第2章-药物鉴别

第二章药物的鉴别试验1一、概述

药物的鉴别试验（identificationtest)是根据药物的分子结构、理化性质,采用化学、物理化学或生物学方法来证明已知药物的真伪。而不是对未知物进行定性分析。是药检工作的首要任务，杂质检查、含量测定的前提。2二、鉴别试验的项目性状一般鉴别试验专属鉴别试验3性状外观：感观规定，一般性的描述。溶解度：反映了在某种溶剂中的溶解性能。物理常数:评价药品质量的重要指标，反映药品的纯净程度。熔点、

比旋度、收系数、凝点、折光率相对密度、馏程、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等4外观：指药品的外表感观和色泽，包括聚集状态、晶型、色泽以及嗅、味如：维生素B1“本品为白色结晶或结晶粉末；

有微弱的特臭，味苦；

干燥品在空气中迅即吸收约4%的水分”（色泽）（聚集状态）（嗅）（味）5溶解度试验法：①供试品准确称取研成细粉

②在25℃±2℃，加溶剂

③每隔5min振摇30s无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解

6极易溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；易溶系指溶质1g(ml)能在溶剂1～不到10ml中溶解；溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂10～不到30ml中溶解；略溶系指溶质1g(ml)能在溶剂30～不到100ml中溶解；微溶系指溶质1g(ml)能在溶剂100～不到1000ml中溶解;极微溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解；几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解。7物理常数1、熔点1）定义：Ch.P规定,熔点系指一种物质由固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。如：雌二醇：175～180℃醋酸地塞米松：223～233℃样品发毛收缩液滴（初熔）澄清（全熔）82）测定方法分三法：第一法：测定易粉碎的固体药品第二法：测定不易粉碎的固体药品第三法：测定凡士林或其他类似物质（详见：Ch.P2010年版二部附录ⅥC

）92、比旋度偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。本药典系用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm，测定温度为20℃。偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“＋”符号表示；使偏振光向左旋转者(逆时针方向)为左旋，以“－”符号表示Ch.P2010年版二部附录ⅥE103、吸收系数

吸光物质在给定波长、溶剂和温度等条件下，单位浓度、单位液层厚度时的吸收度

溶液浓度液层厚度溶液浓度液层厚度摩尔吸收系数(ε)百分吸收系数11具有相似结构的化合物可能有相同的λmax，但吸收系数有差异12一般鉴别试验

（generalidentificationtest）是指依据某一类药物的共同的化学结构或相同的理化特性，来鉴别药物的真伪。有机药物--------官能团无机药物--------阴离子、阳离子一般鉴别试验用于证实药物是哪一类，要进一步证实是哪一种药物，还需要结合专属鉴别试验

13一般鉴别试验

（generalidentificationtest）Ch.P附录Ⅲ中有：有机氟类、有机酸盐类（水杨酸盐）、芳香第一胺类、托烷生物碱类、丙二酰脲类无机金属类（Na+,K+,Ca2+,Ba2+,Li+,Fe3+,Al3+,Zn2+,Cu2+,Ag+,Hg2+等）无酸盐类(Cl-、

SO42-、NO3-)141.有机氟化物有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3

茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物+F-+Ce3+pH4.3碱液吸收152.有机酸盐(1)水杨酸盐水杨酸+FeCl3中性条件弱酸性条件红色配位化合物紫色配位化合物6+4FeCl3+12HCl水杨酸盐+稀盐酸→水杨酸（白色沉淀）溶于醋酸铵16(2)酒石酸盐供试品溶液（中性）+氨制硝酸银

银镜水浴中HO—CH—COOHHO—CH—COOH+2Ag(NH3)2OHHO—C—COONH4HO—C—COONH42Ag++2NH3+2H2O

水浴中173.芳香第一胺类供试品+

稀盐酸0.1mol/L亚硝酸钠碱性-萘酚试液橙黄色到猩红色沉淀N2+Cl-.+NaNO2+2HCl+NaCl+2H2ON2+Cl-.++NaOH+NaCl+2H2O18

4.托烷生物碱类此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitaili反应,显紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色莨菪酸195.无机金属盐（Na,K,Ca,NH4+)

焰色反应：Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色

铵盐：

供试品+NaOH

氨气使湿润的红色石蕊试纸变蓝使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色206.无机酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl白色乳状

Cl-+MnO2Mn2++Cl2硫酸盐：SO42-+Ba2+BaSO4白色

SO42-+Pb2+PbSO4白色加盐酸，无白色沉淀硝酸盐：Cu+NO3-Cu(NO3)2+2NO2（红棕色）Fe2++NO3-Fe3++NO区分NO3-、NO2-H2SO4使湿润的KI_淀粉试纸变蓝

KMnO4褪色NO2-不褪色NO3-H2SO4H2SO421专属鉴别试验

（specificidentificationtest）是证实某一种药物的依据。根据一类药物中每一种药物化学结构的差异理化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。一般鉴别试验依据某类药物共同的特点，区别不同类药物。专属鉴别试验在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，鉴别各个药物单体。22共性丙二酰脲-CONHCONHCO-

可与某些金属离子（Ag+、Cu2+、Hg2+等）反应呈色或产生沉淀巴比妥类药物R+2AgNO3+2HNO3一般鉴别试验23与Pb2+反应生成黑色PbS甲醛硫酸反应碘取代反应专属鉴别试验

硫喷妥钠司可巴比妥苯巴比妥24二、鉴别方法（一）化学鉴别法（二）光谱鉴别法（三）X射线衍射法（四）色谱鉴别法（五）生物法25（一）化学鉴别法

供试品加入适当的试剂，在一定条件下，发生化学反应，通过产生可观测到的明显现象，来鉴别药物真伪的方法。

化学鉴别法特点

操作简便、反应快速、实验成本低、应用广

但专属性比仪器分析法差

分为：

（1）呈色反应鉴别法

（2）沉淀生成反应鉴别法

（3）荧光反应鉴别法

（4）气体生成反应鉴别法

（5）试剂褪色的鉴别法

26（一）、化学鉴别法

（1）呈色反应鉴别法

供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成有色产物

鉴别方法①三氯化铁呈色反应（酚羟基）②有机氟化物的茜素氟蓝法③芳香第一胺类重氮化-偶合反应④托烷生物碱类-Vitaili反应⑤肾上腺皮质激素类的四氮唑⑥含羰基结构的苯肼反应⑦氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应⑧双缩脲反应27③芳香第一胺类芳伯胺+

稀盐酸0.1mol/L亚硝酸钠碱性-萘酚试液橙黄色到猩红色重氮化-偶合反应对乙酰氨基酚红色28①三氯化铁呈色反应（酚羟基）蓝紫色对乙酰氨基酚

（一）化学鉴别法

（1）呈色反应鉴别法

②有机氟化物氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3

茜素氟蓝硝酸亚铈碱液吸收蓝紫色络合物有机氟29④托烷生物碱类-Vitali反应此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。

水解3HNO3三硝基衍生物KOH(C2H5OH)KOH深紫色30⑤肾上腺皮质激素类的四氮唑+2e[H]四氮唑甲臜

皮质激素具有还原性，能将四氮唑还原为有色甲臜

31⑥含羰基结构的苯肼反应++H2O苯肼苯腙32⑦氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应

左旋多巴+CO2+3H2O+例如：33⑧双缩脲反应（开环分解）蓝紫色34（2）沉淀生成反应鉴别法

供试品加入适当的试剂，在一定条件下，反应生成沉淀

（一）化学鉴别法③还原性基团的银镜反应①丙二酰脲类的硝酸银反应②氯化物的银盐沉淀⑦含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）的沉淀反应⑤苯甲酸盐类的三氯化铁反应④生成氧化亚铜红色沉淀反应⑥与重金属离子的沉淀反应⑧磺胺类药物的铜盐反应35丙二酰脲类的硝酸银反应+2AgNO3+2HNO3Cl-+Ag+AgCl氯化物的银盐沉淀36含有还原性基团的药物——银镜反应+AgNO3+NH3·H2OAg异烟肼葡萄糖+碱性酒石酸铜试液（Fehling试液）氧化亚铜+葡萄糖酸37苯甲酸盐类的三氯化铁反应+3FeCl3+OH-+7NaCl+2Cl-赭色沉淀38利多卡因与重金属离子反应2+CoCl2H+亮绿色细小钴盐沉淀39含氮杂环类的生物碱的沉淀反应苯并二氮杂类+BiI3·橙红色沉淀

氯氮氟西泮氯硝西泮+12W03·Si02灰白色沉淀4KIC2H5OH白色C2H5OH黄色阿托品+HgCl2东莨菪碱+HgCl2托烷类生物碱40吡啶环类2+CuSO4+2NH4SCNCu(SCN)2+(NH4)2SO4草绿色配合物沉淀41磺胺类药物的成铜盐反应

磺酰氨基上的活泼氢原子，可被某些金属离子取代，生成有色的金属盐沉淀。磺胺类药物钠盐溶液，加硫酸铜试液生成不同颜色的铜盐沉淀，可供区别及鉴别。42

(3)荧光反应鉴别法

①药物本身在可见光下发射荧光

如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光

②药物与适当试剂反应后发射荧光

如：氯普噻吨+HNO3后，紫外下显绿色

VB1硫色素（蓝色荧光）碱性K3Fe(CN)6（一）化学鉴别法43（4）气体生成反应鉴别法

①大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气。

红色石蕊试纸变蓝

硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色（一）化学鉴别法44②化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体硫鸟嘌呤●7H2O强酸∆H2S（臭鸡蛋气味）使醋酸铅试纸变黑45③含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸汽④含醋酸酯和乙酰胺类的药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。46（一）化学鉴别法（5）试剂退色维生素C与二氯靛酚反应47（6）测定生成物熔点法

制备衍生物测定熔点法药物＋试剂新化合物有一定mp;药物酸化或碱化生成游离酸或碱。操作繁琐费时间，应用较少。（一）化学鉴别法48紫外光谱（UV）红外光谱（IR）近红外光谱法（NIRS）原子吸收法（AAS）核磁共振法（NMR）二、鉴别方法（二）光谱鉴别法491、紫外光谱鉴别法

紫外光谱法操作简便、快速。

用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。

紫外光谱相同的物质不一定是同一种物质。（二）光谱鉴别法50紫外光谱法常有的方法测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度；

规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸光度比值法；

经化学处理后,测定其反应产物吸收光谱特性以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以提高专属性

51①测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长乙胺嘧啶供试品在0.1mol/L盐酸介质中的紫外吸收在272nm处为峰,216nm处为谷。52②规定吸收波长和吸光度比值法两性霉素在362nm、381nm、405nm波长处有最大吸收.规定362nm/381nm处吸光度比值不大于0.6

381nm/405nm波长比值不大于0.9VB12361nm/278nm1.70～1.88361nm/550nm3.15～3.45

53

己稀雌酚注射液用供试品溶液250-450nm波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别。③与对照品比较,对比吸收光谱的一致性54

Ch.P示例一盐酸布比卡因的鉴别试验0.40mg/mlλmax:263nm、271nmA:0.53~0.58;0.43~0.48规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度示例二地蒽酚的鉴别试验λmax:257nm、289nm、356nmA257/A289=1.06~1.10A356/A289=0.90~0.94规定最大吸收波长和吸光度比值法55示例三氯贝丁酯的鉴别试验

0.10mg/mlλmax:280nm、288nm

10μg/mlλmax:226nm规定一定浓度下的供试液的最大吸收波长示例二专属性相对较好56USP采用对照品法

供试药与其对照品按同一方法处理，在同样条件下紫外光谱图一致。BP规定一定波长范围内，仅有一个最大或最小吸收JP与Ch.P相似

各国紫外鉴别法比较572、红外分析法

IR光谱法是有机药物分子的振动-转