分光光度计的使用和邻二氮菲分光光度法测定铁实验报告

实验八分光光度计的使用和邻二氮菲分光光度法测定铁实验报告、实验原理1、分光光度法基本原理当光通过溶液后有一部分被物质吸收，如图1所示。如果I0为入射光的强度，It为透过光的强度，则It/I0是透光率T，-lgT定义为吸光度A。实验证明，当一束单色光(一定波长的光)通过一定厚度b的有色溶液时，A=£bc，这种定量关系称为朗伯-比尔定律。其中£是一个比例系数，它与入射光的波长以及溶液的性质、温度等因素有关，是物质的特征常数。任何一种物质的溶液对不同波长光的吸收程度是不同的。如果将各种波长的单色光依次通过一定浓度的某一种物质溶液，测量该溶液对各种单色光的吸光度A,以波长入为横坐标，以吸光度A为纵坐标绘制的曲线称为吸收曲线，如图2所示。最大吸光度所对应的波长称为最大吸收波长，用入表max示。在xmax处进行测量，光的吸收程度最大，测定的灵敏度和准确度最高。max在一定的条件下，测量一系列已知准确浓度的标准溶液的吸光度A,以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标绘制曲线，即得工作曲线，如图3所示。在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A,查工作曲线即可确定出相应的浓度。/T\I 1 ?皿^nin)图1溶液对光的吸收图1溶液对光的吸收图2物质吸收曲线图3工作曲线2、邻二氮菲分光光度法测铁原理邻二氮菲(o-Ph)在pH=2〜9的溶液中与Fe2+生成稳定的红色络合物，lgK=21.3，最大摩尔吸收系数8=1.1X104，其反应式如下：Fe2++3(o-Phen)=Fe(o-Phen)3红色络合物的最大吸收峰位于510nm。对于Fe3+,可用盐酸羟胺事先将其还原至Fe2+。本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、A13+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-,20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO43-，5倍Co2+、Cu2+等均不干扰测定。本实验采用工作曲线法测定铁。、基本操作1、721型分光光度计的结构721型分光光度计的基本结构：光源、单色器(光栅)、比色槽和比色皿、光电转换器、显示装置(微安表、数码显示屏)。面板结构如图4所示:叱町1架—比色皿拉杆透光率为0调节旋钮If比辿皿暗箱盖■内透光率为叱町1架—比色皿拉杆透光率为0调节旋钮If比辿皿暗箱盖■内透光率为10。调节旋钮波长读「数窗口」说听"■厂灵嫩度调节旋钮ptl^TT芙721龟直殊* Z7亡波仪调节旋钮显示窗口]图4721型分光光度计面板结构2、 721型分光光度计使用方法（1） 打开电源开关，指示灯亮，打开比色皿暗箱盖，预热20〜30分钟。（2） 调节波长调节旋钮，选择所需的单色光波长，用灵敏度旋钮选择所需的灵敏档。（3） 将装有参比溶液的比色皿放入比色皿架第一格，旋转透光率为0调节旋钮使显示窗口的指针为0%，盖上比色皿暗箱盖，推进比色皿拉杆使参比溶液位于光路。旋转透光率调节为100旋钮，使显示窗口的指针处于100%。按上述方法连续几次调整0%和100%位即可进行测定工作。3、 721型分光光度计使用注意事项（1） 连续使用仪器的时间不应超过2小时，最好是间歇0.5小时后，再继续使用。（2） 禁止将比色皿放在仪器面板上，应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产生划痕，每次使用完毕后，要用蒸馏水洗净并倒置晾干后，存放在比色皿盒内。（3） 仪器不能受潮，应经常注意单色器上的防潮硅胶（在仪器的底部）是否变色。三、 实验步骤1、 铁标准系列溶液的配制在6个100mL的容量瓶中，用吸量管分别加入0.0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0mL100卩g/mL铁标准溶液，分别加入2mL10%盐酸羟胺、4mL0.15%Phen和8mL10%NaAc溶液，每加一种试剂后摇匀。用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。2、 吸收曲线的测定取铁标准系列溶液3号,用1cm比色皿，以试剂空白（1号）为参比溶液，在440〜500nm和520〜560nm之间，每隔10nm测一次吸光度；在500〜520nm,每隔5nm测定一次吸光度。绘制A-A吸收曲线。从吸收曲线上找到最大吸收波长久max3、 标准曲线的制作用1cm比色皿、以试剂空白（1号）为参比溶液，在最大吸收波长（510nm）下，测量各溶液的吸光度。以含铁量（yg）为横坐标、吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。4、 试样中铁的测定准确移取试液（工业盐酸）2mL于100mL容量瓶中，按上述步骤显色后在相同条件下测量吸光度，由标准曲线上查出试样中相当于铁的微克数，计算试样中铁的含量（g/1）。四、 数据记录和处理

1.吸收曲线的测定波长/nm440450460470480490500520530540550560吸光度0.2850.3680.3890.4120.4390.4680.4700.5020.5150.4810.4030.268波长/nm500505510515520吸光度0.4360.4370.4380.4300.4262•标准曲线的制作序号123456移取铁标准溶液体积/ml0.01.02.03.04.04.0吸光度0.1330.4080.5200.5910.639♦系列1——线性（系列1）y=D.1195K+0.0997t87♦系列1——线性（系列1）y=D.1195K+0.0997t87t6B5-t43.2„lootop0oroto.o.a吸光度4 5 6浓度/ug.mol-1吸收曲线fc66吸光度0.0454X-10.968=(171♦.乘列1一务项fc66吸光度0.0454X-10.968=(171♦.乘列1一务项貳｛系列1）0_aoo

□450 SOO波长/nmS50 600