复方白头翁胶囊对腹泻犬小肠形态结构的影响

复方白头翁胶囊对腹泻犬小肠形态结构的影响

动物腹泻是兽医临床常见病之一，也是致死率最高的疾病之一。主要是条件致病菌引起的,目前治疗腹泻的药物多为抗生素,但抗生素长期使用所引起的药物残留及其产生的耐药性问题日益严重。应用中兽药治疗腹泻并解决药物残留和耐药性问题,越来越受到国内外的关注。研究表明,中药治疗腹泻多从抗菌和肠黏膜修复两方面起作用。复方白头翁胶囊是由中国农业大学研制的新型抗腹泻中药制剂,经临床试验验证,对犬大肠杆菌性腹泻具有很好的治疗效果。该试验采用病理图像分析技术研究了复方白头翁胶囊对腹泻犬小肠绒毛高度、隐窝深度和V/C值的影响,从而为进一步研究复方白头翁胶囊治疗腹泻的机制提供形态学依据。1材料和方法1.1各组大鼠肠道攻毒、攻毒、治疗30只体重(3.0±0.5)kg幼犬,雌雄各半,购自北京芳元缘养殖场。将所有实验犬平均分为3个组:A组(阴性对照组),B组(阳性对照组,大肠杆菌攻毒),C组(中药治疗组,大肠杆菌攻毒+治疗),每组10只。大肠杆菌攻毒量为300亿/3kg,攻毒后12h,中药治疗组给予复方白头翁胶囊进行治疗,治疗量为每天1次,每次1粒,连用3d。1.2仪器、实验方法复方白头翁胶囊:由中国农业大学动物医学院提供。大肠杆菌:C83917O9:987p,购自中国兽医药品监察所菌种室。伊红染液:伊红Y1g,75%酒精100mL。中性甲醛:甲醛(浓)120mL,加蒸馏水880mL,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。LeicaRM2126RT型切片机:上海铼卡仪器有限公司,上海。BH2生物显微镜:Olympus,日本。病理图像分析系统6.0:Olympus公司,日本。1.3常规he染色实验第四天将实验犬放血处死,外科手术方法打开腹腔,迅速取出十二指肠、空肠和回肠各2cm左右。各段采样位置:十二指肠,距幽门口2~5cm处采集;空肠,整个空肠中段处采集;回肠,距回盲口处3~5cm处采集。十二指肠、空肠、回肠组织采集后,取各小肠段1cm生理盐水冲洗干净,放入10%中性甲醛中固定。石蜡包埋,连续横断切片,厚6μm,进行常规HE染色。光镜下详细观察和比较各组肠绒毛形态结构的变化情况,并利用Moditec照相处理软件和病理图像分析系统,每个肠管取2张切片,每张切片选取3个最长绒毛高度、最深隐窝深度进行测量。1.4处理数据所有数据用Mean±SD表示。采用SPSS16.0统计软件进行数据处理,one-wayANOVA分析和LSD多重比较。2结果2.1组隐窝深度值比较阴性对照组肠绒毛高度显著高于阳性对照组和中药治疗组,其中中药治疗组肠绒毛高度高于阳性对照组,且差异显著(P<0.05)。3组中隐窝深度值以阳性对照组最大,其次是中药治疗组,两组间差异不显著(P>0.05),阴性对照组与中药治疗组差异不显著(P>0.05),但与阳性对照组差异显著(P<0.05)。V/C值在数值上表现为阴性对照组最大,中药治疗组大于阳性对照组,除阴性对照组与阳性对照组差异显著(P<0.05)外,其他各组差异均不显著(P>0.05)。见表1。2.2治疗组和阴性组v/c值比较阴性对照组肠绒毛高度显著高于阳性对照组和中药治疗组(P<0.05),中药治疗组绒毛高度与阳性对照组差异显著(P<0.05)。阴性对照组V/C值大于中药治疗组(P<0.05)和阳性对照组(P<0.05)。回肠的隐窝深度从数值上看,以阳性对照组高于中药治疗组(P>0.05)和阴性对照组(P<0.05),中药治疗组隐窝深度虽大于阴性对照组,但差异不显著。见表2。2.3组患者隐窝深度较大时,比阴性对照组更少中药治疗组肠粘膜高度、隐窝深度和V/C值显著高于阳性对照组(P<0.05)。与阴性对照组相比,中药治疗组除隐窝深度较大外(P<0.05),其他均小于阴性对照组(P<0.05)。阳性对照组绒毛膜高度和V/C值均小于阴性对照组(P<0.05),而隐窝深度比阴性对照组大(P<0.05)。见表3。3肠速康治疗小鼠腹泻的临床效果临床上采用中草药治疗腹泻并取得了很好的效果,李有田等发现复方山芪颗粒具有很好的抗腹泻作用;谢世荣等研究发现复方儿茶水提液可以通过抗炎对抗炎性介质的泻下作用,产生抗腹泻作用;时维静等用白头翁汤治疗由蓖麻油引起的小肠腹泻和由番泻叶引起的大肠性腹泻所,取得了很好的成果。该试验所用中药复方由白头翁、秦皮、三七等几味中药组成。白头翁有明显的抗病原微生物作用。对痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、结核杆菌均能抑制,对肠粘膜有收敛作用,故能止泻、止血。所含白头翁素有镇静、镇痛及抗痉挛作用,可缓解腹痛、腹泻,减轻出血。经临床试用于幼犬大肠杆菌性腹泻,结果表明,具有良好的治疗效果。小肠是机体营养物质吸收和转运的主要部位,吸收是小肠绒毛的主要功能。肠绒毛高度的增加能够使小肠吸收营养物质的面积增大,所以肠绒毛的长短直接影响着动物的生长发育。绒毛高度与细胞数量呈显著相关,只有成熟的绒毛上皮细胞才具有养分吸收功能。因此绒毛短时,成熟细胞少,养分吸收能力低。当肠道受到侵袭或应激反应时,肠绒毛就会受损变短,绒毛上皮细胞就会减少。该试验中所有大肠杆菌感染病例,肠绒毛高度均明显小于比阴性对照组(P<0.05),但中药治疗组的肠绒毛高度高于阳性对照组。说明肠速康具有保护和促进肠绒毛的修复的功能,但修复的机理尚有待进一步研究。小肠隐窝是绒毛根部上皮陷入固有层形成的管状腺。隐窝深度主要是反映上皮细胞的生成率,上皮细胞不断从隐窝基部向绒毛端部迁移、分化,形成具有吸收能力的绒毛细胞,以补充正常的脱落。如果此过程减慢,则基部的细胞生成率降低,使隐窝变浅。但当肠道生理机能发生改变时,会产生大量具有分泌功能的未成熟上皮细胞,此种细胞的过量产生会导致动物机体腹泻的发生。该试验中可以明显的看出阴性对照组隐窝深度小于阳性对照组(P<0.05)和中药治疗组(P>0.05),虽然在统计上差异不显著,中药组十二指肠、回肠的隐窝深度相比阳性对照组分别减少了16%,10.2%。绒毛高度/隐窝深度的比值(V/C值)则综合反映小肠的功能状态。比值下降,表示消化吸收功能下降,常伴随腹泻的发生。比值上升,消化吸收功能增强,腹泻率下降。该试验组中中药治疗组各组V/C值大于阳性对照组,其中两