等药材多指标含量测定中得到应用,王智民等以木通药材为研究对象,通过方法学确证、方法的耐用性、系统适应性考察和一测多评准确性的评价,对一测多评法的技术适用性和应用可行性进行了探讨研究。结果表明,一测多评法推算的含量与实测法所得含量没有显著性差异,提示试验建立的校正因子比较可信,能够实现在白木通皂苷B和白木通皂苷C对照品缺乏的情况下,通过皂苷PJ1与白木通皂苷B和白木通皂苷C之间相对保留时间差的进行色谱峰定位,利用皂苷PJ1和校正因子计算两者的含量。朱晶晶等通过建立人参皂苷Rb1与其他8种皂苷间的紫外相对校正因子(RCF),实现只用一个对照品测定人参和三七药材中多个人参皂苷类成分的含量,只需测定人参和三七药材中Rb1的含量,其余人参皂苷含量由其RCF值计算得到,实现一测多评。并与常规外标法比较,两种药材中一测多评法与外标法所得结果均无显著性差异,所建立的校正因子可同时用于人参及三七药材及其相关产品的定量分析及质量评价,实验还证明在紫外吸收特征相似的同类化合物间开展一测多评研究是可行的。匡艳辉等以黄连药材为研究对象,以药材中5个典型生物碱为指标,建立了小檗碱与巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的相对校正因子,并用该校正因子进行巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的含量计算,结果表明以小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱同步测定的一测多评法控制黄连药材和饮片的质量是可行的、准确的,目前该法已经被2010版中国药典一部收录。宋亚芳等以吴茱萸为研究对象,建立吴茱萸次碱与吴茱萸内酯、吴茱萸碱的相对校正因子,并用该校正因子进行吴茱萸内酯、吴茱萸碱的含量计算,实现了“一测多评”,结果还表明“一测多评”法可以用于特定的不同类型成分间的测定。朱晶晶等采用HPLC-DAD以药材中典型成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素为指标,在一定的线性范围内,建立黄芩苷与后3种成分间的相对校正因子,并测定黄芩苷的含量,用所建立的校正因子计算其他3个成分的含量,结果表明“一测多评”法可用于黄芩药材的多成分质量评价。3测多评法与外标法比较的研究近年来也有研究将“一测多评”法应用于复方中药的质量控制,邹桂欣等将适合于中药特点的的利用1个对照品同步测定多组分的分析方法首次应用于中药复方制剂的质量控制中。以葛根素为指标,建立冠脉康胶囊中该成分与大豆苷元及丹酚酸B的相对校正因子,用校正因子计算大豆苷元及丹酚酸B的含量,同时对一测多评的计算与外标法实测值进行比较,并对不同品牌填料及不同长度的色谱柱进行考查,评价一测多评法在复方制剂中应用的准确性和科学性。结果表明,利用一测多评法在不同色谱柱的计算值与外标实测值之间没有显著性差异。用本法可不提供大豆苷元及丹酚酸B的对照品,只采用葛根素对照品即可同时控制三者的含量,适合中药的多指标质量评价模式的要求。还有王跃生等以四逆散为研究载体,选取芍药苷作为四逆散中各成分的参照“内标”,在不同的波长下测定各成分相对于内标成分的校正因子,利用校正因子和芍药苷对四逆散中柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷进行测定,建立了“内标”多控法中药复方质量评价模式,并对该评价模式进行了方法学考察。其实“内标”多控法与“一测多评”法原理和方法基本相同,作者认为该研究也是“一测多评”法在复方中药制剂上的应用。4“一测多评”法需进一步完善在对照品缺乏的情况下,“一测多评”法可以作为多指标含量测定方法的一种补充,用于中药的质量控制和评价。该方法虽然已经在部分中药材和复方中药制剂多指标成分的测定中得到了成功应用,但是“一测多评”法还需进一步完善,使其能应用于更多中药质量控制。近年来有文献报道采用“替代对照品法”对中药有效成分进行含量测定的研究,谢元超等首次提出运用“替代对照品”的思路,并对其进行了方法学研究,其原理与“一测多评”法基本一致,“替代对照